Məlumat

Deoksixolik turşunun 1% su məhlulu. Necə hazırlanır?

Deoksixolik turşunun 1% su məhlulu. Necə hazırlanır?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Sigmaya görə, deoksixolik turşunun həllolma qabiliyyəti:

15C-də suda 0,24 q/l

FDA-ya görə, Kybella (ticarət nişanı) deoksixolik turşunun 1% su məhluludur. Bunu necə etdilər?


İstinad etdiyiniz sigma sənədinə əsasən (vurğu mənim tərəfimdən əlavə edilib):

"Sərbəst turşu 15ºC-də suda 0,24 q/l, natrium duzu isə 15ºC-də suda >333 q/l-də həll olur. Buna görə də, Bu məhsulun istifadəsi üçün pH nəzarəti çox vacibdir. pH 5-ə endirildikcə sulu məhlullar çökür."

FDA sənədinə görə (vurğu mənim tərəfimdən əlavə edildi):

"Hər 2 ml flakon KYBELLA® (deoksixolik turşu) inyeksiyasının tərkibində aktiv maddə kimi 20 mq sintetik deoksixolik turşu və aşağıdakı təsirsiz maddələr var: benzil spirti (18 mq), iki əsaslı natrium fosfat (2,84 mq), natrium xlorid (8,76 mq), natrium hidroksid (2,86 mq) inyeksiya üçün suda, USP. Formulyasiyanı pH 8.3-ə uyğunlaşdırmaq üçün lazım olduqda hidroklor turşusu və əlavə natrium hidroksid əlavə edilir.."

15ºC-də suda 0,24 q/l həllolma sərbəst turşunun təmiz suda həll edilməsi ilə müəyyən edilir. Turşuyu təmiz suda həll etdikcə pH getdikcə aşağı düşəcək və bu birləşmə aşağı pH-da daha az həll olunduğu üçün onun təmiz suda həllini məhdudlaşdırır.

KYBELLA-nın tərkibindəki natrium hidroksid pH-ı yüksəldən və deoksixolik turşu ilə qarışdıqda, turşu-əsas reaksiyası vasitəsilə sulu natrium duzu və suyu əmələ gətirən güclü əsasdır. Sulu məhlulda deoksixolik turşunun konjugat əsası deoksixolatdır. Sərbəst turşunun və ya natrium duzunun bir hissəsi olmasından asılı olmayaraq birləşmənin bu hissəsi dəyişməz qalır. Natrium fosfat pH-ı sabitləşdirməyə kömək edən və həll olunan qalmasını təmin etmək üçün son pH-a nəzarət etmək üçün daha incə tənzimlənməyə imkan verən tamponlayıcı birləşmədir.


Distillə edilmiş su

Distillə edilmiş su

Təmizlənmiş su steril və apirogen olması nəzərdə tutulmayan dərman preparatlarının hazırlanmasında istifadə üçün nəzərdə tutulub. Təmizlənmiş su şifahi və yerli məhsullar üçün və tablet və kapsulların qranulyasiya proseslərində geniş istifadə olunur. O, həmçinin inyeksiya üçün su (WFI) və əczaçılıq dərəcəli təmiz buxar istehsalı üçün yem suyudur. Təmizlənmiş su, həmçinin avadanlıqların yuyulması və təmizləyici məhlulların hazırlanması üçün istifadə olunur. Avropada mikrob təsirinin həddi 100 kob/ml-dir (əsas sınaq metodunun membran filtrasiyası ilə olduğunu nəzərə alsaq, 10.000 kob/100 ml-ə bərabərdir). ABŞ-da kompendiya limitin risklərin qiymətləndirilməsi ilə müəyyən edilməsini tövsiyə edir.

Təmizlənmiş su tərs osmos üsulu ilə hazırlanır. Əks osmos qurğuları kimyəvi, mikrob və endotoksin keyfiyyətinin yaxşılaşdırılmasına nail olmaq üçün suyun membrandan keçməsi üçün yarıkeçirici membrandan və əhəmiyyətli təzyiq fərqindən istifadə edir. Sistemlər bir çox dizayn formatlarında mövcuddur və çox vaxt seriyalı şəkildə istifadə olunur. Əks osmos yüksək təzyiqli şəraitdə işləyən ölçüləri istisna edən filtr kimi fəaliyyət göstərir.


Rocky Star Kimyası

Buzlu sirkə turşusu 99,6% (v/v) sirkə turşusudur və 17,4 M-dir.

1 M - 800 mL suya 57,5 ​​mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin və sonra su ilə 1 litrə qədər hazırlayın.

0,05 N - 800 mL suya 2,87 mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin və sonra su ilə 1 litrə qədər hazırlayın.

0.9 M - 800 mL suya 54 mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin və sonra su ilə 1 litrə qədər hazırlayın.

7% (ağırlıq/həc) - 800 mL suya 70 mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin və sonra su ilə 1 litrə qədər hazırlayın.

45% (w/v) - 500 mL suya 450 mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin və sonra su ilə 1 litrə qədər hazırlayın.

(15:60:25) - 150 mL buzlaq sirkə turşusu, 600 mL n-butanol və 250 mL suyu birləşdirin.

45 mL buzlu sirkə turşusuna 2,0 qram orsein əlavə edin. Bir qaynağa gətirin və tamamilə həll olunana qədər istilənməyə davam edin. Soyudun və 55 mL distillə edilmiş su əlavə edin. İstifadədən əvvəl süzün. Qeyd: Bəzi erkən tədqiqatçılar mordan kimi dəmir duzunu (məsələn, dəmir sitrat) əlavə etmişlər. Aseto-orsein ləkəsinin intensivliyini artırmağa meyllidir. Eyni reaksiya bitki materialını köhnə polad (paslanmayan) ülgüc bıçağı ilə doğramaqla da ola bilər.

100 mL 70% (h/v) etil spirtinə 1,0 mL konsentratlaşdırılmış HCl əlavə edin.

Turşu Orcinol Reagenti (10% HCl-də 0,1% FeCl 3)

0,1 qram FeCl 3-dən 50 ml-ə 10% (h/v) HCl əlavə edin və 10% HCl ilə 100 ml-ə qədər hazırlayın.

PAGE üçün akrilamid məhlulları akrilamidin ümumi konsentrasiyası (akrilamid + bisakrilamid) və çarpaz bağlayıcının (bisakrilamid) miqdarı kimi verilir. Bu T:C nisbəti kimi verilmişdir. Məsələn, 10% gel (10%T:5%C) 100 ml-də cəmi 10 q akrilamid ehtiva edəcək və 5 qram akrilamid və 5 qram bisakrilamiddən ibarət olacaqdır. Adətən, 0,8% bis-akrilamid ehtiva edən 30% akrilamidin ehtiyat məhlulu istehsal olunur. Bir çox tədqiqatçılar 100 mL suya 30 qram akrilamid və 0.8 qram bis-akrilamid istifadə edir, lakin 29.2 qram akrilamid və 0.8 qram bis texniki cəhətdən düzgün olardı. Praktikada, jellər 10% və ya daha az seyreltildiyi üçün az fərq edir. 30% ehtiyat məhlulu 0,45 süzgəcdən süzülür və qaranlıqda 4°C temperaturda saxlanılır. İstifadə üçün ehtiyat məhlulu müvafiq tamponla (adətən 2X Tris-HCl) seyreltilir. Səhm həlli təxminən bir ay sabitdir. Bu müddətdən sonra atın. Müxtəlif nöqtələrdə SDS, -merkaptoetanol və izləyici boya (bromofenol mavisi) əlavə edilir.

Alsiya mavisi (MW appeq. 1300)

0,001 M - 0,13 qram Alcian Blue 8GX (Sigma # A-2899) 100 mL suda həll edin.

Spirtli Orcinol Reagenti (95% etanolda 10% orsinol)

1,0 qram orsinol 95% etanolda 10 ml son həcmə qədər həll edilir.

1 litr distillə edilmiş suya bir qranul NaOH əlavə edin.

G-bandlaşdırma üçün qələvi həll

2,8 qram NaOH və 6,2 qram NaCl su ilə 1 litr son həcmdə həll edin.

Aminosalisik turşu (PAS MW 175.1)

6% (ağırlıq/həc) - 6,0 qram PAS-ı su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

0,1 M - 1 litr suyun son həcminə 7,708 qram ammonium asetat əlavə edin.

Ammonium persulfat (MW 228.2)

10% (ağırlıq/həc) - 1,0 qram ammonium persulfatı 10 ml son həcmə qədər su ilə həll edin. PAGE üçün katalizator kimi istifadə etməzdən əvvəl təzə qarışdırın. Normalda polimerləşmə üçün hər 15 gel məhluluna təxminən 50 l ammonium persulfat əlavə edilir. 0,13 qram Alcian Blue 8GX (Sigma # A-2899) 100 ml suda həll edin.

Ammonium sulfat (MW 132.14)

2% (ağırlıq/həc) - 100 ml suyun son həcminə 2 qram ammonium sulfat əlavə edin.

4.1M(sat.) 0.001 M - 542 qram ammonium sulfatı 1 litr son həcmə qədər həll edin.

n-amil spirti (Pentanol C 5 H 11 OH - MW 88.15)

0,38 M - Amil spirti çəkilə bilər (33,5 qram) və ya sıxlıqdan istifadə edərək həcmlə ölçülə bilər. Yəni, 33,5 qram - 0,8144 qram/mL və ya 41,1 mL n-amil spirti. Müvafiq miqdarı çəkin və ya ölçün və su ilə 1 litrlik son həcmə qədər seyreltin.

1% (ağırlıq/həc) - 0,5 qram amilazanı 0,01 M natrium fosfat tamponu, pH 7,0 ilə 50 ml son həcmə qədər həll edin.

2 mM - 35,2 mq askorbin turşusunu su ilə 100 ml son həcmə qədər həll edin.

ATP (Adenozin trifosfat, MW 507.21)

5 mM - 254 mq ATP-ni su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin. 35,2 mq askorbin turşusunu su ilə 100 ml son həcmə qədər həll edin.

75 ml suya 1,0 qram kalsium xlorid, 1,0 qram kadmium xlorid və 10 mL konsentratlaşdırılmış formalin əlavə edin. Su ilə 100 mL son həcmə gətirin.

8 mM - 98 mq benzoik turşusunu su və ya tamponla 100 mL son həcmə qədər həll edin.

Bis-akrilamid (N, N'-metilen-bis-akrilamid)

Akrilamid gellər üçün çarpaz bağlayıcı.

500 ml suya 1,50 qram Cu 2 SO 4 H 2 O və 6,0 qram natrium kalium tartrat əlavə edin. 300 qram NaOH-u 300 mL son həcmə qədər su ilə həll etməklə ayrıca 300 mL 10% (ağırlıq/həc) NaOH hazırlayın. İki məhlulu 1 litr həcmdə birləşdirin, qarışdırmaq üçün çevirin və 1 litrə qədər su əlavə edin. Son məhlulu qaranlıq, plastik şüşədə saxlayın. Qara və ya qırmızı çöküntü əmələ gələrsə, atın.

BSA-nın bir çox çeşidi mövcuddur və bu zülaldan istifadə edərkən diqqətli olmaq lazımdır. Rutin protein konsentrasiyası standartları üçün 96-99% saf fraksiya (Sigma # A 2153) istifadə edilə bilər. Toxuma kulturası, RİA və ya molekulyar çəki standartlaşdırması üçün xüsusi olaraq bu məqsəd üçün çıxarılan və təmizlənən BSA alınmalıdır.

1% (ağırlıq/həc) - 0,5 qram BSA-nı suda və ya tamponda 50 mL yekun həcmdə həll edin.

Bu prosedur asidik Coomasie Blue məhlulunda absorbsiya dəyişikliyindən istifadə edir. O, Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois-dən Protein Assay Reagent, Cat kimi ticari olaraq mövcuddur. # 23200. Tərkibində metanol və həlledici maddələr var və çox etibarlıdır. Əgər özünüz hazırlamaq istəyirsinizsə, 100 mq Coomasie Brilliant Blue G-250-ni 50 ml 95% etanolda həll edin. 100 ml 85% fosfor turşusu əlavə edin və distillə edilmiş su ilə 1 litr son həcmə gətirin.

Bromofenol mavisi (Natrium duzu, MW 692.0)

0,001 (ağırlıq/həc) - 1 mq Bromofenol mavisi, natrium duzunu (Sigma # B7021) su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

n-Butanol (C 4 H 9 OH - MW 74.12)

1,1 M - Butanol çəkilə bilər (81,5 qram) və ya sıxlıqdan istifadə edərək həcmli olaraq ölçülə bilər. Yəni, 81,5 qram - 0,8098 qram/ml və ya 100,7 mL n-butanol. Müvafiq miqdarı çəkin və ya ölçün və su ilə 1 litrlik son həcmə qədər seyreltin.

Bu nematodlar üçün əsas şoran həllidir. 11,36 qram Na 2 HPO 4 7 H 2 O, 3,0 qram KH 2 PO 4, 0,5 qram NaCl və 1,0 qram NH 4 Cl 1 litr yekun həcmdə həll edin. pH-ı 7.0-a tənzimləyin. Sterilizasiya üçün avtoklavlana bilər.

Kalsium xlorid (MW 110,99)

0,0033 M - 0,522 qram kalsium asetatı su və ya tamponla 1 litr yekun həcmdə həll edin.

0,001 M - 0,111 qram susuz kalsium xloridini su və ya tamponla 1 litr yekun həcmdə həll edin.

0,08 M ​​- 8,879 qram susuz kalsium xloridini su və ya tamponla 1 litr yekun həcmdə həll edin.

2% (ağırlıq/həc) - 2 qram susuz kalsium xloridini su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

cAMP (Adenozin monofosfat, siklik - MW 329.22)

0,001 M (1mM) - 33 mq cAMP-ni su, tampon və ya mühitlə 100 mL yekun həcmdə həll edin.

10,0 ml buzlu sirkə turşusunu 60,0 ml mütləq etil spirti və 30,0 ml xloroform ilə birləşdirin.

Xloroplastın homogenləşmə tamponu

400 ml distillə edilmiş suya 30,058 qram sorbitol, 2,23 qram natrium pirofosfat, 0,407 qram maqnezium xlorid və 0,176 qram askorbin turşusu əlavə edin. HCl ilə pH-ı 6,5-ə tənzimləyin və 500 ml-lik son həcmə qədər seyreltin.

Xloroplast süspansiyon tamponu

400 ml distillə edilmiş suya 30,058 qram sorbitol, 0,372 qram EDTA, 0,102 qram maqnezium xlorid və 5,958 qram HEPES tamponu əlavə edin. NaOH ilə pH-ı 7,6-ya tənzimləyin və 500 ml son həcmə qədər seyreltin.

Xrom alum jelatin (Subing məhlulu)

5,0 qram jelatini 1 litr qaynar suda həll edin. Soyudun və 0,5 qram kalium xrom alum [CrK(SO 4 ) 2 12 H 2 O] əlavə edin. Soyuducuda saxlayın. İstifadə etmək üçün təmiz slaydları məhlula batırın və tozsuz yerdə şaquli vəziyyətdə qurudun.

Limon turşusu (H 3 C 6 H 5 O 7 H 2 O - MW 210.14)

0,1 M - 21,01 qram limon turşusunu 1 litr son həcmdə həll edin.

Sitrat tamponu (Natrium fosfat-Sitrat tamponu)

Ph 4.8 - 493.0 mL 0.2 M Na 2 HPO 4-ə 507 mL 0.1 M limon turşusu əlavə edin.

Ph 3.6 - 678 mL 0,1 M limon turşusuna 322,0 mL 0,2 M Na 2 HPO 4 əlavə edin.

Ph 4.2 - 414.0 mL 0.2 M Na 2 HPO 4-dən 586 mL 0.1 M limon turşusuna əlavə edin.

Ph 5.4 - 557.5 mL 0.2 M Na 2 HPO 4 442.6 mL 0.1 M limon turşusuna əlavə edin.

Ph 6.0 - 368.5 mL 0.1 M limon turşusuna 631.5 mL 0.2 M Na 2 HPO 4 əlavə edin.

Ph 6.6 - 272.5 mL 0.1 M limon turşusuna 727.5 mL 0.2 M Na 2 HPO 4 əlavə edin.

Ph 7.2 - 869,5 ml 0,2 M Na 2 HPO 4-dən 130,5 mL 0,1 M limon turşusuna əlavə edin.

Ph 7,8 - 957,5 mL 0,2 M Na 2 HPO 4-ə 42,5 mL 0,1 M limon turşusu əlavə edin.

Kobalt Nitrat (MW 182,96)

2% (ağırlıq/həc) - 2,0 qram kobalt nitrat (heksahidrat çox həll olunur) son həcmi 100 ml olana qədər su ilə həll edin. Sərin yerdə yaxşı bağlı saxlayın.

10 q/mL - hər ml şoran məhlul və ya mədəni mühitdə 10 q kolsemid həll edin.

Coomasie mavi (Coomasie Brilliant Blue R250)

0,25% (ağırlıq/həc) 0,001 M - 2,50 qram Coomasie Brilliant Blue R250-ni 20% (ağırlıq/həc) trikloroasetik turşu (TCA) ilə 1 litr yekun həcmdə həll edin. Bəzi tədqiqatçılar metanol-su-buzlu sirkə turşusunda (5-5-1) 0,25% Coomasie Blue məhlulundan istifadə edirlər.

Mis sulfat (CuSO 4 . 5H 2 O MW 249,68)

0,5% (w/v) - 0,13 qram Alcian Blue 8GX (Sigma # A-2899) 100 ml suda həll edin.

0,5% (ağırlıq/həc) - 0,5 qram mis sulfatı su ilə 100 ml son həcmə qədər həll edin.

Mis tartrat/karbonat (CTC)

0,5 qram mis sulfat və 1,0 qram kalium natrium tartratı 100 ml son həcmə qədər su ilə həll edin. Bu məhluldan 1,0 ml-ni 0,1 N NaOH-da 50 mL 2% Na 2 CO 3 ilə birləşdirin. İstifadədən əvvəl təzə hazırlanmalıdır. Stok məhlulları sabitdir.

0,1 qram kristal bənövşəyi və 0,25 mL buzlu sirkə turşusunu son həcmdə 100 ml su ilə həll edin.

DCMU [3-(3,4-Diklorofenil)-1,1-Dimetilurea - MW 233.1]

1 x 10 -4 M 0,001 M - 2,3 mq DCMU-nu su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

5 x 10 -7 M0.001 M - İstifadədən əvvəl 1 x 10 -4 M məhlulu 1/200 nisbətində seyreltin.

Diklorofenolindofenol (DCPIP - MW 290.1)

0,0025 M - 73 mq DCPIP-ni su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

0,0001 M - 2,9 mq DCPIP-ni su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

Dinitrofenol (DNP - MW 184.11)

18,4 mq% - 18,4 mq 2,4-dinitrofenolun son həcmi 100 ml olana qədər su və ya tamponla həll edin.

Dische difenilamin reagenti

500 mq difenilamin 49 ml buzlu sirkə turşusunda həll edin. 1,0 mL konsentratlaşdırılmış HCl əlavə edin.

Ditiotreitol (Cleland's Reagent - MW 154.3)

0,01 M - 154 mq ditiotreitolun son həcmi 100 ml olana qədər su və ya tamponla həll edin. Dithiothreitol Sigma Chemical Co., St. Louis, Cat # D0632-də mövcuddur. Ditioeritritol əvəz edilə bilər.

DOPA [3-(3,4-Dihidroksifenil)-L-alanin - MW 197.19]

8 mM - 158 mq L-DOPA-nı su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin. Qeyd edək ki, DOPA-nın suda maksimum həllolma qabiliyyəti 165 mq/100 mL (8,3 mM) təşkil edir.

EDTA (Etilendiamintetraasetik turşu - MW 292.24)

1 M - 292,24 qram EDTA, sərbəst turşu 1 litr son həcmə qədər həll edin. EDTA-nın daha çox həll olunan disodium duzu istifadə olunursa, çəkisini müvafiq olaraq tənzimləyin. pH sirkə turşusu və ya NaOH ilə tənzimlənə bilər. Müvafiq konsentrasiya qatılmaları üçün çəki qramla istədiyiniz molyarlığa çarpın. Məsələn, 10 mM EDTA üçün litr başına 2,92 qram EDTA əldə etmək üçün 292,24 X 0,010-u çoxaldın.

EGTA [Etilen Qlikol-bis(aminoetil Eter) N,N N' N'-Tetra-sirkə turşusu - MW 380.4]

1 mM - 380 mq EGTA-nı su və ya tamponla 1 litr yekun həcmdə həll edin.

0,5% (w/v) - 0,5 qram Eozin Y-ni 100 ml suda həll edin.

Etanol (C 2 H 3 OH - MW 46.07)

50-95% (h/v) - 95% etil spirti mütləqdən daha ucuz və saxlanması asan olduğundan, bu seyreltmələr 95% etil spirti ilə hazırlanmalıdır. Başqa cür göstərilmədiyi təqdirdə, denatürləşdirilmiş spirt daha bahalı qeyri-denaturasiya kimi işləyir. % məhlulu hazırlamağın sadə yolu müvafiq miqdarda 95% etanoldan istifadə etmək və 1 litr əvəzinə 950 ml-ə qədər seyreltməkdir. Məsələn, 50% (h/v) məhlul hazırlamaq üçün 500 mL 95% etil spirtini ölçün və son həcmdə 950 ml su ilə seyreltin. 70% həll üçün 700 mL etil spirti ölçün və su ilə 950 ml-ə qədər seyreltin. Mütləq etanol birbaşa 100% etanol kimi istifadə edilməlidir. Histologiya üçün bunun həqiqətən 100% olması vacibdir. Hidroskopik olduğundan (havadan suyu udur), möhürlənməyincə və ya suyun olmaması üçün təmizlənməyincə mütləq olduğunu düşünməyin. Test etmək üçün ksilol nümunəsinə bir damla əlavə edin. Hər hansı bir buludluluq baş verərsə, spirt mütləq deyil.

8,5 M - Etanol çəkilə bilər [391,6 qram mütləq, 412,2 qram 95% (h/v)] və ya sıxlıqdan istifadə etməklə həcmli ölçülə bilər. Yəni, 391,6 qram - 0,7893 qram/ml və ya 496,1 mL mütləq etanol. 95% istifadə edərək, 412,2 qram - 0,7893 qram/ml və ya 522,2 mL. Müvafiq miqdarı çəkin və ya ölçün və su ilə 1 litrlik son həcmə qədər seyreltin.

Histoloji üçün etanol-sirkə turşusu fiksatoru (3:1)

75 mL mütləq spirtə 25 mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin. İstifadədən dərhal əvvəl təzə hazırlanmalıdır.

Öz zərdabınızı tam qandan hazırlamaq mümkün olsa da, FCS-ni nüfuzlu təchizatçıdan almaq daha asandır (və daha təhlükəsizdir). Ticarət mənbələri mikoplazmadan təmizlənir, əvvəlcədən sterilizasiya edilir və antikorların olması üçün nəzarət edilir. Bazarda bir çox zərdab əvəzediciləri mövcuddur və onların saxlanması nəzərə alındıqda daha ucuz ola bilər. Təchizatçılar arasında Gibco, Flow Laboratories, KC Biological və Sigma Chemical Co.

Hazırlanması çətin olduğundan, bu adətən əvvəlcədən qarışdırılmış şəkildə alınır. 2N Folin-fenol reagenti kimi də tanınır.

3,8 qram giemsa tozunu 25 mL qliserində həll etməklə ehtiyat məhlulu hazırlayın. 60°C-də təxminən 2 saat qarışdırmaqla yumşaq qızdırın. Soyudun və 75 mL metanol (neytral, asetonsuz) əlavə edin. İşçi bir həll üçün ehtiyat məhlulunu 1 / seyreltin.10 istifadə etməzdən əvvəl su ilə. Xromosom bantlanması üçün 5,0 ml Giemsa ehtiyatı, 3,0 ml mütləq metanol, 3,0 ml 0,1 M limon turşusu və 89 ml distillə edilmiş suyu birləşdirin. Na 2 HPO 4 ilə məhlulun pH-nı 6,6-ya tənzimləyin.

10% (h/v) - 10 qram D-qlükozanı (dekstroz) 100 ml son həcmdə su və ya tamponla həll edin.

5% - GTA adətən 25% və ya 50% (ağırlıq/həc) məhlul şəklində verilir. Buferdə 5%-li məhlul kimi elektron mikroskopun fiksasiyası üçün istifadə olunur. Rutin istifadə üçün 80 mL 0,2 M natrium kakodilat tamponuna 20 ml 25% GTA əlavə edin, pH 7,4.

10% (h/v) - 10 mL qliserola (qliserin) 100 ml yekun həcm əldə etmək üçün kifayət qədər su əlavə edin.

8 M - 73,67 qram gliserol çəkin və 100 ml-lik son həcmə əlavə edin. Alternativ olaraq, 499,1 mL qliserini ölçün və su və ya tamponla 1 litr (otaq temperaturunda qliserolun sıxlığı 1,476) son həcmə çatdırın. MT buferində 8 M qliserol üçün seyreltici kimi istifadə üçün 2X MT tampon hazırlayın.

0,192 M - 1,44 qram qlisini su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,33 qram yod və 0,67 qram kalium yodidi su ilə 100 ml-ə qədər həll edin.

HEPES [N-(2-Hidroksietil)piperazin-N'-(2-etansülfonik turşu) - MW 238.3]

50 mM - 11,92 qram HEPES, sərbəst turşusu 1 litr son həcmə qədər həll edin. Hemisodium duzu istifadə edilərsə, çəkisi müvafiq olaraq tənzimləyin. Müəyyən edilməmiş natrium duzlarından istifadə etməyin. Hemisodium duzunun hər mol HEPES üçün 0,5 mol natrium var.

pH7.6 - 2.38 qram HEPES, sərbəst turşusu 900 mL suda həll edin. NaOH və ya HCl ilə pH-ı 7.6-a tənzimləyin. Distillə edilmiş su ilə son həcmi 1 litrə tənzimləyin.

Hidroklor turşusu (HCl - MW 36,46)

Konsentratlaşdırılmış HCl təxminən 11,6 molyarlığa malikdir. HCl suda həll olunan və konsentratlaşdırılmış reagent dərəcəli HCl şəklində olan bir qazdır. Bu məhlul təxminən 36-38% (w/v) HCl-dir.

1 N - 800 mL suya 86 mL konsentratlaşdırılmış HCl əlavə edin və 1 litr son həcmə qədər seyreltin.

0,1 N - 1 N-ni 10 dəfə seyreltin.

% məhlullar, nəzərə alın ki, maye HCl yalnız 38% HCl-dir, beləliklə, 1% məhlul 100 ml son həcm üçün 2,6 mL konsentratlaşdırılmış HCL (1/.38) tələb edir.

0,01%(w/v) - 10 mq Janus Green B-ni 2-3 mL mütləq etanolda həll edin. Son həcmdə 100 ml su ilə seyreltin.

Ca 3 (NO 2 ) 4H 2 O - 4,0 qram

Distillə edilmiş H 2 O - 1,0 litr

Na 2 MoO 4 2H 2 O - 25 mq

Distillə edilmiş H 2 O - 1,0 litr

FeC 6 H 5 O 7 5H 2 O - 2,5 qram

1X Media - 750 mL distillə edilmiş suya 250 mL Knudson X4 əlavə edin. 0,5 mL B5 Minor Elementləri, 0,5 mL ehtiyat fosfat və 0,4 mL Ferrik sitrat əlavə edin. HCL ilə pH-ı 5,5-ə tənzimləyin, 15 qram agar əlavə edin və həll etmək üçün qızdırın. Avtoklav edin və boşqablara tökün.

Krebs Fosfat Zəngləri (KPR)

Aşağıdakıların hər birini ayrıca hazırlayın:

0,1 M fosfat tamponu, pH 7,4 (17,8 qram Na 2 HPO 2 H 2 O

+ 20 mL 1 N HCL, 1 litrə qədər seyreltilmiş)

Qarışdırmaq üçün 200 mL NaCl, 8 mL KCl, 6 mL CaCl 2 və 2 mL MgSO 4 birləşdirin. Diqqətlə və davamlı qarışdırmaqla 40 mL fosfat tamponu əlavə edin.

LPS buferi (Aşağı Pad Həll buferi)

1,5 qram KCl, 0,5 qram MgCl 2 və 0,5 qram steptomisin sulfatı 500 ml suda həll edin. 40 mL 1 M fosfat tamponu, pH 6.5 əlavə edin və 1 litr su ilə seyreltin.

Maqnezium xlorid (MgCl 2 - MW 95,23)

1 mM - 1 litrin son həcmi üçün 95,2 mq maqnezium xlorid həll edin.

4 mM - 1 litrin son həcmi üçün 0,381 qram maqnezium xlorid həll edin.

10 mM - 1 litrin son həcmi üçün 0,952 qram maqnezium xlorid həll edin.

0,1 M - 1 litrin son həcmi üçün 9,523 qram maqnezium xlorid həll edin.

Maqnezium sulfat (MgSO 4 - MW 120.39)

5% (ağırlıq/həc) - 5,0 qram maqnezium sulfatı su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

Ticarət yolu ilə satın alın və ya aşağıdakı prosedurlardan biri ilə qarışdırın:

A. 1,0 qram hematoksilini 10 ml mütləq etanolda həll edin. 20 qram kalium alumunu (KAl(SO) 2 − 12H 2 O) 200 ml suda həll edin. Kimyəvi başlıqda partlayışdan qorunmaqla kalium alum məhlulunu qaynadək gətirin və hematoksilin/etanol qarışığı əlavə edin. Təxminən bir (1) dəqiqə qaynatmağa davam edin. 0,5 qram civə oksidi əlavə edin və sürətlə soyudun. 0,5 ml buzlu sirkə turşusu əlavə edin. İstifadədən əvvəl süzün. Bu qarışıq təxminən iki aya qədər sabitdir.

B. Alternativ olaraq: 5,0 qram hematoksilini 50 ml mütləq etanolda həll edin və 650 ml ilıq suya əlavə edin. Hematoksilin həll olunana qədər yumşaq bir şəkildə qızdırın və sonra 300 mL qliserin, 0,3 qram natrium yodat və 20 mL buzlaq sirkə turşusu əlavə edin. Soyudun və distillə edilmiş su ilə 1 litrə qədər həcm verin. İstifadədən əvvəl süzün.

0,5 M - Sıxlıq = 1,2 qram/mL. 3.91 qram və ya 3.26 mL merkaptoetanoldan 100 mL su və ya tampon həcmində istifadə edin.

5% (ağırlıq/həc) - 100 mL su və ya tampon həcmində 5,0 qram və ya 4,167 mL istifadə edin.

MES [2-(N-Morfilino)etansulfon turşusu - MW 195.2]

0,1 M - 1,952 qram MES-i su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

Metanol (CH 3 OH - MW 32.04)

22 M - Metanol çəkilə bilər (704,9 qram) və ya sıxlıqdan istifadə edərək həcmli olaraq ölçülə bilər. Yəni, 704,9 qram - 0,7914 qram/ml və ya 890,7 mL metil spirti. Müvafiq miqdarı çəkin və ya ölçün və su ilə 1 litrlik son həcmə qədər seyreltin.

Metanol/Sirkə turşusu (akrilamid gellərində zülalların bərkidilməsi üçün)

45%:12% - 450 mL metanola 120 mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin və son həcmdə 1 litr su ilə seyreltin.

Metanol/Sirkə turşusu (akrilamid gellərində zülalların ləkələnməsi və ya bərkidilməsi üçün)

5%:7% - 50 mL metanola 70 mL buzlu sirkə turşusu əlavə edin və son həcmdə 1 litr su ilə seyreltin.

0,2% (w/v) - 0,2 qram metil yaşılı 0,1 M asetat tamponu, pH 4,2 ilə 100 ml son həcmə qədər həll edin.

Mikrotubul tamponu (MT tamponu)

800 ml distillə edilmiş suda 19,52 qram MES həll edin. 0,380 qram EGTA və 47,62 qram MgCl 2 əlavə edin. HCL və ya NaOH ilə pH-ı 6,4-ə tənzimləyin və distillə edilmiş su ilə 1 litr son həcmə qədər seyreltin.

Minimum əsas mühit (MEM)

Bu təlimatın bütün məqsədləri üçün MEM Eagle's MEM-ə istinad edir. Bu mühiti qarışdırmaq mümkün olsa da, istənilən sayda kommersiya mənbələrindən (Gibco, Flow, KC Biological, Sigma Chemical) əvvəlcədən qarışdırılmış medianı almaq sonsuz dərəcədə asandır (və daha ucuzdur). Ən yüksək saflığa malik kimyəvi maddələrin bütün müddət ərzində istifadə edilməsi vacibdir.

NG agar (Nematod Growth agar)

3,0 qram NaCl, 2,5 qram pepton və 17 qram agarı 1 litrlik son həcmdə həll edin. Agarı həll etmək üçün qaynadın, sterilizasiya etmək üçün avtoklavda saxlayın. Eyni zamanda, ayrıca steril məhlullar hazırlayın:

Etanolda 10 mq/mL xolesterin

1 M kalium fosfat tamponu, pH 6.0

Müvafiq steril texnikadan istifadə edərək, agar məhlulunu bir qədər sərinləyin və 1 mL CaCl 2, 1 mL urasil, 0.5 mL xolesterin, 25 mL fosfat tamponu və 1 mL MgSO 4 əlavə edin. Bütün inqrediyentləri qarışdırmaq üçün fırladın və boşqablara tökün.

Nitrofenil fosfat (MW 263.1)

0,05 M - 1,32 qram nitrofenil fosfatı su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,8% (ağırlıq/həc) - 0,8 qram nitrofenil fosfatı 100 ml su və ya tampona qədər həll edin.

Osmium tetroksid (OsO 4 - MW 254.2)

OsO istifadə edərkən duman qapağının istifadəsi məcburidir4. Osmium tetroksid, düzgün havalandırılmadıqda, burun keçidlərini və açıq buynuz qişanı sürətlə düzəldəcəkdir. Bu, həddindən artıq ehtiyatla aparılmalıdır.

1% - Osmium tetroksid EM qorunması üçün məhlulda istifadə olunan bir qazdır. Ən yaxşısı 2 ml 4% OsO olan möhürlənmiş flakonlarda alınır4. İstifadə üçün 2,0 mL 4% osmium tetroksidinə 6,0 ml su və ya tampon əlavə edin. Alüminium folqa ilə sarın və soyuducuda saxlayın.

Perklor turşusu (PCA - MW 100.47)

2% (ağırlıq/həc) - 2,0 qram PCA-nı su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

Koloidal PVP örtüklü silisium. Sigma Chemical Co., St. Louis-dən əldə edilə bilər. pişik. #S 1644.

Periodik turşu (Periodat - PAS reaksiyası üçün istifadə olunur)

100 ml suda 0,6 qram dövri turşu həll edin və 0,3 ml konsentratlı azot turşusu əlavə edin.

Fenazin metosülfat (PMS - MW 306.34). Mutagen və qıcıqlandırıcı.

0,033% (h/v) - 90 mL suya və ya tampona 33 l fenazin metosülfat əlavə edin və 100 mL yekun həcmə çatdırın. İstifadədən dərhal əvvəl edilməlidir.

Fenol ciddi yanıqlara səbəb olur və bütün plastik və rezin birləşmələri asanlıqla həll edir. Bu birləşmə ilə işləyərkən həddindən artıq ehtiyatlı olun.

555 mL sulu fenol (və ya 500 qram fenol kristalları və 55 mL su) 70 mL mkresol ilə birləşdirin. 0,5 qram 8-hidroksikinolin əlavə edin.

Fenilendiamen oksalat (PPDO - MW 198.18)

0,02% (ağırlıq/həc) - 20 mq PPDO-nu su və ya tamponla 100 mL son həcmə qədər həll edin.

Fosfat tamponlu salin (PBS)

100 mL Ca +2 /Mg +2 pulsuz 10X PBSA-nı 800 mL distillə edilmiş su ilə qarışdırın. Ayrı-ayrılıqda, 0,1 qram maqnezium xlorid və 0,1 qram susuz kalsium xloridini son həcmdə 100 ml su ilə həll edin. Daimi qarışdırmaqla, seyreltilmiş PBSA-ya yavaş-yavaş maqnezium/kalsium xlorid məhlulu əlavə edin. Bir çöküntü əmələ gələrsə, yenidən başlayın və davamlı qarışdırmaqla daha yavaş əlavə edin.

Ca +2 /Mg +2 pulsuz Fosfat tamponlu salin - 10X (10X PBSA)

80 qram NaCl, 2,0 qram KCl, 15,0 qram iki əsaslı natrium fosfat və 2,0 qram monobazlı kalium fosfatı 1 litr distillə edilmiş suda həll edin. Bu, Ca +2 /Mg +2 pulsuz fosfat tamponlu şoran məhlulunun 10X məhlulunu yaradır. İstifadədən əvvəl 1:10 nisbətində seyreltin. Soyuducuda saxlayın.

Fosfat tamponlu salin-Tween 20 (4.8)

PBS-ni qarışdırın və 0,1% (v/v) Tween 20 əlavə edin.

Lobya lesitini kimi mövcuddur. Adətən balanslaşdırılmış duz məhlulunda 10-20 q/mL ehtiyat məhlulu kimi istifadə olunur. Toxuma kulturası üçün istifadə etməzdən əvvəl soyuq sterilizasiya edilməlidir.

Kalium xlorid (KCl - MW 74,55)

1 M - 74,55 qram KCl-ni su və ya tamponla 1 litrlik son həcmdə həll edin. Digər konsentrasiyalar üçün çəki tələb olunan molyarlığa çarpın. Məsələn, 0,150 M (150 mM) üçün 1 litr suda və ya tamponda 0,150 X 74,55 və ya 11,183 qram KCl istifadə edin. Karyotipləşdirmə üçün 0,075 M əldə etmək üçün yarısını istifadə edin.

Kalium siyanid (KCN - MW 65.11)

8 mM - 52 mq KCN-ni su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

Kalium fosfat, monobazik (KH 2 PO 4 - MW 136.09)

0,01M - 1,36 qram monobazlı kalium fosfatı su ilə 1 litr son həcmə qədər həll edin.

Kalium fosfat, iki əsaslı (K 2 HPO 4 - MW 174)

0,01 M - 1,74 qram iki əsaslı kalium fosfatı son həcmdə 1 litr su ilə həll edin.

Kalium fosfat tamponu

0,01M - pH 7,4 - 500 mL 0,01 M K 2 HPO 4 və 500 mL 0,01 M KH 2 PO 4 hazırlayın. KH 2 PO 4-ü maqnit qarışdırıcıya qoyun və pH elektrodunu daxil edin. pH-ı 7.4-ə tənzimləmək üçün K 2 HPO 4-ü yavaş-yavaş əlavə edin.

Kalium hidroksid (KOH - MW 56.10)

0,5 N - 28,05 qram KOH su ilə 1 litr son həcmdə həll edin.

10% (w/v) - 10 qram KOH su ilə 100 ml son həcmdə həll edin. Plastik qabda saxlayın.

Kalium natrium tartrat - Roşel duzu (KNaC 4 H 6 O 6 4H 2 O - MW 282,23)

n-Propanol (C 3 H 7 OH - MW 60.11)

3 M - n-propanol çəkilə bilər (180,3 qram) və ya sıxlıqdan istifadə edərək həcmli olaraq ölçülə bilər. Yəni, 180,3 qram - 0,8035 qram/ml və ya 224,4 mL n-propanol. Müvafiq miqdarı çəkin və ya ölçün və su ilə 1 litrlik son həcmə qədər seyreltin.

80 ml distillə edilmiş suda 1,46 qram K 2 HPO 4 və 0,92 qram K 2 HPO 4 həll edin. 2,5 qram kristal zərdab albumini əlavə edin və həcmi su ilə son 100 ml-ə qədər tənzimləyin.

0,6% (w/v) - 0,6 qram pironin Y-ni 100 ml asetonda həll edin.

0,1% (w/v) - 10 mL pankreas ribonukleaza növü A 10 ml suda və ya tamponda həll edin. Histoloji kəsiklərin fermentlə müalicəsi üçün bu məhluldan 0,5-1,0 mL-ni bölmənin üzərinə sürüşdürərək, örtülü petri lövhəsinə yerləşdirin.

2,5 qram Safranin O-nu 10 ml 95% etanolda həll edin və 100 ml su ilə seyreltin.

0,85% (w/v) - Şoran məməlilərin qan hüceyrələrinə izotonik olan, 0,85% və ya 0,9% məhlul üçün ən çox istifadə edilən NaCl məhluluna aiddir. Qarışdırmaq üçün 8,5 qram NaCl su ilə 1 litr son həcmdə həll edin.

salin sitrat (1 /10 SSC-nin seyreltilməsi)

0,878 qram NaCl və 0,294 qram natrium sitratı 1 litrlik son həcmə qədər su ilə həll edin.

Salin sitrat tamponu (SSC)

20X - Bu buferi istifadə etməzdən əvvəl 2X, 1X və ya 0.1X-ə seyreltilmək üçün ehtiyat 20X məhlulu kimi hazırlamaq adi haldır. 20X ehtiyat məhlulu hazırlamaq üçün 175 qram NaCl və 88 qram natrium sitratı 900 ml suda həll edin. 1 N HCL ilə pH-ı 7.0-ə tənzimləyin və 1 litr son həcmə gətirin. 1X SSC kimi istifadə üçün 1 hissə 20X ehtiyatı 19 hissə distillə edilmiş su ilə seyreltin. 2X SSC üçün 1 hissə 20X ehtiyatı 9 hissə su ilə seyreltin.

0,8 qram əsas fuksini 85 ml distillə edilmiş suda həll edin. 1,9 qram natrium metabisulfit və 15,0 mL 1 N HCL əlavə edin. Məhlulu ayırıcı huniyə qoyun və təxminən 12 saat ərzində 2 saatlıq fasilələrlə silkələyin. 200 qram aktivləşdirilmiş kömür əlavə edin, 1 dəqiqə çalxalayın və şəffaf məhlulu süzün. Həll hələ də çəhrayıdırsa, daha 100 qram kömür əlavə edin və əlavə bir dəqiqə silkələyin. Süzün və qaranlıq bir şüşədə saxlayın. Məhlul istifadə üçün şəffaf olmalıdır (çəhrayı rəng yoxdur).

2,0 qram natrium bikarbonat və 20,0 qram maqnezium sulfatı 1 litr son həcmə qədər suda həll edin. Kalıpların böyüməsini gecikdirmək üçün bir çimdik timol əlavə edin.

Natrium lauril sulfata baxın.

1X SDS-Elektroforez Çalışan Bufer

5X Tris-Glycine tamponunu 1X-ə qədər seyreltin və 1X Tris-Glycine litrinə 1,0 qram SDS əlavə edin. Seyreltmədən sonra pH 8,3 olmalıdır.

1.52 qram Tris bazası, 2.0 qram SDS, 20 mL qliserin, 2.0 mL -merkaptoetanol və 1 mq bromofenol mavisini son həcmdə 100 ml su ilə həll edin.

Pasteur pipetlərini təxminən 1 dəqiqə ərzində xloroformda 5% (h/v) diklorodimetilsilan olan bir şüşədə islatmaqla silikonlaşdırmaq olar. Çıxarın, boşaltın və distillə edilmiş su ilə bir neçə dəfə yuyun. Pipetləri 180°C-də 2 saat bişirin və istifadə etməzdən əvvəl sərinləyin.

Gümüş nitrat məhlulu (elektroforez boyanması üçün)

150 ml suda 0,15 qram NaOH həll edin. 3,5 ml konsentratlı NH 4 OH əlavə edin və 200 ml həcmə gətirin. Ayrı-ayrılıqda, 2,0 qram gümüş nitratı 10 ml son həcmdə həll edin. Daimi qarışdırmaqla 200 mL NaOH/NH 4 OH-a 8,0 ml gümüş nitrat əlavə edin. Bu məhlul istifadədən dərhal əvvəl hazırlanmalı və 30 dəqiqə ərzində istifadə edilməlidir.

SM agar mühiti (Sussmanın lil qəlib mühiti)

10,0 qram qlükoza, 10,0 qram pepton, 1,0 qram maya ekstraktı, 1,0 qram MgSO 4, 1,5 qram KH 2 PO 4, 1,0 qram K 2 HPO 4 və 20,0 qram aqar1-in son həcminə qədər həll edin. . Agarı həll etmək üçün qızdırın, avtoklav edin və petri plitələrinə paylayın.

1 M - 82,04 qram natrium asetatı su və ya tamponla 1 litr yekun həcmdə həll edin.

0,02 M - 1,64 qram natrium asetatı su və ya tamponla 1 litr yekun həcmdə həll edin.

1 M - pH 5,7 - 925 mL 1 M natrium asetata 75 mL 1 M sirkə turşusu əlavə edin.

0,01 M - 0,065 qram natrium azidi su ilə 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,39% (ağırlıq/həc) - 0,39 qram natrium azidi su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,2% (ağırlıq/həc) - 0,2 qram natrium barbitol su ilə 100 ml yekun həcmdə həll edin.

Natrium bikarbonat (NaHCO 3 - MW 84.0)

0,1 M - 0,84 qram NaHCO 3-ü su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,2 M - pH 7,4 - kakodil turşusu, natrium duzunun 0,2 M həllini hazırlayın (MW 159,91). 3,20 qram kakodil turşusu, natrium duzunu son həcmdə 100 ml su ilə həll edin. HCL ilə pH-ı 7.4-ə tənzimləyin.

2% (ağırlıq/həc) - 2,0 qram natrium karbonatı 0,1 N NaOH ilə 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,1 N NaOH - Lowry Protein analizi üçün istifadə olunur.

M - Natrium xloridin molar məhlulu üçün 58,44 qram NaCl su və ya tamponla 1 litr son həcmdə həll edilir. Müvafiq seyreltmələr üçün çəki tələb olunan molyarlığa çarpın. Məsələn, 0,05 M üçün 58,44-ü 0,05 və ya 2,92 qram / litrə vurun.

% - % məhlulları üçün onlar dəyişməz olaraq w/v-dir. 1% (ağırlıq/həc) məhlul üçün 1,0 qram NaCl-i su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin. Ağırlığı digər konsentrasiyalar üçün %-də müvafiq dəyişikliklə vurun.

200,300,400 mOsM - NaCl üçün osmollar iki dəfə molar konsentrasiya kimi hesablanır. Beləliklə, 200 mOsM məhlul .100 M NaCl olacaqdır. Eynilə, 300 mOsM .150 M və 400 mOsM 0.200 M NaCl olacaqdır.

0,09 M - 2,65 qram natrium sitratı 100 ml son konsentrasiyaya qədər su ilə həll edin.

Natrium sitrat/formaldehid (gümüşlə boyanmış zülallar üçün)

5,0 qram natrium sitratı 800 mL suda həll edin, 5,0 mL konsentratlaşdırılmış formalin (37% formaldehid məhlulu) əlavə edin və 1 litr su ilə seyreltin.

Natrium deoksixolat (deoksixolik turşu, natrium duzu - MW 392,58)

0,15% (ağırlıq/həc) - 150 mq deoksixolik turşu, natrium duzunu 100 mL son həcmə qədər su ilə həll edin.

Natrium ditionit (Na 2 S 2 O 6 2H 2 O - MW 242,16)

0,1 mq/mL - İstifadədən dərhal əvvəl 10 mq natrium ditioniti 100 mL suda həll edin. Alternativ olaraq, məhlulu azaltmaq üçün lazım olduqda quru toz əlavə edilə bilər. Natrium ditionit -20% C temperaturda saxlanmalıdır.

Natrium flüorid (NaF MW 42.0)

0,1 M - 4,2 qram NaF-ni su ilə 1 litrlik son həcmdə həll edin.

Natrium lauril sulfat (SDS və ya SLS - MW 288.38)

0,1% (ağırlıq/həc) - 0,1 qram SDS-i su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

Zərif qarışdıraraq qarışdırın, silkələməyin.

10% (w/v) - 10 qram SDS su ilə 100 mL son həcmdə həll edin.

0,6 M - 2,49 qram malon turşusu, natrium duzunu su və ya tamponla 25 mL yekun həcmdə həll edin.

Natrium perklorat (NaClO 4 H 2 O - MW 140,47)

1 M - 14,01 qram natrium perkloratı su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

Natrium fosfat, monobazik (NaH 2 PO 4 H 2 O - MW 137,99)

1 M - 14,01 qram natrium perkloratı su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,01 M - 1,38 qram monobazik natrium fosfatın son həcmi 1 litr olana qədər həll edin.

Natrium fosfat, iki əsaslı (Na 2 HPO 4 7H 2 O - MW 268.07)

1 M - 268,07 qram iki əsaslı natrium fosfatı 1 litr son həcmdə həll edin.

0,2 M - 53,61 qram iki əsaslı natrium fosfatı 1 litr son həcmə qədər həll edin.

0,01 M - 2,68 qram iki əsaslı natrium fosfatı 1 litr son həcmdə həll edin.

Bunlar biologiyada istifadə olunan ən çox yayılmış tamponlardır. Onlar KH 2 PO 4 və Na 2 HPO 4 ekvimolyar məhlullarını əlavə etməklə istehsal olunur. İkisinin bərabər həcmləri pH 7.0 verəcək, natrium fosfat isə pH-ı artıracaq. Kalium fosfat həcminin artması pH-ı azaldır. pH 5.4-dən 8.2-ə qədər tənzimlənə bilər. 7.0-8.2 pH arzu edilirsə, 500 mL natrium fosfat ilə başlayın və istədiyiniz pH-a çatana qədər qarışdıraraq və pH metr ilə pH-a nəzarət edərkən kalium fosfat əlavə edin. 5.4-7.0 pH istənirsə, 500 mL kalium fosfat ilə başlayın və istədiyiniz pH-a çatana qədər natrium fosfat əlavə edin. Tipik olaraq, tamponun molaritesi 0,01 ilə 0,1 M arasında dəyişir. KH 2 PO 4 və Na 2 HPO 4 uyğun molaritesini istifadə edin. Yəni, 0,05 M bufer istənirsə, yuxarıda göstərildiyi kimi 0,5 M KH 2 PO 4 və 0,5 M Na 2 HPO 4 istifadə edin.

Natrium kalium fosfat tamponu - Natrium fosfat tamponuna baxın.

Natrium pirofosfat (Na 4 P 2 O 7 10H 2 O - MW 446.06)

10 mM - 0,446 qram Na 4 P 2 O 7 10H 2 O su ilə 100 ml yekun həcmdə həll edin.

Natrium süksinat (MW 270.16)

0,6 M - 16,2 qram süksin turşusu, natrium duzunu su və ya tamponla 100 mL yekun həcmdə həll edin.

0,33 M - 60,12 qram sorbitolun son həcmi 1 litrə qədər su və ya tamponla həll edin.

Sorenson fosfat tamponu - Natrium fosfat tamponuna baxın.

0,2 M - pH 7,5 - 800 ml suda 24,14 qram Na 4 P 2 O 7 və 4,08 qram KH 2 PO 4 həll edin. Son həcmi 1 litrə qədər seyreltin.

Subbing həlli (slaydlar) - Xrom alum jelatinə baxın.

1,0 M - 34,2 qram saxarozanı su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin. Digər molyarlıqlar üçün çəki tələb olunan molar konsentrasiyası ilə çarpın. Məsələn, 0,25 M saxaroza üçün çəkisi 34,2 x 0,25 və ya 8,55 qram, son həcmi 100 ml.

40% (ağırlıq/həc) - 40 qram saxarozanı su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin. Aşağı faiz tələbləri üçün bu həlli seyreltin. Saxaroza sıxlığı gradientləri üçün istifadə edildikdə, saxarozaya 0,1 mL dietilpirokarbonat əlavə edilməli, məhlul 3-5 dəqiqə qaynadılmalı və istifadədən əvvəl soyudulmalıdır. Bu, RNAazı aradan qaldıracaq, əks halda məhlulun çirkləndiricisi olacaqdır. Bütün saxaroza məhlullarını soyuducuda saxlayın.

Kükürd turşusu (H2BELƏ Kİ4 - MW 98,08)

Konsentrat H2BELƏ Kİ4 17,8 M və ya 35,6 N-dir. 1,09 N 30,6 mL konsentratlaşdırılmış sulfat turşusunu yavaş-yavaş, daim qarışdırmaqla və sıçramalardan adekvat qoruyaraq təxminən 800 mL suya əlavə edin. Soyudun və su ilə həcmini 1 litrə çatdırın.

Kükürd turşusu (Fulgen reaksiyası üçün)

100 mL distillə edilmiş suya 1,0 mL konsentratlaşdırılmış HCl və 0,4 qram natrium bisulfit əlavə edin. Bu məhlul istifadədən əvvəl təzə hazırlanmalıdır. Yaxşı saxlamır.

Toxuma mədəniyyəti məqsədləri üçün, cərrahi təmizləmə üçün nəzərdə tutulmuş zəhərli olmayan yuyucu vasitələrdən istifadə edin. məs. Phisohex, Betadine və ya ekvivalenti. Əksər adi yaxma üçün 70% (v/v) etanol kifayətdir və üstünlüyü onun heç bir qalıq qoymamasıdır.

TEMED (N, N, N', N'-tetrametiletilendiamin)

PAGE üçün katalizator. Birbaşa istifadə edin və 15 mL gel məhlulu üçün 10 l TEMED əlavə edin.

0,1% (ağırlıq/həc) - 0,1 qram toluidin mavisini 10 mL etanolda həll edin və 100 ml yekun həcmə qədər su və ya sitrat tamponunu (pH 6,8-7,2) əlavə edin.

Trikloroasetik turşu (TCA - CCl3COOH - MW 163,4)

72% (w/v) - 72 qram TCA-nı 100 mL yekun həcmdə həll edin. TCA hidroskopikdir və suyu asanlıqla udur. Butulka boş qapaqlı (ərimə temperaturu 57-58°C. Maye kimi idarə etmək daha asandır. 30%-dən (ağırlıqda) çox məhlulların saxlanması) isti suya qoyularsa, bərk kristallar maye halına gələcək. parçalanma tez olduğu üçün tövsiyə edilmir, ona görə də bu məhlullar lazım olduqda hazırlanmalıdır.

Əsas Tris-HCl bufer kombinasiyasında çoxlu varyasyonlar var, onların əksəriyyəti kommersiyada mövcuddur. EDTA olan məhlullar TE tamponları, EDTA və sirkə turşusu olan məhlullar isə TAE tamponları kimi tanınır. Terminologiya müəllifdən asılı olaraq dəyişir, Tris buferi Tris-HCL həlləri mənasında istifadə olunur. Sigma Chemical Co., St. Louis, Trizma (əsas və HCl) ticarət adı altında bazara çıxarılan tamponlar xəttini daşıyır. Əsas tampon Tris (tris(hidroksimetil)aminometan) və HCl turşusunun birləşməsidir. Bunlara bəzən Tris-baz və Tris-HCl məhlulları deyilir. Tris tamponları pH 7.2-dən aşağı və ya 9.0-dan yuxarı istifadə edilməməlidir. Tris tamponları da son dərəcə temperatura həssasdır. Təlimatlar otaq temperaturu (25°C) üçün verilmişdir. Temperaturun hər dərəcə azalması üçün pH təxminən 0,028 vahid azalacaq.

1 M - 800 ml distillə edilmiş suda 121 qram Tris həll edin. Konsentratlaşdırılmış HCl ilə pH-ı tənzimləyin. Son həcmi 1 litrə qədər seyreltin. Aşağı tələb olunan molyarlıqlar bu ehtiyatdan seyreltilə bilər və ya Tris və HCl-in aşağı molyarlıqlarının birləşmələri kimi qarışdırıla bilər. Son analizdə istifadə olunacaq temperatur və molyarlıqda pH-ı ölçmək vacibdir.

5X - 15,1 qram tris bazası və 72,0 qram glisini 1 litrlik son həcmdə həll edin. İstifadə üçün 1 hissə 5X tamponu 4 hissə su ilə seyreltin.

0,2 % (ağırlıq/həc) - 0,2 qram tripan mavisini su ilə 100 ml son həcmə qədər həll edin.

0,25% - 0,25% PBSA-da 0,25 qram xam tripsini 100 ml son həcmə qədər həll edin. Soyuqda filtrasiya yolu ilə sterilizasiya edin. Alternativ olaraq, əvvəlcədən sterilizasiya edilmiş 1:250 nisbətində satılan əvvəlcədən seyreltilmiş xam tripsini alın.

1 litr suya 17,0 qram triptikaza pepton, 3,0 qram fitonepepton, 5,0 qram natrium xlorid, 2,5 qram dipotasium fosfat və 2,5 qram qlükoza əlavə edin. pH-ı 7.3-ə tənzimləyin və avtoklav edin.

Tween 20 və ya 80 (Polioksietilen sorbitan mono-oleat)

1% (h/v) - 90 ml suya 1,0 ml Tween əlavə edin. Qarışdırın və su ilə 100 mL son həcmə qədər seyreltin.

5% (v/v) - 5,0 qram uranil asetatı 50% (v/v) etanolda 100 ml son həcmə qədər həll edin. Qaranlıq yerdə otaq temperaturunda saxlayın. Uranil asetatın tamamilə həll edilməsi üçün ən azı 24 saat gözləyin. Bu həll təxminən 3 ay davam edəcək.

2,5 M - 15,02 qram sidik cövhəri su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

10 M - 60,06 qram sidik cövhəri su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

14 M - 84,08 qram sidik cövhərini su və ya tamponla 100 ml son həcmə qədər həll edin.

Canlılıq ləkəsi - Tripan mavisinə baxın.

  • Standart hüceyrə biologiyası laboratoriyaları və ya sorğuya əsaslanan təhsil üçün onlayn məlumat mənbəyi təmin etmək
  • İnternetdə hüceyrə biologiyasında kompüterlə əlaqəli bir çox digər resurslara sürətli və asan giriş yaratmaq
  • Hüceyrə biologiyası laboratoriyası təlimatını informasiya şəbəkəsi üzərindən qloballaşdırmaq
  • Müxtəlif müəssisələr üçün hüceyrə biologiyası laboratoriya təlimatını fərdiləşdirmək
  • Gələcək alimlər üçün təhsilin qiymətini aşağı salmaq.

Hüceyrə Biologiyası Laboratoriyası Təlimatı üçün müəllif hüquqları məlumatı.
Bu iş Milli Elm Fondunun DUE 9451132 saylı qrantı ilə dəstəklənir.
Müəlliflik hüququ Dr. William H. Heidcamp-ın mülkiyyətində qalır.

Hüceyrə biologiyası laboratoriyası müəllif tərəfindən müəyyən müddət ərzində toplanmış texnika və prosedurların çeşidindən ibarətdir. Kolleksiya müəyyən dərəcədə mövzu və konkret tapşırıqların seçilməsində müəllifin qərəzliliyini əks etdirir. İndiki kolleksiya da istisna deyil. Toplunun mövcudluğundan xəbəri olan dostlar onun nəşrinə ehtiyac olduğunu düşünürdülər. Orijinal kolleksiya 100-ə yaxın səhifəni əhatə etdi və 350 səhifədən artıq oldu.

Təlimlər on beş fəsildən və müasir hüceyrə biologiyasını qiymətləndirmək üçün əsas hesab olunan mövzulardan bəhs edən on əlavədən ibarətdir. Material müntəzəm olaraq əlavə olunacaq. Təkliflər və xüsusi məşqlər qəbul edilir. Hüceyrə biologiyası üzrə onlarla müəllimin öyrətdiyi kursları nəzərdən keçirərkən və yüzlərlə digərinin xülasə kurikulumlarına nəzər saldıqda hüceyrə biologiyasının tədrisində böyük müxtəliflik olduğu aydın olur. Bəzi institutlarda hüceyrə biologiyası heç bir şərti olmayan giriş kursudur və çox vaxt ümumi biologiyanı əvəz edir. O, heç bir laboratoriya komponenti olmadan və ya əsas anlayışları göstərmək üçün nəzərdə tutulmuş kifayət qədər sadə alətlər və avadanlıqlarla öyrədilə bilər. Digər ifratda, kurs, adətən təlimatçının peşəkar tədqiqat sahəsi ətrafında cəmlənmiş mürəkkəb, bahalı və vaxt aparan prosedurlarla birinci kurs məzunu səviyyəsinə qədər böyük bakalavr səviyyəsi ilə həmsərhəddir. Hüceyrə biologiyası kurslarının üstünlüyü bu ifrat dərəcələr arasında düşür, bunlar ümumi biologiyanın ilkin şərti olan, bəzi kimya biliklərinə üstünlük verən və molekulyar tədqiqat səviyyəsində (Genetik və Molekulyar Biologiya və ya) gələcək işlərə rəhbərlik etmək üçün nəzərdə tutulmuş kurslardır. İmmunologiya).

Təlimlər üç səviyyədədir. I səviyyəli məşqlər fundamental anlayışları təqdim edir və hüceyrələri öyrənmək üçün tələb olunan minimal texnikalardan istifadə edir. Hesab olunur ki, istənilən qurum bu təlimləri başa çatdırmaq üçün imkanlara malik olmalıdır. II səviyyə tələbələrdən və müəllimlərdən daha çox vaxt və enerji tələb edən texnika və prosedurları təqdim edir. Bu səviyyədə iş magistratura və peşə təhsilini davam etdirən biologiya ixtisasına uyğundur. Bu, Səviyyə I ilə müqayisədə daha çox avadanlıq və təchizat tələb edir. Hüceyrə biologiyası üzrə cari tədqiqatlarla ciddi məşğul olan şöbələr ya mövcud olacaq, ya da II Səviyyə fəaliyyətlərini yerinə yetirmək üçün tələb olunan avadanlıqları almağı planlaşdıracaqlar. III səviyyə bu sahədə qabaqcıl iş və müstəqil tədqiqat ehtiyaclarına cavab verir. Bu səviyyədə təqdim olunan məşqlər müəlliflə işləyən tələbələr tərəfindən yerinə yetirilmişdir və beləliklə, bakalavr təhsil müəssisəsində yerinə yetirilə bilər. III səviyyəli təlimlər tələbələrin tədqiqat layihələrini həvəsləndirmək üçün nəzərdə tutulub. Tələbələr planlaşdırılan laboratoriyadan kənar işlərə cavabdeh olacaqlar. Səviyyə III məşqləri bir neçə qabaqcıl texnikanı birləşdirir və tez-tez orta kollec biologiya şöbəsində hazır olmayan alətlər tələb edir.

Bununla belə, bəzi bakalavr müəssisələrinin hazırda yerinə yetirmədiyi məşqlər yoxdur. Məşqin müəyyən bir səviyyədə yerləşdirilməsi qərarı yalnız müəllifin verdiyi qərardır ki, hamı məşqləri eyni şəkildə bölməz. Buna görə də səviyyənin göstəricisi mütləq deyil, bələdçidir. Təhsil məqsədləri üçün HTML sənədlərini və ya şəkillərini endirməyə və dəyişdirməyə icazə verilir. Bununla belə, sizdən istifadə olunan hər hansı materialın mənbəyini göstərməyiniz xahiş olunur. Təlimlərdən istifadə etmək niyyətindəsinizsə, zəhmət olmasa, neçə nüsxə çıxaracağınızı və onların təyinatını (bizim qeydlərimiz üçün) bizə bildirin. Bütün nüsxələrdə materialın mənbəyi və Milli Elm Fondunun dəstək bəyanatı olmalıdır. Müəlliflik hüququ Dr. William H. Heidcamp-ın mülkiyyətində qalır. Təlimlər, düzəlişlər və ya təkmilləşdirmələrlə bağlı şərhləriniz varsa, bizimlə əlaqə saxlayın. Əgər siz məşq əlavə etmək istəyirsinizsə, biz məşqi nəzərdən keçirib siyahıya əlavə edəcəyik. Məşq üçün sizə tam kredit veriləcək, lakin siz məşqdən şəbəkə vasitəsilə pulsuz istifadəyə icazə verməlisiniz.-->


Sitokrom P450 Funksiya və İltihab və Xərçəngdə Farmakoloji Rollar

Tiangang Li, Udayan Apte, Farmakologiyada irəliləyişlər, 2015

3.2.5 Pregnane X reseptoru

PXR geniş spektrli ksenobiotiklər, endobiotiklər və klinik dərmanlar tərəfindən aktivləşdirilə bilər və öz növbəsində narkotik maddələr mübadiləsində bir sıra CYP3A və CYP2 ailə fermentlərini, konyuqasiya fermentlərini və daşıyıcıları induksiya edir (Kliewer, Goodwin, & Willson, 2002). Xolestazda yüksək səviyyəli birincili öd turşuları və ikincil öd turşuları və bəzi safra turşusu ara metabolitləri PXR-ni aktivləşdirə bilər. Liqand aktivləşdirildikdən sonra PXR adətən hədəf gen promotoru və ya gücləndirici bölgələrindəki ksenobiotik reaksiya elementlərinə bağlanaraq gen transkripsiyasını induksiya edir. Faza-I safra turşusu mübadiləsində PXR induksiya edir CYP3A4CYP2B genlər (Staudinger et al., 2001). Öd turşularının CYP3A4 ilə hidroksilləşməsi yalnız öd turşularını detoksifikasiya etmir, həm də onların konjuqasiyasını və sonrakı ifrazını artırır. Xüsusilə, CYP3A4 CDCA-nı HCA və 3α,7α-dihidroksi-3-okso-5β-xolan turşusuna, CA-nı 3-dehidro-CA-ya çevirə bilər. CYP3A4 yüksək zəhərli və kanserogen olan DCA-nı 3-dehidro-DCA və 1β,3α,12α-trihidroksi-5β-xolan turşusuna, LCA-nı 3-dehidro-LCA, hiodeoksixolik turşu və 1β-hidroksi-LCA-ya çevirə bilər. Faza-II və faza-III öd turşusu metabolizmində PXR öd turşusu konjuqasiya fermentlərini, SULT2A1 və UGT-ləri, kanalikulyar daşıyıcı MRP2 və bazolateral daşıyıcı OATP2-ni induksiya edir (Kliewer & Willson, 2002). Bu PXR hədəf genləri LCA ilə müalicə olunan və ya öd kanallarının bağlanmasına məruz qalan siçanlarda induksiya edilir, halbuki bu adaptiv cavablar pozulmuşdur. pxr nokaut siçanlar. Siçan PXR agonisti olan PCN, gəmiricilərdə qaraciyər CYP7A1 mRNA ifadəsini, ferment aktivliyini və öd öd turşusu ifrazını basdırdı (Mason & amp Boyd, 1978 Stahlberg, 1995 Staudinger et al., 2001), PXR-nin öd turşusunun sintezini tənzimləyə biləcəyini göstərir. Rifampisinlə aktivləşdirilən PXR də insanı sıxışdırdığı göstərildi CYP7A1 gen transkripsiyası (Bhalla, Ozalp, Fang, Xiang, & Kemper, 2004 Li & Chiang, 2005). PXR birbaşa olaraq bağlanmır CYP7A1 gen promotoru. Bunun əvəzinə, HNF4α ilə qarşılıqlı əlaqədə olur və onu bağlayan transaktivasiya fəaliyyətini basdırır. CYP7A1 gen promotoru. Bundan əlavə, bağırsaqda PXR-nin aktivləşməsinin FGF15 və ya FGF19 ifadəsini induksiya etdiyi göstərildi və PXR reaksiya elementinin promotorunda müəyyən edildi. FGF19 (Wang, Venkatesh, et al., 2011 Wistuba, Gnewuch, Liebisch, Schmitz, & Langmann, 2007). PXR olmayan siçanlar LCA müalicəsi və ya safra kanalının bağlanması nəticəsində yaranan hepatotoksikliyə daha çox həssas idi (Staudinger et al., 2001 Stedman et al., 2005). Tədqiqatlar həmçinin göstərdi ki, PXR-nin farmakoloji aktivləşdirilməsi eksperimental kolestaz modellərində safra turşusu ilə bağlı qaraciyər zədələnməsinə qarşı qorunur (Stedman et al., 2005). Rifampisin, insan PXR agonisti, insanlarda xolestazla əlaqəli qaşıntıları azaltmaq üçün istifadə edilmişdir (Hofmann, 2002). Qaşıntının müalicəsində rifampisinin effektivliyi fərdlər arasında müxtəlif idi (Hofmann, 2002).


Dovşanın nəcisindən xolik turşusunu deoksixol turşusuna və alloxol turşusunu allodeoksixolik turşuya dehidroksilətməyə qadir olan məcburi anaerob orqanizm təcrid edilmişdir. Bacteroides qrupunun üzvü idi (qram-dəyişən, sporsuz anaeroblar). Orqanizmin böyüməsi 10-20 mkq/ml neomisin tərəfindən maneə törədilib. Bu orqanizmin mövcudluğu xolestanolla qidalanan dovşanda öd kisəsi daşlarının inkişafı və eyni vaxtda neomisinlə müalicə olunan dovşanlarda onların olmaması üçün qənaətbəxş izahat verir.

Xidmətimizi təmin etmək və təkmilləşdirmək, məzmunu və reklamları uyğunlaşdırmaq üçün kukilərdən istifadə edirik. Davam etməklə siz razılaşırsınız kukilərdən istifadə .


4. Nəticələr

Xülasə, bir sıra yeni DCA törəmələri 210C3 mövqeyində alifatik diamin və amin spirti, eləcə də morfolin hissələrini ehtiva edən, sintez edilmiş və dörd insan xərçəng hüceyrə xəttinə, siçan makrofaqlarına və bədxassəli insan fibroblastlarına qarşı sitotoksiklik üçün in vitro, eləcə də NO istehsalını boğmaq qabiliyyətinə görə sınaqdan keçirilmişdir. makrofaglar. Təqdim edilmiş bütün amin tərkibli əvəzedicilərin ana molekul DCA ilə müqayisədə yeni birləşmələrin sitotoksikliyini əhəmiyyətli dərəcədə artırdığını və makrofaqlar vasitəsilə NO sintezinə qarşı inhibitor fəaliyyət göstərmədiyini göstərdik. Qiymətləndirilmiş birləşmələrin HuTu-80 və HepG2 enterohepatik şiş hüceyrə xətləri üçün anti-proliferativ təsirin açıq seçiciliyi nümayiş etdirildi ki, bu da törəmələrin (birləşmələrin) yan hissələrində üçüncü dərəcəli amin qrupları olduqda nəzərəçarpacaq dərəcədə artdı. 2/53/6) hidroksil qrupları (birləşmələr) ilə əvəz edilmişdir 89). Qarışıq 9C3 mövqeyində aminopropanol əvəzedicisini daşıyan, ən həssas HuTu-80 hüceyrələri və yaxşı dərman oxşarlığı parametrləri üçün sınaqdan keçirilmiş seriyada ən yüksək Seçicilik İndeksini göstərən qurğuşun birləşmə kimi müəyyən edilmişdir. Birləşmənin mexaniki tədqiqi 9 HuTu-80 hüceyrələrində aşkar edilmişdir ki, bu törəmə daxili kaspazadan asılı apoptoz və sitodestruktiv otofagiyanın aktivləşdirilməsi ilə ROS-dan asılı hüceyrə ölümünə səbəb olmuşdur. Molekulyar dok simulyasiyalarının nəticələri göstərdi ki, VDR birləşmənin əsas hüceyrədaxili hədəfi kimi qəbul edilə bilər. 9. Birlikdə götürdükdə, tapıntılarımız BA iskele əsasında yeni antitümör agentlərinin dizaynı üçün bəzi yeni təkliflər və BA törəmələrinin təsir mexanizminin daha yaxşı başa düşülməsi üçün əsas verir.


Santexnika

Robert C. Dysko,. Wesley D. Thompson, Tədqiqat Heyvanları Obyektlərinin Planlaşdırılması və Layihələndirilməsi, 2009

D Distillə/Deionizasiya/Tərs Osmos Su Sistemləri

Heyvan müəssisəsindəki prosedur və dəstək yerlərində təmizlənmiş su tələb oluna bilər. İlk qərar bütün obyektdə hansı suyun keyfiyyətinin tələb olunduğu olmalıdır. Lazımi keyfiyyət təmizlənmiş su üçün xüsusi istifadə(lər)dən asılı olaraq dəyişəcək.

Sənayedə istifadə edilən ən azı dörd fərqli su keyfiyyəti standartı var: Amerika Patoloqlar Kolleci (CAP), Amerika Test və Materiallar Cəmiyyəti (ASTM), Klinik və Laboratoriya Standartları İnstitutu (CLSI, keçmiş NCCLS) və Amerika Birləşmiş Ştatları Farmakopiyası (USP). Standart seçildikdən sonra xüsusi suyun keyfiyyət növü müəyyən edilməlidir. Məsələn, ASTM reagent dərəcəli su üçün müxtəlif təmizliklər üçün Tip I, II, III və IV təyinatlarından istifadə edir. Tip I, iz elementlərinin təhlili və HPLC kimi kritik tətbiqlər üçün istifadə edilən ən yüksək keyfiyyətli sudur və Tip IV şüşə qabların yuyulması kimi daha az kritik tətbiqlər üçün istifadə edilən ən aşağı keyfiyyətdir.

Təmizlənmiş su mərkəzi sistem tərəfindən istehsal oluna bilər və bina vasitəsilə və ya istifadə nöqtəsində və ya bu üsulların kombinasiyası ilə paylana bilər. Bütün istifadə nöqtələrinə paylanan IV Növ suyu istehsal edən mərkəzi sistemin olması qeyri-adi deyil, sonra hər bir fərdi istifadə nöqtəsində tələb olunarsa daha yüksək dərəcəli su (Tip I, II və ya III) verən cilalama qurğusu var.

Müxtəlif keyfiyyət standartlarına cavab vermək üçün təmizlənmiş su istehsal etmək üçün müxtəlif müxtəlif avadanlıq kombinasiyaları birləşdirilə bilər. Bəzi standartlar suyun istehsalı üçün hansı prosesdən istifadə oluna biləcəyini xüsusi olaraq təsvir edir. Suyun saxlanmasına ehtiyac sistemin ölçüsündən və istifadə olunan suyun miqdarından asılıdır. Kiçik sistemlər kartric filtrlərindən istifadə edə bilər və yaddaş yoxdur. Daha böyük sistemlər daha böyük media filtrlərindən istifadə etməli və yaddaş tələb edə bilər. Daim inkişaf edən texnologiya ilə hazırda suyun təmizlənməsi ilə bağlı geniş çeşiddə avadanlıqlar mövcud olduğundan, bu fəsildə tipik “orta” sistemə toxunulacaq.

Tipik təmizlənmiş su sistemi bir neçə fərqli müalicə mərhələsinə malikdir. Adətən məişət suyu təmizləyici sistemin girişinə 77°F temperaturda verilir və sonra hissəcikləri və bioloji maddələri çıxarmaq üçün multimedia filtrindən keçir. 77°F temperatur tərs osmos (RO) suyunun ən effektiv istehsalı üçün ideal temperatur hesab olunur. Sonra süzülmüş su sudan sərtliyi (mineralları) çıxarmaq üçün su yumşaldıcıdan və yumşaldıcı yatağından keçə biləcək hər hansı qatranı tutmaq üçün 3 μm-lik filtrdən keçir. Daha sonra kimyəvi inyeksiya və ya aktivləşdirilmiş karbon kimi xlorun xaric edilməsi üçün vasitə təmin edilir, ardınca hər hansı əlavə hissəcikləri tutmaq üçün 5 μm filtr verilir. Bundan sonra, su RO qurğusunun özünə daxil olur, bu da suya təzyiq edir və onu hər hansı çirklərin keçməsinə mane olan bir membrandan keçirməyə məcbur edir. Bu təmiz su daha sonra adətən 1 günlük su saxlayacaq ölçüdə olan bir saxlama anbarına yönəldilir.

Saxlama çənindən su nasoslar vasitəsilə çəkilir və daha yüksək keyfiyyətli su istehsal etmək üçün deionizasiya (DI) sistemi ilə əlavə cilalamadan keçirilə bilər. Son 10 il ərzində istifadəyə verilmiş daha yeni texnologiya mübadilə qatranının bərpası prosesini elektrikləşdirən elektro-deionizasiyadan istifadə edir. Sonra suyu sterilizasiya etmək üçün ultrabənövşəyi (UV) işığından keçir. DI prosesindən istənilən qatranı və ya UV müalicəsindən degenerasiya olunmuş bioloji materialı toplamaq üçün adətən son 0,2 μm filtr verilir. Bu su daha sonra boru sistemi vasitəsilə istifadə məntəqələrinə paylanır.

Təmizlənmiş su üçün boru sistemi terminal istifadə nöqtəsində dayana bilər və ya yenidən saxlama çəninə qaytarıla bilər. Ölü sistem, suyun durğunluğu səbəbindən boru kəmərlərində bakteriya artımına imkan verə bilər. Təkrar dövriyyəli sistem, bakteriya artımını azaltmaq üçün boru kəmərlərində təmizləmə hərəkəti yaratmaq üçün suyun saniyədə 3 və 5 fut arasında hərəkət etməsini təmin edir. Əgər təkrar dövriyyə sistemi istifadə olunursa, yerli durğunluğun qarşısını almaq üçün təkrar dövriyyəli magistraldan ayrılan terminal istifadə nöqtələri mümkün qədər qısa saxlanılmalıdır.

Sistemin gündəlik istehsal etməli olduğu təmizlənmiş suyun həcmini təxmin etmək üçün ümumi su istifadəsi üçün bir rəqəm olaraq hər bir lavabonun çıxışı üçün gündə 10 gallon yük istifadə edilə bilər. Təmizlənmiş sudan istifadə edən xüsusi avadanlıq üçün tələbat avadanlıq və qurğunun xüsusi tələblərinə əsasən araşdırılmalıdır. Dizayn axın sürətləri üçün, xidmət ediləcək xüsusi avadanlıq tərəfindən daha yüksək axın sürəti tələb olunmadığı təqdirdə, lavabo çıxışları dəqiqədə 1-2 gallon (gpm) və avadanlıq çıxışları 5 gpm olaraq qiymətləndirilməlidir. Təmizlənmiş su sistemi üçün boru ölçüsü 3-5 fps orta sürətə əsaslanmalıdır. Çıxışlarda minimum dizayn təzyiqi 20 psi olmalıdır. İstifadə nöqtəsi üçün cilalama qurğularından istifadə ediləcəksə, ilkin sistem üçün su təchizatı axını və təzyiq tələblərinin ikincil təmizləyici sistem(lər) üçün tələblərə cavab verməsi yoxlanılmalıdır.

Təmizlənmiş suyun paylanması üçün boru materialları üçün geniş seçim variantları mövcuddur ki, bunlar xüsusi tətbiq əsasında qiymətləndirilməlidir. Suyun keyfiyyəti, kanalizasiya metodu, iş təzyiqləri və iş temperaturu, eləcə də bazarın mövcudluğu və podratçı təcrübəsi material qiymətinə əlavə olaraq qiymətləndirilməlidir. Təmizlənmiş suyun paylanması üçün seçilmiş boru sistemi materiallarına polivinilxlorid (PVC), xlorlu polivinilxlorid (CPVC), təbii və ya piqmentli polipropilen (PP), poliviniliden ftorid (PVDF) və 304 və ya 316 tipli paslanmayan polad daxildir. PVC və CPVC boruları həlledici ilə sementlənmiş yuva birləşmələri ilə birləşdirilir, bu həlledicilər çıxarıla bilən çirkləndiricilərə kömək edə bilər və birləşmələr bakterial biofilmin inkişafı üçün yerlər ola bilər. PVC və CPVC yalnız kimyəvi cəhətdən təmizlənə bilər, lakin onlar ən ucuzdur və daha az təmiz su üçün ən uyğun ola bilər. Polipropilen ən çox istifadə edilən materialdır və istilik-füzyon yuvası birləşmələri, istilik-füzyonlu butt birləşmələri, infraqırmızı istilik-füzyonlu butt birləşmələri və ya muncuqsuz yarıqsız infraqırmızı istilik birləşmələri ilə birləşdirilə bilər. Bu sonuncu birləşmə ən hamar tipdir, nəticədə mümkün bakteriya inkişafı üçün ən az səth sahəsi olur. Bununla belə, PP kimyəvi cəhətdən təmizlənməlidir. PVDF, polipropilenlə eyni birləşmə üsullarına malikdir, lakin kimyəvi cəhətdən təmizləndiyi kimi istiliklə təmizlənə bilər.

Paslanmayan poladdan texnoloji sənayedə, əsasən istiliklə sanitarlaşdırılma qabiliyyəti və sui-istifadəyə qarşı davamlılığı üçün geniş istifadə edilmişdir. Paslanmayan polad ən çox yayılmış 180 qumlu mexaniki cilalamadan tutmuş 20 Ra (orta pürüzlülük) və ya daha az olan güzgü kimi cilalara qədər müxtəlif daxili səthlərə malikdir. Bütün tətbiqlər üçün ən yaxşı material yoxdur, lakin polipropilen və paslanmayan polad ən populyardır.

Sistemin doğrulanması ehtiyacı mümkün qədər tez müəyyən edilməlidir. Dizayn sənədləri və istehsal zamanı uçotun aparılması tikinti prosesinə daxil edilməlidir. Nəhayət, mürəkkəb təmizlənmiş su təmizləyici sistemləri nasazlıq siqnalları ilə təchiz edilməlidir ki, işçilər istehsal və ya axınla bağlı problemlər barədə xəbərdarlıq edə bilsinlər.


Öd komponentləri və amin turşuları yeni eksistiasiya olunmuş gəncin sağ qalmasına təsir göstərir Clonorchis sinensis medianın saxlanmasında

Clonorchis sinensis öd şirəsi ilə inkişaf edir. Öd və safra turşularının yeni eksistiasiya olunmuş yetkinlik yaşına çatmayanlara təsiri C. sinensis (CsNEJ) sağ qalma baxımından tədqiq edilmişdir. 1× Locke məhlulu, Dulbecco-nun dəyişdirilmiş Eagle mühiti, NCTC 109, Eagle, RPMI 1640 və 0,1% qlükozada saxlanılan CsNEJ-lərin sağ qalması yüksək idi, lakin 2× Locke, 0,85% natrixat və sffosferedində sürətlə azaldı. Mediadakı amin turşularının əksəriyyəti CsNEJ-nin sağ qalmasına üstünlük verir, lakin aspartik və glutamik turşular və adenin sağ qalmağı azaldır. Tərkibində 0,1%-dən çox öd olan mühitlərdə sağ qalma da əhəmiyyətli dərəcədə aşağı olmuşdur. Aşağı öd mühitində əvvəlcədən şərtləndirilmiş CsNEJs yüksək öd mühitində daha uzun müddət sağ qaldı. Zəhərli olan litoxolik turşu (LCA) istisna olmaqla, bütün öd turşularının və birləşmiş öd duzlarının CsNEJ-nin sağ qalmasına kömək etdiyi aşkar edilmişdir. NCTC 109 mühitinin CsNEJ-lərin in vitro saxlanması üçün optimal olduğu və 1× Locke məhlulunun bioaktiv birləşmələrin və molekulların bioloji təsirlərinin təhlili üçün uyğun olduğu müəyyən edilmişdir. Bu nəticələrə əsasən, biz öd turşularının CsNEJ-lərin fəaliyyətini gücləndirdiyini, lakin LCA-nın CsNEJ-ləri pisləşdirdiyini təklif edirik.

Bu, abunə məzmununun, qurumunuz vasitəsilə girişin önizləməsidir.


Mücərrəd

Bağırsaq epiteli, zədələndikdən sonra bərpa kimi tanınan özünü bərpa proseslərinə məruz qalan fitri bir maneə təşkil edir. Safra turşularının sağlamlıq və xəstəlikdə epiteliya funksiyasının mühüm tənzimləyiciləri kimi tanınmasına baxmayaraq, onların yaraların sağalma proseslərinə təsiri hələ aydın deyil. Burada kolon safra turşularının, deoksixolik turşunun (DCA) və ursodeoksixolik turşunun (UDCA) epiteliya bərpasına təsirlərini araşdırmaq üçün yola çıxdıq. T-də yaraların sağalması84 şəffaf, keçirici dayaqlarda yetişən hüceyrə monolayları 48 saat ərzində öd turşuları ilə və ya olmadan qiymətləndirilmişdir. Hüceyrə miqrasiyası Boyden kameralarında ölçüldü. mRNT və zülal ifadəsi RT-PCR və Western blotting ilə ölçüldü. DCA (50-150 µM) mədəni epiteliya monolaylarında yaranın bağlanmasını əhəmiyyətli dərəcədə maneə törətdi və Boyden kamera analizlərində zəiflədilmiş hüceyrə miqrasiyasını dayandırdı. DCA həmçinin farnesoid X reseptorunun (FXR) nüvə toplanmasına səbəb olur, FXR agonisti GW4064 (10 µM) isə yaranın bağlanmasına mane olur. Həm DCA, həm də GW4064 CFTR Cl- kanallarının ifadəsini zəiflətdi, halbuki CFTR-nin hər ikisi ilə CFTR fəaliyyətinin inhibəsiinh-172 (10 µM) və ya GlyH-101 (25 µM) də yaraların sağalmasının qarşısını aldı. Promoter/reportyor analizləri, CFTR-nin FXR tərəfindən induksiya edilən aşağı tənzimlənməsinin transkripsiya səviyyəsində vasitəçilik etdiyini ortaya qoydu. Bunun əksinə olaraq, UDCA (50-150 µM) in vitro yaraların sağalmasını artırdı və DCA-nın təsirlərinin qarşısını aldı. Nəhayət, DCA in vivo siçan modelində selikli qişanın sağalmasını inhibə etdi və UDCA təşviq etdi. Yekun olaraq, bu tədqiqatlar öd turşularının epitelial yaraların sağalmasının vacib tənzimləyiciləri olduğunu və buna görə də xəstəliyin müalicəsində bağırsaq maneə funksiyasını modulyasiya etmək üçün yeni dərmanların inkişafı üçün yaxşı hədəf olduğunu göstərir.

YENİ VƏ DİQQƏTLİ İkinci dərəcəli öd turşusu, dezoksixolik turşu, kolon epitelinin yaralarının sağalmasını maneə törədir, bu təsir nüvə öd turşusu reseptorunun, FXR-nin aktivləşdirilməsi və CFTR ifadəsinin və fəaliyyətinin sonradan aşağı tənzimlənməsi ilə vasitəçilik edir. Bunun əksinə olaraq, ursodeoksixol turşusu yaraların sağalmasını təşviq edir, bu, İBH xəstələrində selikli qişanın iltihabı ilə əlaqəli maneə funksiyasının itkilərinin qarşısını almaq üçün alternativ bir yanaşma təmin edə biləcəyini təklif edir.


Ən son ALLERGAN SALES, LLC Patentləri:

Bu ərizə ABŞ patent ərizəsinin davamıdır. 14 iyul 2017-ci il tarixində təqdim edilmiş № 15/650,556, ABŞ patent ərizəsinin Ser. 7 fevral 2014-cü il tarixində təqdim edilmiş № 14/175,086, ABŞ patent ərizəsinin Ser. 3 yanvar 2013-cü il tarixli № 13/733,729, indi ABŞ Patenti. № 9,186,364, ABŞ patent ərizəsinin davamı olan Ser. № 13/323,605, 12 dekabr 2011-ci il tarixdə verilmişdir, indi ABŞ Patenti. ABŞ patent ərizəsinin davamı olan № 8,367,649 Ser. № 12/716,070, 2 mart 2010-cu il tarixdə verilmişdir, indi U.S. Pat. 35 U.S.C. altında müavinəti iddia edən № 8,101,593. § 119(e) ABŞ Müvəqqəti Patent Müraciətinə No. 61/274,129, ABŞ patent ərizəsindən Ser. 3 mart 2009-cu il tarixdə verilmiş № 12/397,229, bütün bunlar bütünlükdə buraya istinadla daxil edilmişdir.

Hazırkı ixtira suda turşunun farmasevtik formulalarına aiddir ki, burada preparat pH-da saxlanılır ki, natrium deoksikolatın çökməsi əhəmiyyətli dərəcədə maneə törədilir.

Bədən yağının sürətlə çıxarılması köhnə bir idealdır və bir çox maddələrin bu cür nəticələrə nail olmaq üçün iddia edildi, baxmayaraq ki, bir neçə nəticə göstərdi. 1950-ci illərdən bəri homeopatik və kosmetik iddialar irəli sürülsə də, "mezoterapiya" və ya piylərin çıxarılması üçün inyeksiya vasitələrinin istifadəsi təhlükəsizlik və effektivlik baxımından həkimlər arasında geniş şəkildə qəbul edilmir. Mezoterapiya ilkin olaraq Avropada yerli tibbi və kosmetik xəstəliklərin müalicəsi üçün birləşmələrin qarışığı olan dəri inyeksiyalarından istifadə üsulu kimi yaradılmışdır. Mezoterapiya ənənəvi olaraq ağrıları aradan qaldırmaq üçün istifadə edilsə də, onun kosmetik tətbiqləri, xüsusən də yağ və selülit aradan qaldırılması son zamanlarda ABŞ-da diqqət çəkmişdir. Braziliyada populyarlaşan və fosfatidilxolin inyeksiyalarından istifadə edən yerli yağların azaldılması üçün belə bir məlumat verilmiş müalicə səhvən mezoterapiya ilə sinonim hesab edilmişdir. “Yağ əridən” inyeksiya kimi cəlbedici olmasına baxmayaraq, bu kosmetik müalicələrin təhlükəsizliyi və effektivliyi əksər xəstələr və həkimlər üçün birmənalı olaraq qalır (bax: Rotunda, AM və M. Kolodney, Dermatoloji Cərrahiyyə “Mezoterapiya və Fosfatidilkolin Enjeksiyonları: və Historiklər”. Review”, 2006, 32: 465-480).

Bu yaxınlarda nəşr olunmuş ədəbiyyatda öd turşusu deoksixolik turşunun in vivo olaraq yağ yataqlarına yeridildiyi zaman yağdan təmizləyici xüsusiyyətlərə malik olduğu bildirilir (Bax, WO 2005/117900 və WO 2005/112942, US2005/0261258 US2005/0260686/102 ABŞ). Yağ toxumasına yeridilmiş deoksixolat aşağıdakı təsirlərə malikdir: 1) sitolitik mexanizm vasitəsilə yağ hüceyrələrini parçalayır və 2) dərinin dartılmasına səbəb olur. İstənilən estetik korreksiyalara (yəni, bədən konturları) vasitəçilik etmək üçün bu effektlərin hər ikisi tələb olunur. Dezoksixolatın yağa təsiri məkanda saxlanılır, çünki yağa yeridilmiş deoksixolat zülalın təsiri ilə sürətlə təsirsizləşir, məs. albumin və sonra sürətlə bağırsaq məzmununa qayıdır. Klinik təhlükəsizlik təmin edən bu zəifləmə effektinin nəticəsi olaraq, piy aradan qaldırılması müalicələri adətən 4-6 seans tələb edir. Əməliyyata ehtiyac olmadan bu lokallaşdırılmış piylərin çıxarılması təkcə patoloji lokallaşdırılmış piy yığılmaları ilə bağlı terapevtik müalicə üçün deyil (məsələn, HİV-in müalicəsində tibbi müdaxilə ilə əlaqəli dislipidemiyalar), həm də cərrahiyə xas olan əlavə risk olmadan kosmetik yağların çıxarılması üçün də faydalıdır. (məsələn, liposaksiya) (bax, Rotunda et al., Dermatol. Cərrahiyyə “Natrium deoksixolatın yuyucu təsiri lokallaşdırılmış yağların əridilməsi üçün istifadə edilən enjekte edilə bilən fosfatidilxolin formulasının əsas xüsusiyyətidir”, 2004, 30: 1001-1008 və Rotunda et al. , J. Am.Akad.Dermatol.“Dərialtı deoksixolat inyeksiyaları ilə müalicə olunan lipomalar”, 2005: 973-978).

Bu spesifikasiyada qeyd olunan bütün nəşrlər və patent müraciətləri, hər bir fərdi nəşrin və ya patent müraciətinin xüsusi olaraq və fərdi şəkildə istinadla daxil edilməsi göstərildiyi kimi, buraya istinadla birləşdirilmişdir.

Müəyyən edilmişdir ki, natrium deoksixolatın aşağı (yəni, <5% w/v) konsentrasiyalarında natrium deoksixolatın sulu məhlulları məhlulun pH-nı tənzimləməklə sabitləşdirilə bilər. Bu ixtira təqribən 5%-dən az natrium deoksixolatdan ibarət olan sulu əczaçılıq formulasına yönəldilmişdir ki, burada formula natrium deoksixolatın çökməsini əhəmiyyətli dərəcədə maneə törətmək üçün kifayət qədər pH səviyyəsində saxlanılır.

Burada həmçinin, təxminən 5%-dən az natrium deoksixolatdan ibarət olan sulu məhlulda natrium deoksixolat çöküntüsünün qarşısını almaq üçün üsullar açıqlanır, sözügedən üsul məhlulun pH-nın təxminən 8,0-dən təxminən 8,5-ə qədər saxlanılmasını əhatə edir.

ÇİZİMLƏRİN QISA TƏSVİRİ

ŞEK. 1A, 1B, 1C, 1D, 1E və 1F, tərkibində 5, 50, 100 və 160 mq/mL (0,5, 5, 10 və 16% w/v) natrium deoksixolat olan preparatların iki həftəlik müddəti ərzində pH dəyişkənliyini göstərir. 4° C ( ŞEKİL 1A, 1B və 1C ) və 25° C ( ŞEKİL 1D, 1E və 1F ).

ŞEK. 2A, 2B, 2C və 2D həllolma qabiliyyətinin pH-da lotdan lota dəyişkənliyindən asılı olmadığını göstərir. ŞEK. 2A ŞEKİL-də sınaqdan keçirilmiş 5 mq (0,5% w/v) nümunələrin müqayisəsidir. 1A, 1B, 1C, 1D, 1E və 1F. ŞEK. 2B ŞEKİL-də sınaqdan keçirilmiş 50 mq (5% w/v) nümunələrin müqayisəsidir. 1A, 1B, 1C, 1D, 1E və 1F. ŞEK. 2C ŞEKİL-də sınaqdan keçirilmiş 100 mq (10% w/v) nümunələrin müqayisəsidir. 1A, 1B, 1C, 1D, 1E və 1F. ŞEK. 2D ŞEKİL-də sınaqdan keçirilmiş 160 mq (16% w/v) nümunələrin müqayisəsidir. 1A, 1B, 1C, 1D, 1E və 1F.

ŞEK. Şəkil 3, 20 mq/mL (2% w/v) sulu natrium deoksixolat (pH 8,0-da 10 mM fosfat tamponunda 0,9% NaCl və 0,9% benzil spirti) üçün inkubasiya edildikdən sonra əks fazalı HPLC xromatoqramını göstərir. ayda 4 ° C-də.

ŞEK. Şəkil 4 temperaturun (4°C, 25°C və 37°C) iki ay ərzində müxtəlif natrium deoksixolat tərkiblərinin təmizliyinə təsirini göstərir.

ŞEK. 5, dörd saat ərzində müxtəlif natrium deoksixolat formulalarının təmizliyinə təşviqatın təsirini göstərir.

ŞEK. Şəkil 6, 24 saat ərzində müxtəlif natrium deoksixolat formulalarının təmizliyinə UB təsirinin təsirini göstərir.

ŞEK. 7-də beş dondurma-ərimə dövrünün müxtəlif natrium deoksixolat formulalarının təmizliyinə təsiri göstərilir.

ƏTRAFLI TƏSVİRİ

Burada istifadə edildiyi kimi, müəyyən terminlər aşağıdakı müəyyən mənalara malikdir.

Bütün ədədi təyinatlar, məsələn, pH, temperatur, vaxt, konsentrasiya və molekulyar çəki, diapazonlar da daxil olmaqla, 0,1 artımla (+) və ya (−) dəyişən təxminlərdir. Bütün ədədi işarələrdən əvvəl “haqqında” ifadəsinin olması həmişə açıq şəkildə ifadə edilməsə də, başa düşülməlidir. “Haqqında” termini həmçinin “X+0.1” və ya “X−0.1” kimi “X”in kiçik artımlarına əlavə olaraq “X” dəqiq dəyərini də ehtiva edir. Həmişə açıq şəkildə ifadə edilməsə də, burada təsvir olunan reagentlərin sadəcə nümunəvi olduğu və onların ekvivalentlərinin bu sahədə məlum olduğu da başa düşülməlidir.

Burada istifadə edildiyi kimi, "tərkib" termini kompozisiyaların və üsulların oxunan elementləri ehtiva etdiyini, lakin digərlərini istisna etməməsini nəzərdə tutur. Kompozisiyaları və metodları müəyyən etmək üçün istifadə edildikdə “əsasən aşağıdakılardan ibarət olan” təyin olunmuş məqsəd üçün istifadə edildikdə birləşmə üçün hər hansı mühüm əhəmiyyət kəsb edən digər elementlərin istisna edilməsini bildirir. Beləliklə, mahiyyətcə burada müəyyən edilmiş elementlərdən ibarət tərkib iz çirkləndiriciləri təcrid və təmizləmə metodundan və farmasevtik cəhətdən məqbul daşıyıcılardan, məsələn, fosfat tamponlu şoran, konservantlar və s. “Tərkibindən ibarət olan” digər inqrediyentlərdən daha çox iz elementlərinin xaric edilməsini və bu ixtiranın kompozisiyalarının tətbiqi üçün əsas metod mərhələlərini nəzərdə tutur. Bu keçid şərtlərinin hər biri ilə müəyyən edilmiş təcəssümlər bu ixtiranın əhatə dairəsinə daxildir.

Burada istifadə edildiyi kimi, “natrium deoksixolat” termini natrium (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-dihidroksi-10,13-dimetilheksadekahidro-1H-siklopenta[ a]fenantren-17-il)pentanoat aşağıda göstərildiyi kimi. Digər stereoizomerlər ixtiranın əhatə dairəsinə daxildir.

Natrium deoksixolat və ya natrium (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-dihidroksi-10,13-dimetilheksadekahidro-1H-siklopenta[a]fenantren-17-il)pentanat 21 fevral 2008-ci il tarixli “Sintetik öd turşusunun tərkibi, metodu və hazırlanması” adlı ABŞ Patent Nəşri Nömrə 2008/0318870A1-də açıqlanan üsullara uyğun olaraq hazırlana bilər və bu sənəd tam olaraq istinadla daxil edilmişdir.

Burada istifadə edildiyi kimi, “sulu əczaçılıq formulası” termini xəstəyə tətbiq üçün uyğun olan suda natrium deoksixolat formulasına aiddir.

Burada istifadə edildiyi kimi, “tampon” termini zəif turşu və onun birləşmiş əsası və ya zəif əsas və onun birləşmə turşusunun qarışığından ibarət sulu məhlula aiddir. Bufer, məhlulun pH-ının az miqdarda turşu və ya əsas əlavə edildikdə çox az dəyişməsi xüsusiyyətinə malikdir. Tampon məhlulları müxtəlif kimyəvi tətbiqlərdə pH-ı demək olar ki, sabit bir dəyərdə saxlamaq üçün bir vasitə kimi istifadə olunur. Uyğun tamponlara misal olaraq fosfat tamponları və ədəbiyyatda məlum olanlar daxildir (bax, məsələn, Troy, D. B., ed. (2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21 st., Lippincott Williams & Wilkins).

Burada istifadə edildiyi kimi, "əsas" termini məhlulda pH 7-dən çox olan müxtəlif tipik suda həll olunan birləşmələrə, molekullara və ya ionlara aiddir. Bu cür birləşmələr, molekullar və ya ionlar turşudan proton ala bilir və ya paylaşılmamış elektron cütünü turşuya vermək. Müvafiq əsaslara misal olaraq metal karbonatlar və bikarbonatlar, məsələn, natrium karbonat, kalsium karbonat, maqnezium karbonat, sink karbonat, natrium bikarbonat və bənzərləri və metal hidroksidlər, məsələn, natrium hidroksid, kalium hidroksid və s. ədəbiyyat (bax, məsələn, Troy, DB, ed. (2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21 st., Lippincott Williams & Wilkins).

Burada istifadə edildiyi kimi, "metal karbonatlar" termini CO-nun metal duzuna aiddir3 2− . Məsələn, natrium karbonat, kalsium karbonat, maqnezium karbonat, sink karbonat və s.

Burada istifadə edildiyi kimi, "metal bikarbonatlar" termini HCO-nun metal duzuna aiddir3 − . Məsələn, natrium bikarbonat və s.

Burada istifadə edildiyi kimi, "metal hidroksidlər" termini - OH-nin metal duzuna aiddir. Məsələn, natrium hidroksid, kalium hidroksid və s.

Burada istifadə edildiyi kimi, "steril su" və ya "inyeksiya üçün su" terminləri bakteriostat, antimikrob agent və ya əlavə tampon ehtiva edən steril, pirogen olmayan inyeksiya üçün suyun preparatına aiddir. Ümumiyyətlə, əlavələrin osmolyar konsentrasiyası ən azı 112 mOsmol/litr təşkil edir (hüceyrədənkənar mayenin normal osmolyarlığının beşdə ikisi -280 mOsmol/litr).

Burada istifadə edildiyi kimi, "benzil spirti" termini birləşməyə aiddir

Burada istifadə edildiyi kimi, “çöküntü” termini məhlulda bərk maddənin əmələ gəlməsinə aiddir. Burada istifadə edildiyi kimi, “məhlul” termini həlledicidə həll edilmiş iki və ya daha çox maddədən ibarət əhəmiyyətli dərəcədə homojen qarışığa aiddir.

Burada istifadə edildiyi kimi, “yağışları əhəmiyyətli dərəcədə maneə törətmək” termini görünən yağıntıların əksəriyyətini və ya hamısını maneə törətmək və ya homojenliyi qorumaq deməkdir. Bu, istənilən vaxt ərzində edilə bilər.

Burada istifadə edildiyi kimi, “homogenlik üçün nisbi standart kənarlaşma” və ya “HE” homojenliyin standart kənarlaşmasını ortanın mütləq qiymətinə bölməklə alınan qiymətə aiddir. Bir HE 10-dan az olması çox yaxşı homojenliyi göstərir.

Tərkiblər

Çatdırılma üçün istənilən mühitdə bir dərman preparatının kimyəvi və fiziki sabitliyi haqqında biliklər qiymətlidir. Uzunmüddətli perspektivdə, formulun sabitliyi bazara çıxarılan məhsulun raf ömrünü diktə edəcəkdir. Əczaçılıq preparatının tərkibindəki aktiv tərkib hissəsinin xəstəyə tətbiqi zamanı lazımi konsentrasiyada olması üstünlük təşkil edir.

Xəstəyə natrium deoksixolatın tətbiqi üçün mövcud üsullara natrium deoksixolatın sulu məhlulunun aşağı konsentrasiyalı (yəni, <5% w/v) tətbiqi daxildir, çünki aşağı konsentrasiyanın təsirli və təsirli olması üçün faydalı olduğu göstərilmişdir bədəndəki yağ yataqlarının təhlükəsiz çıxarılması. Bununla belə, müşahidə edilmişdir ki, sulu mühitdə natrium deoksixolatın həm nisbətən aşağı (yəni, <5% w/v) və yüksək (yəni, >16% w/v) konsentrasiyalarında çöküntü əmələ gəlir. Bu yağıntı, hətta soyuq temperaturda (3-5°C) natrium deoksixolat sulu məhlullarının məhdud saxlanma müddətinə səbəb olur. Natrium deoksixolatın sulu məhlullarının bu qeyri-sabitliyini təxminən 5% -dən təxminən 16% w/v konsentrasiyasında natrium deoksixolat sulu məhlulunun hazırlanması və natrium deoksixolatın farmasevtik tərkibini natrium dezoksixolatın farmasevtik tərkibini seyreltməsi ilə aradan qaldırmaq olar. istifadə edin. Bu seyreltmə metodu həm saxlama stabilliyinə, həm də effektiv xəstə dozasına imkan vermək üçün effektiv olsa da, gündəlik istifadə üçün ideal bir üsul deyil.

Müəyyən edilmişdir ki, natrium deoksixolatın aşağı (yəni, <5% w/v) konsentrasiyalarında natrium deoksixolatın sulu məhlulları məhlulun pH-nı tənzimləməklə sabitləşdirilə bilər. Hazırkı müraciət təxminən 5%-dən az natrium deoksixolatdan ibarət olan sulu farmasevtik formulaya yönəldilmişdir ki, burada formula natrium deoksixolatın çökməsini əhəmiyyətli dərəcədə maneə törətmək üçün kifayət qədər pH səviyyəsində saxlanılır. Bəzi təcəssümlərdə, suda 5%-dən az natrium deoksixolat və ya alternativ olaraq təxminən 4,5%-dən az və ya alternativ olaraq təxminən 4%-dən az və ya alternativ olaraq təxminən 3,5%-dən az olan əczaçılıq formulası və ya alternativ olaraq təxminən 3%-dən az və ya alternativ olaraq təxminən 2,5%-dən az və ya alternativ olaraq təxminən 2%-dən az və ya alternativ olaraq təxminən 1,5%-dən az və ya alternativ olaraq təxminən 1%-dən az və ya alternativ olaraq təxminən təxminən 0,75% və ya alternativ olaraq, təxminən 0,5% -dən az və ya alternativ olaraq, suda təxminən 0,1% natrium deoksixolat.

Natrium deoksixolat və ya natrium (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-dihidroksi-10,13-dimetilheksadekahidro-1H-siklopenta[a]fenantren-17-il)pentanat 21 fevral 2008-ci il tarixli “Sintetik öd turşusunun tərkibi, metodu və hazırlanması” adlı ABŞ Patent Nəşri Nömrə 2008/0318870A1-də açıqlanan üsullara uyğun olaraq hazırlana bilər və bu sənəd tam olaraq istinadla daxil edilmişdir.

Bir təcəssümdə, burada açıqlanan əczaçılıq formulaları insana inyeksiya üçün uyğundur. Enjeksiyon üsulu hər hansı bir inyeksiya növü ola bilər, məsələn, subkutan inyeksiya, eləcə də digər inyeksiya formaları. Buna görə də, bəzi təcəssümlərdə sulu formulasiya sterildir. Sulu formula steril su və ya inyeksiya üçün su (WFI) istifadə edərək hazırlana bilər.

Bu ixtiranın bir aspektində natrium deoksixolatın çökməsi ən azı altı ay müddətində əsaslı şəkildə inhibə edilir. Başqa bir aspektdə, natrium deoksixolatın çökməsi ən azı bir il müddətində əhəmiyyətli dərəcədə inhibə edilir. Başqa bir aspektdə, natrium deoksixolatın çökməsi ən azı iki il müddətində əhəmiyyətli dərəcədə inhibə edilir.

Nəzərə alınır ki, müxtəlif temperaturlarda, məsələn, ətraf mühit və ya soyuq temperaturda saxlandıqda, formulanın saxlama müddəti arta bilər. Müəyyən təcəssümlərdə formulasiya təxminən 17°C-dən təxminən 27°C-dək temperaturda saxlanılır. Bəzi təcəssümlərdə formulanın temperaturu təxminən 25°C-dən təxminən 37°C-dək artırılır. Digər təcəssümlərdə formulasiya təxminən 2°C-dən təxminən 8°C-dək temperaturda saxlanılır.

Müəyyən təcəssümlərdə formulanın pH-ı təxminən 8.0 ilə təxminən 8.5 arasında dəyişir. Bir təcəssümdə, formulanın pH təxminən 8.0 və ya alternativ olaraq təxminən 8.1 və ya alternativ olaraq təxminən 8.2 və ya alternativ olaraq təxminən 8.3 və ya alternativ olaraq təxminən 8.4 və ya alternativ olaraq təxminən 8.5-dir.

Bir təcəssümdə pH bazanın istifadəsi ilə müəyyən edilir. Natrium deoksixolat ilə reaksiya verməmək və xəstəyə zərər verməmək şərti ilə formulanın pH-nı artırmaq üçün istənilən əsasdan istifadə oluna biləcəyi nəzərdə tutulur. Bəzi təcəssümlərdə əsas metal karbonatlardan, metal bikarbonatlardan, metal hidroksidlərdən və ya onların qarışığından ibarət qrupdan seçilir. Əsaslara misal olaraq, natrium karbonat, kalsium karbonat, maqnezium karbonat, sink karbonat, natrium bikarbonat, natrium hidroksid və kalium hidroksid və ya onların qarışığından ibarət qrupdan seçilmiş əsas daxildir, lakin bunlarla məhdudlaşmır. Bir təcəssümdə əsas natrium hidroksiddir.

Müəyyən hallarda, formulanın pH-ı tampondan istifadə etməklə saxlanıla bilər. Texnika sahəsində müxtəlif tamponlar məlumdur və nəzərdə tutulur ki, istənilən pH-da tamponlama qabiliyyətinə malik olan hər hansı bufer burada açıqlanan formulalarda istifadə edilə bilər. Bir təcəssümdə tampon fosfat tamponudur. Formulyasiyadakı fosfat miqdarı istənilən pH və duz konsentrasiyasını təmin etmək üçün müəyyən edilə bilər. Bir təcəssümdə, formula təxminən 10 mM fosfatdan ibarətdir.

Bəzi təcəssümlərdə, formula yüksək həllolma, qorunma qabiliyyəti və ya izotonik məhlul təmin etmək kimi arzu olunan xassələrə malik formulaya nail olmağa kömək etmək üçün ən azı bir köməkçi maddədən ibarətdir. Belə köməkçi maddələr sənətdə məlumdur. Bir təcəssümdə, formula təxminən 1% natrium xloriddən ibarətdir. Başqa bir təcəssümdə, formulaya təxminən 1% benzil spirti daxildir. Bəzi təcəssümlərdə formula təxminən 1% benzil spirti və təxminən 1% natrium xloriddən ibarətdir. Bəzi təcəssümlərdə formula təxminən 0,9% benzil spirti və təxminən 0,9% natrium xloriddən ibarətdir.

Burada açıqlanan formulalar natrium deoksixolatın çökməsini əhəmiyyətli dərəcədə maneə törətmək üçün kifayət qədər pH-da saxlanılan suda təxminən 5%-dən az natrium deoksixolatdan ibarətdir. Yağıntının miqdarı və ya formulanın homojenliyi müxtəlif üsullarla ölçülə bilər. Məsələn, formulun spektrofotometrlə işıqlandırılması ilə işığın səpilməsindən istifadə edərək kəmiyyətcə ölçülə bilər. Və ya alternativ olaraq, məhlulun vizual aydınlığını gözlə müşahidə etməklə homojenlik keyfiyyətcə ölçülə bilər. Bəzi təcəssümlərdə, formula təxminən 5% -dən az homojenlik üçün nisbi standart sapmaya malikdir. Alternativ olaraq, formulasiya təxminən 4% və ya alternativ olaraq təxminən 3% və ya alternativ olaraq təxminən 2% və ya alternativ olaraq təxminən 1% homojenlik üçün nisbi standart sapmaya malikdir.

Natrium deoksixolatdan olan qabaqcıl preparatların burada açıqlanan resepturalarda istifadəsi də nəzərdə tutulur. Ön dərman preparatın xəstəyə tətbiqindən sonra hidroliz, metabolizm və s. kimi in vivo fizioloji təsir vasitəsilə kimyəvi cəhətdən dəyişdirilən aktiv və ya qeyri-aktiv birləşmədir. Məsələn, mövcud deoksixol turşusunun efirini onun hidroksil qruplarından hər ikisində və ya onun uyğun törəmələrində hazırlamaq olar ki, deoksixolik turşunun və ya onun törəmələrinin sərbəst buraxılması hüceyrə membranının pozulması nəticəsində baş verir və esterazanın sərbəst buraxılması. Esterazın sərbəst buraxılması ilə efir qoruyucu qrupu parçalanır ki, deoksixolik turşunun aktiv forması və ya onun törəmələri yerində istənilən yerdə olsun. Efirləri əhatə edən ilkin dərmanların ümumi müzakirəsi üçün Svensson və Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) və Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985) kitablarına baxın.

Bəzi təcəssümlərdə buradakı məhlullara lipidlər, fosfolipidlər və ya fosfatidilxolin daxil deyil. Bəzi təcəssümlərdə buradakı məhlullara 5%-ə qədər miqdar, miqdar və ya v/v lipidlər, xüsusilə fosfolipidlər və ya daha dəqiq desək, fosfatidilxolin daxildir.

Bəzi təcəssümlərdə ixtiranın sulu əczaçılıq formulası əlavə olaraq aşağıdakılardan ibarət qrupdan seçilmiş ikinci terapevtik agenti ehtiva edə bilər: antimikrob agentlər, vazokonstriktorlar, antitrombotik agentlər, antikoaqulyasiya agentləri, köpük-depressantlar, antiinflamatuar agentlər , analjeziklər, dispersiya agentləri, dispersiya əleyhinə maddələr, nüfuz artırıcılar, steroidlər, trankvilizatorlar, əzələ gevşeticilər və ishal əleyhinə maddələr. Bəzi təcəssümlərdə məhlul 500 ml-ə qədər məhlul olan qabda olur. Belə konteyner şpris və ya şprislə doldurula bilən konteyner ola bilər.

Bəzi təcəssümlərdə, formulalar əlavə olaraq ortoqonal mexanizmlə yağın ölməsinə səbəb olduğu bilinən bir molekuldan ibarətdir. Belə molekullara BIBP-3226 (Amgen), MO-3304 (Boehringer Ingleheim), BMS-192548 və AR-H040922 (Bristol) kimi NPY reseptor antaqonistləri də daxil olmaqla, lakin bunlarla məhdudlaşmayan neyropeptid Y (NPY) antaqonistləri daxildir. , LY-357897 (Eli Lilly), 1229U91 və GW4380145 (GlaxoSmithKline), JNJ-5207787 (Johnson & Johnson), Lu-AA-44608 (Lundbeck), MK-0557 (Merck NPY9)NeurNG1- , NLX-E201 (Neurologix), CGP-71683 (Novartis), PD-160170 (Pfizer), SR-120819A, BIIE0246 və SA0204 (Sanofi Aventis), S-2367 (Shiongli), dihidropiridin və N törəmələri reseptor antaqonistləri, NPY reseptor antaqonistləri olan bisiklik birləşmələr, karbazol NPY reseptor antaqonistləri və NPY reseptor antaqonistləri olan trisiklik birləşmələr (Bax, məsələn, WO 2006/133160 və ABŞ Patent No 6,313,128). Ağ piy damarlarını saxlayan CKGGRAKDC peptid kimi yağ seçici pro-apoptotik peptidlər də nəzərdə tutulur (Bax, Kolonin M. G. et al., Nat. Med., 2004, 10(6): 625-32).

İxtiranın digər aspekti yağ hüceyrələrini öldürən maddələrlə deoksixolik turşu (DCA) kimi adipo-ablativ öd turşularının qarışdırılmasına aiddir. Bir aspektdə, bu ixtira deoksixolat inyeksiyasının ortoqonal mexanizmlə yağın ölməsinə səbəb olan molekulu qarışdırmaqla deoksixolat inyeksiyalarının estetik təsirini artırmaq üçün vasitəni nəzərdə tutur. Bu cür namizəd molekulların nümunələri bunlarla məhdudlaşmır, neyropeptid Y (NPY) antaqonistləri və yağ seçici proapoptotik peptidləri əhatə edir. İstənilən təsirlərə vasitəçilik etmək üçün həm yağ hüceyrələrinin öldürülməsi, həm də dərinin bərkidilməsi tələb oluna bildiyindən, yağ öldürmə qabiliyyətinə və güclü dəri sıxma effektinə malik olan agentin təsiri (məsələn, deoksixolat kimi) güclü yağ hüceyrələrini öldürən bir molekulun əlavə edilməsi ilə gücləndirilə bilər. effektləri. Bundan əlavə, öldürmək üçün damar sisteminə daxil olmağı tələb edən molekullar (məsələn, kapilyarların luminal tərəfində ifadə olunan zülallara bağlanan bəzi proapoptotik peptidlər) bu zülallara çıxış əldə edə bilər, çünki deoksixolat damar sızmasına səbəb ola bilər. Beləliklə, bu cür agentlər deoksixolat ilə sinergik ola bilər, potensial olaraq daha az terapevtik seanslarda bədən konturuna vasitəçilik etmək üçün daha güclü vasitə yarada bilər.

NPY antaqonistlərinə misal olaraq BIBP-3226 (Amgen), BIBO-3304 (Boehringer Ingleheim), BMS-192548 və AR-H040922 (Bristol-Myers Squibb-37) kimi NPY reseptor antaqonistləri daxildir, lakin bunlarla məhdudlaşmır. (Eli Lilly), 1229U91 və GW4380145 (GlaxoSmithKline), JNJ-5207787 (Johnson & Johnson), Lu-AA-44608 (Lundbeck), MK-0557 (Merck NPY), NGD-95-1 (N1LG) (Neurologix), CGP-71683 (Novartis), PD-160170 (Pfizer), SR-120819A, BIIE0246 və SA0204 (Sanofi Aventis), S-2367 (Şiongli), dihidropiridin və dihidropiridin biqonik reseptor törəmələri, NPY reseptor antaqonistləri olan birləşmələr, karbazol NPY reseptor antaqonistləri və NPY reseptor antaqonistləri olan trisiklik birləşmələr. Bax, məsələn, WO 2006/133160 və ABŞ Patenti. № 6,313,128 (rəqəmlər daxil olmaqla bütünlükdə bu sənədə istinadla daxil edilmişdir).

Nümunəvi yağ selektiv pro-apoptotik peptidlərə ağ yağ damarlarına ev sahibliyi edən CKGGRAKDC peptid daxildir, lakin bunlarla məhdudlaşmır. Bax, Kolonin M. G. et al., Nat. Med. 10 iyun (6):625-32 (2004).

Natrium deoksixolat və ya natrium (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-dihidroksi-10,13-dimetilheksadekahidro-1H-siklopenta[a]fenantren-17-il)pentanat 21 fevral 2008-ci il tarixli “Sintetik öd turşusunun tərkibi, metodu və hazırlanması” adlı ABŞ Patent Nəşri Nömrə 2008/0318870A1-də açıqlanan üsullara uyğun olaraq hazırlana bilər və bu sənəd tam olaraq istinadla daxil edilmişdir. Təqdir ediləcəkdir ki, tipik və ya üstünlük verilən proses şərtləri (yəni, reaksiya temperaturları, vaxtlar, reaktivlərin mol nisbətləri, həlledicilər, təzyiqlər və s.) verildikdə, başqa cür göstərilmədiyi təqdirdə digər proses şərtlərindən də istifadə edilə bilər. Optimal reaksiya şəraiti istifadə olunan xüsusi reaktivlərə və ya həllediciyə görə dəyişə bilər, lakin bu cür şərtləri adi optimallaşdırma prosedurları ilə bu sahədə ixtisaslı biri müəyyən edə bilər.

Burada açıqlanan, natrium deoksixolatın təxminən 5%-dən az kütləsi/həcmini təşkil edən sulu məhlulda natrium deoksixolat çökməsinin qarşısını almaq üçün bir üsuldur, sözügedən üsul məhlulun pH-nın ən azı təxminən 8.0-dən təxminən 8.5-ə qədər saxlanılmasını əhatə edir.

Bu ixtiranın bir aspektində burada açıqlanan üsullar ən azı altı ay müddətində məhlulda natrium deoksixolat çöküntüsünü əhəmiyyətli dərəcədə maneə törədir. Başqa bir aspektdə, natrium deoksixolatın çökməsi ən azı təxminən bir il müddətində əhəmiyyətli dərəcədə inhibə edilir. Başqa bir aspektdə, natrium deoksixolatın çökməsi ən azı iki il müddətində əhəmiyyətli dərəcədə inhibə edilir.

Məhlulun pH səviyyəsinin suda təxminən 5% w/v-dən az konsentrasiyalarda natrium deoksixolatın çökməsini maneə törədə biləcəyi aşkar edilmişdir, bu da natrium deoksixolatın məhlulda saxlanmasına imkan verir. Bir təcəssümdə pH bazanın istifadəsi ilə müəyyən edilir. Nəzərdə tutulur ki, natrium deoksixolat ilə reaksiya verməmək şərti ilə formulanın pH səviyyəsini artırmaq üçün istənilən əsasdan istifadə etmək olar. Bəzi təcəssümlərdə əsas metal karbonatlardan, metal bikarbonatlardan və metal hidroksidlərdən və ya onların qarışığından ibarət qrupdan seçilir. Əsaslara misal olaraq, natrium karbonat, kalsium karbonat, maqnezium karbonat, sink karbonat, natrium bikarbonat, natrium hidroksid və kalium hidroksid və ya onların qarışığından ibarət qrupdan seçilmiş əsas daxildir, lakin bunlarla məhdudlaşmır. Bir təcəssümdə əsas natrium hidroksiddir.

Müəyyən təcəssümlərdə pH təqribən 8,0 ilə 8,5 arasında dəyişir. Bir təcəssümdə, formulanın pH təxminən 8.0 və ya alternativ olaraq təxminən 8.1 və ya alternativ olaraq təxminən 8.2 və ya alternativ olaraq təxminən 8.3 və ya alternativ olaraq təxminən 8.4 və ya alternativ olaraq təxminən 8.5-dir. Bir təcəssümdə sulu məhlulun pH-ı təxminən 8,3-dür.

Müəyyən hallarda, buferin istifadəsi ilə formulanın pH səviyyəsini saxlamaq lazım ola bilər. Texnikada müxtəlif tamponlar məlumdur və nəzərdə tutulur ki, istənilən pH-da tamponlama qabiliyyətinə malik olan hər hansı bir tampon burada açıqlanan formulalarda istifadə edilə bilər. Bir təcəssümdə tampon fosfat tamponudur. İstənilən pH və duz konsentrasiyasını təmin etmək üçün tələb olunan fosfat miqdarı bu sahədə yaxşı məlum olan metodlardan istifadə etməklə hesablana bilər. Bir təcəssümdə, formula təxminən 10 mM fosfatdan ibarətdir.

Bir təcəssümdə, burada açıqlanan üsullar insana inyeksiya üçün uyğun olan formulalar təqdim edir. Enjeksiyon üsulu hər hansı bir inyeksiya növü ola bilər, məsələn, subkutan inyeksiya, eləcə də digər inyeksiya formaları. Buna görə də, bəzi təcəssümlərdə sulu məhlul steril su və ya inyeksiya üçün sudan (WFI) ibarətdir.

Bir aspektdə, bir və ya bir neçə köməkçi maddənin həllolma qabiliyyətini qorumaq və ya formulada mövcud olan natrium deoksixolatın qorunma qabiliyyətini artırmaq üçün istifadə edilməsi ola bilər. Bir təcəssümdə üsul təxminən 1% benzil spirtinin əlavə edilməsini əhatə edir. Bəzi təcəssümlərdə, formulasiya həmçinin izotonik məhlulun əldə edilməsinə kömək etmək üçün ən azı bir köməkçi maddədən ibarətdir. Bu cür köməkçi maddələr sənətdə məlumdur. Bir təcəssümdə metod təxminən 1% natrium xlorid əlavə etməyi əhatə edir. Bəzi təcəssümlərdə üsul həm 1% benzil spirtinin, həm də 1% natrium xloridin əlavə edilməsindən ibarətdir. Bəzi təcəssümlərdə üsul həm 0,9% benzil spirtinin, həm də 0,9% natrium xloridin əlavə edilməsindən ibarətdir. Burada açıqlanan üsullardan istifadə edərək, təxminən 5%-dən az natrium deoksixolatdan ibarət sulu məhlul natrium deoksixolatın çökməsini əhəmiyyətli dərəcədə maneə törətmək üçün kifayət qədər pH səviyyəsində saxlanılır. Yağıntının miqdarı və ya formulanın homojenliyi müxtəlif üsullarla ölçülə bilər. Məsələn, bir spektrofotometr ilə işıqlandırma vasitəsilə işığın səpilməsini ölçməklə kəmiyyətcə ölçülə bilər. Və ya alternativ olaraq, məhlulun vizual aydınlığını gözlə müşahidə etməklə homojenlik keyfiyyətcə ölçülə bilər. Bəzi təcəssümlərdə metod homojenliyə görə təxminən 5%-dən az olan nisbi standart sapmaya malik olan farmasevtik formulasiyanı təmin edir. Alternativ olaraq, homojenlik üçün nisbi standart sapma təxminən 4% və ya alternativ olaraq təxminən 3% və ya alternativ olaraq təxminən 2% və ya alternativ olaraq təxminən 1%.

Saxlama temperaturu preparatın natrium deoksixolatının həllolma qabiliyyətini saxlamağa kömək edə bilər. Müəyyən təcəssümlərdə saxlama temperaturu təxminən 17°C-dən təxminən 27°C-ə qədərdir. Bəzi təcəssümlərdə saxlama temperaturu təxminən 25°C-dən təxminən 37°C-dəkdir. Digər təcəssümlərdə saxlama temperaturu təxminən 2°C-dir. ° C-dən təxminən 8 ° C-ə qədər.

Nəzərdə tutulur ki, natrium deoksixolat konsentrasiyası formulada həll olma qabiliyyətinə təsir etmədən təqribən 0,05%-dən təxminən 5%-ə qədər dəyişə bilər. Müəyyən təcəssümlərdə, formulaya təxminən 0,05% w/v natrium deoksixolat konsentrasiyası daxildir. Alternativ olaraq, formula təxminən 0,07% w/v və ya alternativ olaraq təxminən 0,1% w/v və ya alternativ olaraq təxminən 0,3% w/v və ya alternativ olaraq təxminən 0,5% w/v və ya alternativ olaraq natrium deoksixolat konsentrasiyasından ibarətdir. təxminən 0,7% w/v və ya alternativ olaraq təqribən 1% w/v və ya alternativ olaraq təxminən 2% w/v və ya alternativ olaraq təxminən 3% w/v və ya alternativ olaraq təxminən 4% w/v və ya alternativ olaraq, təxminən 5% w/v.

    • A500=500 Nanometrdə absorbsiya
    • cc = Kub santimetr
    • Cm = Santimetr
    • F/T=Dondurmaq/ərimək
    • HPLC=Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiyası
    • saat.=Saat
    • mg=Milliqram
    • ml=Mililitr
    • mm=Milimetr
    • mM=Millimolyar
    • nm=Nanometr
    • t=Vaxt
    • UV = Ultrabənövşəyi
    • v/v=Həcmi/Həcmi
    • w/v=Çəki/Həcm (q/mL)
    • w/w=Çəki/Çəki
    • WFI=Enjeksiyon üçün su

    İxtira sırf ixtiraya nümunə olmaq üçün nəzərdə tutulan aşağıdakı nümunələrə istinad etməklə daha da başa düşülür. Hazırkı ixtira yalnız ixtiranın tək aspektlərinin illüstrasiyaları kimi nəzərdə tutulmuş nümunəvi təcəssümlərlə məhdudlaşmır. Funksional olaraq ekvivalent olan istənilən üsullar ixtiranın əhatə dairəsinə daxildir. Burada təsvir edilənlərə əlavə olaraq ixtiranın müxtəlif modifikasiyaları yuxarıdakı təsvirdən bu sahədə təcrübəli olanlar üçün aydın olacaqdır. İxtiranın bir neçə təcəssümü burada ətraflı təsvir olunsa da, bu sahədə təcrübəli olanlar başa düşəcəklər ki, ixtiranın ruhundan və ya əlavə edilmiş bəndlərin əhatə dairəsindən kənara çıxmadan ona dəyişikliklər edilə bilər. Bu cür dəyişikliklər əlavə edilmiş iddiaların əhatə dairəsinə düşür.

    Misal 1 pH və vizual müşahidələrdə dəyişikliklər

    Bu nümunə göstərir ki, tərkibində 5%-dən az natrium deoksixolat olan sulu formulalar müxtəlif temperaturlarda məhlula qaytarıla bilməyən çöküntü əmələ gətirir. Həll qabiliyyəti 5% w/v olan sulu formulalarda ən yaxşı idi.

    0,9% benzil spirti və inyeksiya üçün suda (WFI) həll edilmiş üç lot natrium deoksixolatın sabitliyi pH-da dəyişikliklər və çöküntü əmələ gəlməsi kimi vizual müşahidələr üçün yoxlanıldı. Hər lot dörd konsentrasiyada hazırlanmışdır: 5, 50, 100 və 160 mq/mL (müvafiq olaraq 0,5, 5, 10 və 16% w/v) 0,9% benzil spirti və WFI-də həll edilmişdir. Cədvəl 1 bu nümunədə sınaqdan keçirilmiş dəyişənlərin xülasəsini təqdim edir.

    Həlllər aşağıdakı kimi hazırlanmışdır. Hər bir vəziyyət üçün iki nümunə 2,0 ml-də steril 3 c.c. şüşə flakonlar (West Pharma P/N 68000316) və steril 13 mm-lik serum tıxacları ilə tıxaclarla (West Pharma P/N 19560001). Bu nümunələr iki həftə ərzində 2-8°C və 25°C-də saxlama zamanı pH və vizual müşahidələrdə hər hansı dəyişikliyi yoxlamaq üçün hər zaman nöqtəsində iki nüsxədə təhlil edilmişdir. Cədvəl 2 tədqiqat boyu nümunələrin təhlil edildiyi şərtləri və vaxt nöqtələrini ümumiləşdirir.

    Cədvəl 3 və 4-də göründüyü kimi, 5 mq/mL (0,5% w/v) ilə incə hissəciklər ümumiyyətlə bütün lotlarda və həm 4°C, həm də 25°C-də göründü, baxmayaraq ki, Nümunə 1 4°C-də. çökmədi. 50 mq/mL (5% w/v) ilə bütün nümunələr və şərtlər aydın idi. 100 mq/mL (10% w/v) temperatur effekti var idi, çünki 4°C-də bütün lotlar çökür, 25°C-də isə şəffaf qalır. 160 mq/mL (16% w/v) temperatur effekti var idi, çünki 4°C-də bütün lotlar çökür, 25°C-də isə şəffaf qalır. 160 mq/mL (16% w/v) ilə müşahidə edilən yağıntı 100 mq/mL-dən daha şiddətli və sürətli idi, lakin bu iki konsentrasiyada çökmüş məhsul otaq temperaturuna qədər qızdırıldıqdan və burulğandan sonra yenidən həll oluna bilər. 5 mq/mL (0,5% w/v) ilə çökmüş materialı məhlula qaytarmaq mümkün olmadı. Bu məlumatlar ŞEKİL-də qrafik olaraq göstərilmişdir. 1A - 1F.

    Həm 4°C, həm də 25°C üçün pH profilləri üst-üstə düşürdü, ona görə də belə görünür ki, temperatur 50 mq/mL-dən (5% w/v) az olan konsentrasiyalarda təsir göstərməmişdir. Bunun əvəzinə, 50 mq/mL-dən (5% w/v) az olan formulalar üçün həllolma pH-ı olduğu görünür. 100 və 160 mq/mL-də 4° C. nümunələri 25° C nümunələrindən daha yüksək pH-a malik idi. Bununla belə, artan konsentrasiya ilə temperatur pH-dan daha vacib görünür və formulasiya temperatura getdikcə daha həssas olur.

    Cədvəl 5 göstərir ki, natrium deoksixolatın həll olunma qabiliyyəti pH-da lotdan lota dəyişkənlikdən asılı deyil. Ümumiyyətlə, oxşar şəraitdə lotlar arasında fiziki sabitlikdə heç bir fərq yox idi.

    Həllediciliyə töhfə verən üç amil müəyyən edilmişdir. Heç bir xüsusi qaydada bunlar konsentrasiya, pH və temperaturdur. Müəyyən edilmişdir ki, pH-da çoxlu dəyişkənlik daha yaxşı və ya zəif həllolma ilə bağlı deyil. Ümumilikdə, 50 mq/mL bütün lotların “həlletmə” pH-dan yuxarı göründüyü və temperaturun bu tədqiqatın iki həftəlik müddətində heç bir təsir göstərmədiyi ən möhkəm şərt kimi görünür. Nəticələr göstərir ki, konsentrasiya, pH və saxlama temperaturu natrium deoksixolatın sabitliyinə təsir edir. 50 mq/mL-də olan nümunələr iki həftə ərzində 4°C və 25°C-də ən yaxşı sabitliyi göstərmişdir.

    Misal 2 Stabillik Araşdırması

    Bu nümunə göstərir ki, 8,0-8,5 pH-da 5%-dən az natrium deoksixolatdan ibarət sulu formulalar çox yaxşı həll qabiliyyəti nümayiş etdirir. Bu nümunə həm də onu göstərir ki, natrium deoksixolat 4°C, 25°C və 37°C-də səkkiz həftə saxlanarkən tərkibində 5%-dən az natrium deoksixolat olan sulu formulalarda heç bir parçalanma göstərmir. Bir sıra formulalar təşviqat, UV-ə məruz qalma və donma-ərimə dövrləri və bu stresslərə məruz qaldıqda heç bir deqradasiya və ya yağıntı nümayiş etdirməmişdir.

    Bir neçə fərqli formulada natrium deoksixolatın iki aylıq stabillik tədqiqi aparılmışdır. Əks fazalı HPLC ilə natrium deoksixolat bütün formulalarda bütün temperaturlarda heç bir deqradasiya göstərməmişdir. Bununla belə, pH 8,0 və ya 8,5 olan 10 mM fosfat, 0,9% NaCl, 0,9% Benzil spirti olan formulalarda həll olma qabiliyyəti ən yaxşı idi. 25° C və 37° C saxlama temperaturu da həll olunmağa kömək etdi. Qarışdırma, UV-ə məruz qalma və dondurma üçün seçilmiş bütün formulalar bu stresslərə məruz qaldıqda heç bir deqradasiya və ya yağıntı nümayiş etdirməmişdir.

    Cədvəl 6 burada açıqlanan formulaların hazırlanmasında istifadə olunan kimyəvi maddələrin siyahısını təqdim edir.

    Stabillik Tədqiqatları

    Natrium deoksixolat formulalarının sabitliyi Cədvəl 7-də ümumiləşdirilmiş şərtlərdə tədqiq edilmişdir. Hər hansı yağıntıya və ya buludluluğa nəzarət etmək üçün hər bir zaman nöqtəsində aparılan vizual müşahidələrlə yanaşı əks fazalı HPLC istifadə edilmişdir. Burulğan, ultrabənövşəyi şüalara məruz qalma və donma-ərimə üçün sınaqdan keçirilmiş formulalar temperatur tədqiqatında ən yaxşı nəticə göstərən formulalar arasından seçilmişdir. Bu tədqiqat zamanı müşahidə edilən natrium deoksixolatın əsas sabitlik problemləri həll olma qabiliyyəti və pH sürüşməsi idi.

    i. Temperaturun Sabitliyə Təsiri

    Tərkiblər 4°C, 25°C və 37°C-də inkubasiya edilmiş və a) parçalanma məhsulları, b) pH sabitliyi və c) formulanın aydınlığı üçün təhlil edilmişdir.

    Test edilmiş formulalar

    Yalnız sudan ibarət olan formulalar istisna olmaqla, natrium deoksixolat pH 6-a qədər titrlənmiş tamponda həll edildi. Yalnız sudan ibarət olan iki formuladan başqa hər bir formulasiya NaOH ilə hədəf pH-a qədər titrləşdirildi. Bütün formulalar steril süzülmüş və steril 2 cc şüşə flakonlara 1,5 ml-ə doldurulmuşdur. Doldurulmuş flakonlar daha sonra avtoklavlandı. 3A və 3B formulaları doldurulmadan əvvəl buludlu idi.

    Deqradasiya məhsullarını vizuallaşdırmaq üçün əks fazalı HPLC istifadə edilmişdir. 4A formulasının nümunə xromatoqramı deqradasiya məhsulları ilə bağlı əsas zirvəni göstərir (şəkil 3). ŞEK. 4, 4°C, 25°C və 37°C inkubasiya temperaturlarında bütün formulalar üçün deqradasiya məhsulları (yəni Saflıq) ilə bağlı əsas zirvəni göstərir. 4 t=0 və 2 ayda təmizliyi göstərir. Nəticələr göstərir ki, Cədvəl 8-də göstərilən reseptorların heç birində kimyəvi parçalanma baş verməyib.

    Cədvəl 9-da doldurulmadan əvvəl və t=0-da formulaların pH-ı göstərilir. Ümumiyyətlə, pH 8-ə doğru sürüşdü və tədqiqat boyu sabit qaldı. Bu, natrium deoksixolatın müəyyən tamponlama qabiliyyətinə malik olduğunu göstərir.

    Hər bir formulun aydınlığı iki üsulla müəyyən edilmişdir. Bir üsul vizual müşahidə idi, burada flakon intensiv işığa qədər saxlanılırdı və hissəciklərin varlığı gözün görə bildiyi ilə müəyyən edilirdi. Formulyasiya tamponları ilə doldurulmuş və istinad standartları kimi istifadə edilən üç temperaturda inkubasiya edilmiş flakonlar dəsti. Digər üsulda nümunələri spektrofotometrdə 500 nm işıqla 1 sm yol uzunluğunda işıqlandırmaq yolu ilə işığın səpilməsindən istifadə edilmişdir.

    Bəzi formulalarda görünən çöküntülərin olması zaman keçdikcə, xüsusən 4°C-də artmışdır. Ən aşağı pH-da sorbitol olan formulalar ən çox çöküntü yaratmışdır. Ən yaxşı performans göstərən formulalar pH 8.0 və ya 8.5-də 10 mM fosfat, 0.9% NaCl, 0.9% Benzil spirti ehtiva edir.

    Cədvəl 10, 11, 12 və 13 aydınlıq nəticələrini göstərir. “Visual aydınlıq” sütununun sıralama sistemi aşağıdakı kimidir: 0=aydın, hissəciklər yoxdur 1=aydın, az hissəciklər 2=aydın, bir neçə hissəciklər 3=aydın, çoxlu böyük hissəciklər, 4=az buludlu 5=çox buludlu.

    ii. Ajitasyonun, UV-ə məruz qalmanın və Donma-ərimənin Stabilliyə Təsirləri

    Temperatur tədqiqatının nəticələrinə əsasən, Ajitasyonun, UV-ə məruz qalmanın və Donma-ərimənin sabitliyə təsirlərini yoxlamaq üçün Cədvəl 14-də göstərilən aşağıdakı formulalar seçilmişdir.

    Deqradasiya məhsullarını vizuallaşdırmaq üçün əks fazalı HPLC istifadə edilmişdir. ŞEK. 5, 6 və 7-də qarışıqlıq, ultrabənövşəyi şüalara məruz qalma və beş dondurma-ərimə dövrü stressi altında Cədvəl 14-də göstərilən formulalar üçün deqradasiya məhsulları (yəni Saflıq) ilə bağlı əsas zirvə göstərilir. Nəticələr göstərir ki, hər hansı bir gərginlik nəticəsində kimyəvi parçalanma baş verməyib.

    Cədvəl 15-də flakonların açılmasından sonrakı pH-dan fərqli doldurulmadan əvvəl resepturanın pH göstəriciləri göstərilir.

    Hər bir formulun aydınlığı iki üsulla müəyyən edilmişdir. Bir üsul vizual müşahidə idi, burada flakon intensiv işığa qədər saxlanılırdı və hissəciklərin varlığı gözün görə bildiyi ilə müəyyən edilirdi. Formulyasiya tamponları ilə doldurulmuş və istinad standartları kimi istifadə edilən üç temperaturda inkubasiya edilmiş flakonlar dəsti. Digər üsulda nümunələri spektrofotometrdə 500 nm işıqla 1 sm yol uzunluğunda işıqlandırmaq yolu ilə işığın səpilməsindən istifadə edilmişdir.

    Həyəcan, UV-ə məruz qalma və donma-ərimə dövrləri yağışa səbəb olmur.

    Cədvəl 16, 17 və 18 aydınlıq nəticələrini göstərir. “Visual aydınlıq” sütununun sıralama sistemi aşağıdakı kimidir: 0=aydın, hissəciklər yoxdur 1=aydın, az hissəciklər 2=aydın, bir neçə hissəciklər 3=aydın, çoxlu böyük hissəciklər, 4=az buludlu 5=çox buludlu.

    On yeddi unikal formulada natrium deoksixolatın stabillik profilini yoxladıqdan sonra müəyyən edilmişdir ki, tərkibində 10 mM Fosfat, 0,9% NaCl və 0,9% benzil spirti pH 8,0 və ya 8,5 olan formulalar həllolma qabiliyyətini artırmaqla yanaşı, görünən çöküntülərin qarşısını ən yaxşı şəkildə alır. Əks fazalı HPLC ilə, natrium deoksixolat bütün formulalarda bütün temperaturlarda, səkkiz həftə ərzində 4°C, 25°C və 37°C-də saxlama zamanı heç bir deqradasiya göstərmir. Formulların vizual aydınlığına gəldikdə, saxlama temperaturu 25° C. və 37 ° C. həqiqətən 4 ° C ilə müqayisədə natrium deoksixolatın həllolma qabiliyyətini yaxşılaşdırdı.

    Qarışdırma, UV-ə məruz qalma və donma-ərimə üçün seçilmiş bütün formulalar bu stresslərə məruz qaldıqda heç bir deqradasiya və ya yağıntı nümayiş etdirməmişdir. Səkkiz həftəlik saxlama dayanıqlığı tədqiqatı başa çatdıqdan sonra seçilmiş formulalar bu kəskin stress şərtlərinə məruz qaldı. Bu təcrübələr ümumi istehsal və göndərmə prosedurlarının stressi zamanı natrium deoksixolatın sabitliyini müəyyən etməyə kömək edir. Bu kəskin stress tədqiqatlarından əldə edilən məlumatlar 5, 10 və 20 mq/mL natrium deoksixolat konsentrasiyası ilə pH 8.0 və ya 8.5-də 10 mM Fosfat, 0.9% NaCl və 0.9% Benzil spirti olan formulalarda natrium deoksixolatın sabitliyini təsdiqləyir.


    QRANTLAR

    KU Leuven tərəfindən J. Tack üçün Methusalem qrantı və Flanders Araşdırma Fondu (Fonds Wetenschappelijk Onderzoek Vlaanderen, FWO) tərəfindən doktorantura (H. Vanheel və T. Vanuytsel) və postdoktoral (R. Farre) təqaüdləri vasitəsilə təmin edilmişdir.

    Maliyyələşdirmə həmçinin Fondo de Investigación Sanitaria və CIBERehd, Instituto Carlos III, Subdirección General de Investigación Sanitaria, Nazirio de Economía y Competitividad (CP10/00502 & amp PI13/00935 M. Vicario) tərəfindən təmin edilmişdir. CIBERehd Instituto de Salud Carlos III tərəfindən maliyyələşdirilir.


    Videoya baxın: دكتور هشام الوصيف. ازاي جهاز تجميد الدهون بيحل مشكلة السمنة الموضعية (Iyul 2022).


Şərhlər:

  1. Ferhan

    great ideas ... we'd better adopt ... great.

  2. Shawnessey

    Mövzu maraqlıdır, mən müzakirədə iştirak edəcəyəm.

  3. Juma

    I suggest you try google.com and you will find all the answers there.

  4. Dimi

    Kamrad kill yourself

  5. Cadhla

    İndi müzakirədə iştirak edə bilmirəm - boş vaxt yoxdur. But soon I will definitely write that I think.

  6. Fionn

    Düzgün olmadığınızı görürəm. Müzakirə edəcəyik. Baş nazir yaz, ünsiyyət quracağıq.

  7. Godfrey

    Nə yaxşı ki, biz belə bir misilsiz bloqu tapa bilmişik və daha da gözəldir ki, belə ağıllı yazıçılar var!



Mesaj yazmaq