Məlumat

2.8: Mikrobioloji Qida Təhlükəsizliyi - Biologiya

2.8: Mikrobioloji Qida Təhlükəsizliyi - Biologiya


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Qidanın Bakterial Çirklənməsinin Yoxlanması

Bakteriyalar inanılmaz dərəcədə müxtəlifdir və təbii dünyanın əksər hissəsində bolca rast gəlinir. Patogen (zərər verən) və potensial patogen bakteriyalar gözlənilməz yerlərdə, məsələn, yediyimiz qidada, içdiyimiz və ya istirahət üçün istifadə etdiyimiz suda, torpaqda, evinizdəki səthlərdə və başqa yerlərdə tapıla bilər.

Təəssüf ki, bizim üçün yediyimiz və içdiyimiz şeylər xəstəliyin ötürülməsi üçün kifayət qədər ümumi vasitələrdir. Yemək və içkilər həzm sistemimizdən keçdiyi üçün qida yoluxucu xəstəliklərin ən çox görülən simptomları qarında narahatlıq və ya ağrı, ürəkbulanma, ishal və/və ya qusmadır. Qida mikroblarının yaratdığı mədə-bağırsaq xəstəliklərinin şiddəti yüngüldən son dərəcə zəiflədici, hətta ölümcül nəticələrə qədər dəyişir. Bu tip xəstəliklərdən məsul olan bioloji agentlər viruslar, bakteriyalar, göbələklər, protozoa və ya helmintlər ola bilər.

Əhalini xəstəliklərdən qorumaq üçün Birləşmiş Ştatlarda istehlak edilən qida istehsalçıları və distribyutorları satışa təqdim edilməzdən əvvəl onların qidalarının patogen olmadığını sübut etməlidirlər. Yerli, əyalət və federal səviyyələrdə tənzimləyici orqanlar (Kənd Təsərrüfatı Departamenti və Qida və Dərman İdarəsi kimi) ictimaiyyəti qida yoluxucu xəstəlikdən qorumaq üçün müntəzəm bakterioloji test tələb edir. Bir çox növ mikroblar qida yoluxucu xəstəliklərə səbəb ola bilsə də, CDC və FDA hazırda bakteriyaları nəzərdən keçirir Bacillus cereus, Campylobacter jejuni, Clostridium spp., patogen suşları Escherichia coli, Listeriamonositogenlər, Salmonella spp., Şigella spp., Staphylococcus aureus, Vibrio spp., və Yersinia spp.; parazitlər Kriptosporidiumsiklospora; və Norwalk virusu (norovirus) (http://www.cdc.gov/foodnet/index.html) ABŞ-da ən çox yayılmış və ən böyük narahatlıq doğuran virusdur.

Qidada bakterial çirkləndiriciləri aşkar etmək üçün DNT və antikor testinə əsaslanan “sürətli” üsullar mövcud olsa da, nümunələrin diferensial və selektiv mədəniyyət mühitinə örtülməsi sınaqdan keçirilmiş və doğru üsuldur. Dezavantaj mədəniyyət üsullarının daha çox vaxt tələb etməsidir, lakin üstünlüklərə testlərin sadəliyi və həm spesifiklik, həm də həssaslığın daha yüksək səviyyəsi daxildir.

Qida nümunəsində mövcud olan bakteriya sayının nisbətən az olması qida təhlükəsizliyini qiymətləndirmək üçün mövcud olan bütün müxtəlif növ testlərin, o cümlədən mədəniyyətə əsaslananların həssaslığını məhdudlaşdırır. Zənginləşdirmə mədəniyyəti adlanan ilkin addım, qida nümunəsini nümunədə ola biləcək hər hansı bir bakteriyanın böyüməsini təşviq edən qeyri-selektiv mühitdə əvvəlcədən inkubasiya etməklə bakterial patogenlərin sayını artırmaq üçün istifadə edilə bilər.

Bir çox standart metodlara iki mərhələli zənginləşdirmə mədəniyyəti daxildir. İlk addım və ya əvvəlcədən zənginləşdirmə, selektiv olmayan bulyon mühitinin böyük həcmində (100-250 ml) sınaqdan keçirilməli olan qidanın müəyyən miqdarının (çəkisi ilə müəyyən edilən, adətən 10-25 qram) əlavə edilməsini nəzərdə tutur. 37°C-də 18-24 saatlıq inkubasiya dövründən sonra zənginləşdirmə mədəniyyətinin kiçik bir nümunəsi hədəf patogenin çoxalmasına imkan verərkən rəqabət aparan mikrobların böyüməsini maneə törətmək üçün nəzərdə tutulmuş bir və ya bir neçə növ seçmə mühitə köçürülür. Bir çox bu cür resepturalar da diferensialdır, çünki bakterial hədəfin böyüməsi mühitin görünüşündə xarakterik kimyəvi dəyişikliyə səbəb olacaq və bununla da patogeni digər mümkün çirkləndiricilərdən, məsələn, qidada ola biləcək xarab orqanizmlərdən “fərqləndirəcək”. .

Biz qida nümunələrinin əvvəlcədən zənginləşdirmə mədəniyyətindən başlayaraq, sonra bir neçə növ seçmə və differensial mühitə yapışdırılmış standart laboratoriya üsullarının dəyişdirilmiş və kiçildilmiş uyğunlaşdırılmasından istifadə edərək qida təhlükəsizliyi ilə bağlı öz araşdırmamızı aparacağıq. Qida ilə çirklənmənin müəyyən edilməsi (a) selektiv mühitdə bakteriyaların böyüməsinə və (b) müəyyən bir patogen növü üçün xarakterik olan spesifik biokimyəvi reaksiyanın (adətən rəng dəyişikliyinin) müşahidəsinə əsaslanacaqdır. Qeyd edək ki, bu üsullar bakterial fenotiplərə (xüsusiyyətlərə) əsaslanır və birdən çox bakteriya növü eyni seçici/diferensial əlamətlərə malik ola bilər. Buna görə də, qidadan təcrid olunmuş bakteriyanın qəti identifikasiyası əlavə sınaq tələb edir.

Qidada patogen bakteriyaların təcrid edilməsinə və identifikasiyasına imkan verən çoxsaylı media formulaları mövcuddur. Cədvəl 1-də təsvir olunan mediadan istifadə edərək, biz qidanın EHEC (enterohemorragik) ilə çirklənməsini yoxlayacağıq. E. coli) və digər suşları E. coli, S. aureus, B. cereus, Salmonella, və Şigella.

Cədvəl 1
OrtaSeçici agent(lər)Diferensial agent(lər)Aşkarlama
MacConkey Ağar

(MAKİNTOŞ)

Öd duzları və kristal bənövşəyi qram-müsbət, enterik olmayan əksər bakteriyaların böyüməsini maneə törədir.Laktoza və pH göstəricisiQram mənfi bağırsaq çöpləri böyüyəcək; E. coli çəhrayı koloniyalar əmələ gətirəcək, SalmonellaŞigella spp. laktoza fermentləşdirməyin və koloniyalar rəngsizdir.
Sorbitol MacConkey Agar

(SMAC)

Öd duzları və kristal bənövşəyi qram-müsbət, enterik olmayan əksər bakteriyaların böyüməsini maneə törədir.Sorbitol və pH göstəricisiQram mənfi bağırsaq çöpləri böyüyəcək; E. coli 0157:H7 sorbitolu fermentləşdirmir və koloniyalar rəngsizdir
Mannitol duzu agar

(MSA

7,5% natrium xlorid əksər Qram mənfi bakteriyaların böyüməsini maneə törədirMannitol və pH göstəricisiDuza dözümlü bakteriyalar inkişaf edir; S. aureus mannitolu fermentlər və koloniyalar sarıdır; B. cereus mannitolu fermentləşdirmir və koloniyalar tünd qırmızıdır.

Bakterial artımı təşviq etmək üçün əvvəlcədən zənginləşdirmə

Qeyd: bunun tamamlanması üçün adi laboratoriya müddətinizə əlavə olaraq vaxt tələb olunacaq. Qidada ola biləcək bakteriyaların həm varlığı, həm də növü məlum olmadığı üçün, bütün prosedur boyunca BSL2 saxlama təcrübələrindən istifadə edilməlidir.

Qida nümunələri planlaşdırılmış laboratoriya müddətinizdən bir həftə əvvəl laboratoriyada mövcud olacaq.

5 ml Triptik Soya Bulyonunu birdəfəlik plastik kultura borusuna köçürün. Test üçün bir qida nümunəsi seçməlisiniz. Aseptik texnikadan istifadə etməklə, az miqdarda qidanı kultura borusundakı bulyona köçürməklə seçilmiş qida məhsulunun zənginləşdirici kulturasını hazırlayın. Borunun üzərinə qapaq qoyun, içindəkiləri tam qarışdırın və 37°C-də inkubatora qoyun.

Zənginləşdirmə mədəniyyətinə başlandıqdan sonra minimum 18 saat (zənginləşdirmə mədəniyyətinə başlandıqdan bir gün sonra üstünlük verilir) və sonra yox Bu araşdırma üçün nəzərdə tutulmuş müddətdən bir gün əvvəl laboratoriyaya qayıdın və zənginləşdirmə mədəniyyətindən Cədvəl 1-də təsvir edilən üç növ seçici və diferensial mühitin hər birinə subkultura nümunələri vermək üçün peyvənd dövrəsindən istifadə edin. plitələrin hamısı, beləliklə, təcrid olunmuş koloniyalar meydana gələcək. Zənginləşdirmə mədəniyyətini potensial biotəhlükə kimi müvafiq şəkildə atın.

Laboratoriya dövründə müşahidə və əlavə araşdırma üçün zolaq lövhələrini inkubatora qaytarın.

Qida nümunəsi sınaqdan keçirildi ____________________________________________________________

Bişmiş yoxsa çiy? ________________________________________________________________

Bu qida məhsulu sınaqdan əvvəl necə saxlanılıb? _____________________________________

OrtaOrta artım? (Hə ya yox)Böyümə baş verərsə, koloniyaların/ortanın görünüşü
MacConkey Ağar (MAC)
Sorbitol MacConkey Agar (SMAC)
Mannitol Duz Ağar (MSA)

Bakteriya koloniyalarının müşahidə olunduğu seçici və diferensial mühitlərin hər biri üçün qida nümunəsində mövcud olan bakteriyaların mümkün növləri (növləri) baxımından koloniyaların görünüşünün nəyi göstərdiyini göstərin.

OrtaQida nümunəsinin potensial qida patogenləri ilə çirklənməsini göstərən müşahidələr
MacConkey Ağar (MAC)
Sorbitol MacConkey Agar (SMAC)
Mannitol Duz Ağar (MSA)

Selektiv və differensial mühitlərdə koloniyaların böyüməsi və görünüşü spesifik bakterial patogenlərin mövcudluğunun göstəricisidir, lakin bu nəticələr qidanın çirkləndiyi və qida qəbulunun qida yoluxucu xəstəliyə səbəb ola biləcəyi barədə məlumat verməzdən əvvəl təsdiq edilməlidir. Buna görə də, selektiv mühitdə müşahidə edilən koloniyaların potensial patogen bakteriyalar olduğunu təsdiqləmək üçün əlavə testlər aparın. Bu testlərə aşağıdakılar daxildir:

Nümayəndə koloniyalarının qram boyası (hamısı)

Təsdiq etmək üçün koaqulaz testi Staphylococcus aureus (S. aureus koaqulazdır +)

Təsdiq etmək üçün kolonial morfologiya və endospor ləkəsi Bacillus cereus

Təsdiq etmək üçün TSI testi E. coli, Salmonella, və Şigella

Gözlənilən və Eksperimental Nəticələr

Hər bir bakteriya üçün Qram və Endospor ləkələri və TSI testlərinin GÖZLƏNİLƏN nəticəsini göstərin ki, bu da potensial qida yoluxan patogenin şəxsiyyətini təsdiq edir.

Gözlənilən Qram boyama reaksiyaları:

E. coli ______________________ Salmonella spp. _____________________

S. aureus ___________________ Şigella spp. ________________________

B. cereus ___________________

Gözlənilən Endospor ləkə reaksiyaları:

B. cereus ________________________________________

Gözlənilən TSI reaksiyaları:

E. coli ________________ Salmonella spp. _______________ Şigella spp. _______________

Müxtəlif növ selektiv və diferensial mühitlərdə böyüyən aşkar edilmiş hər bir koloniya növü üçün müvafiq təsdiqedici (və ya göstərici) testləri aparın və həmin nəticələri nəticələr cədvəlində qeyd edin.

Təsdiqedici Testlərin Nəticələri

Potensial patogenHansı mühitdə tapıldı?Əlavə test(lər)Test(lər)in nəticəsiQida Nümunəsində təqdim olunur?
E. coli
E. coli 0157: H7
S. aureus
B. cereus
Salmonella spp.
Şigella spp.

Laboratoriyada yoxladığımız patogenlərin yoxladığınız qida nümunəsində olub-olmadığını bildikdən sonra nəticələrinizi laboratoriyanızda digər qida növlərini sınaqdan keçirmiş digərlərinin nəticələri ilə müqayisə edin.

Laboratoriya qrupunuz tərəfindən sınaqdan keçirilmiş qida nümunələrinin təxminən neçəsi bu bakteriyalardan biri və ya bir neçəsi ilə çirklənmişdir? Aşağıdakı çirkləndiriciləri olan qidaları sadalayın:

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

Bu araşdırmanın nəticəsinin əhəmiyyəti üzərində düşünün və aşağıda öz fikirlərinizi yazın. Dərs bitməzdən əvvəl sizdən yeyə biləcəyiniz qidalarda bakteriya (patogen və ya başqa) tapmağın nə demək olduğuna dair daha geniş müzakirənin bir hissəsi kimi öz fikrinizi paylaşmağınız xahiş oluna bilər.

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________


Videoya baxın: Qida Təhlükəsizliyi Agentliyi ölkədəki bütün qida sahələrini əhatə edən məhsulları ekspertizadan keç (BiləR 2022).