Məlumat

RNT nümunəsinin çox yüksək 260/230 absorbans nisbəti

RNT nümunəsinin çox yüksək 260/230 absorbans nisbəti


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Ən son RNT ekstraksiyamdan sonra RNT nümunələri çox yüksək 260/230 udma nisbətinə malik idi (5 ilə 25 arasında dəyişir).

Mən heç vaxt belə rəqəmlər almamışam və bilirəm ki, nisbət ümumiyyətlə ~2 olmalıdır.

Belə yüksək 260/230 absorbansın səbəbi nə ola bilər?


Gergana, Guanidin izotiyosiyanatının təsiri haqqında haqlıdır, lakin oradakı təfərrüatlar deyil. Quanidin izotiyosiyanat 260 və DEYİL 230-da güclü əmilir (guanidin hcl 230-da güclü əmilir). Əgər RNT-niz hər RNT hazırlıq dəstində ən azı bir tamponda istifadə olunan guanidin izotiosiyanatla yüksək dərəcədə çirklənmişdirsə, 260/230 2-dən çox böyük olacaq (həmçinin "konsentrasiya" süni şəkildə yüksək olacaq) Beləliklə, əgər siz 25-dən 260/230 alırsınızsa və "1000 ng/µL" "konsentrasiyasına" sahibsinizsə, əslində sizdə 200 ng/µL-dən az RNT və bir ton Guanidin izotiosiyanat hər şeyi atan ola bilər.)


260/230 nisbəti nümunənizdəki çirkləndiricilər haqqında fikir verir. Adətən RNT izolyasiyası üçün istifadə olunan guanidin izotiosiyanat 230nm-də udur, beləliklə, gördüyünüz şey ola bilər. Ancaq başqa bir izahat ola bilər ki, nümunəniz çox seyreltilmişdir (nə qədər RNT almısınız?), A260 da çox aşağıdır. O zaman A230-u dəqiq ölçmək çətin olacaq ki, bu da 260/230 nisbətlərinin həddindən artıq qiymətləndirilməsi ilə nəticələnəcək.


Videoya baxın: How to use Nanodrop to measure DNARNA (Iyun 2022).