Məlumat

C. Elegans genləri susdurmaq üçün necə istifadə olunur

C. Elegans genləri susdurmaq üçün necə istifadə olunur


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Genləri susdurmaq üçün C. Eleqansdan istifadə edən təcrübə. Sualım var, C. Elegans bakteriyaları qidalandıraraq, bakteriyalarda maraq doğuran geni ilə əmələ gələn DNT plazmidini niyə və necə istifadə edə bilər?


Təcrübənizi təsvir etdiyiniz şəkildə, gen susdurulmasına səbəb olacaq plazmidi ifadə edən C.elegans bakteriyalarını qidalandırmaq, sonra həm @Kendall, həm də mən hesab edirəm ki, siz çox güman ki, RNTİ (müdaxilə) təcrübəsini həyata keçirirsiniz.

@Kendall yazdığı kimi:

Əgər mənim düşündüyüm budursa, yəqin ki, sizdə GFP+ qurdları var ki, onlar bir az qidalanır.

CaCl istifadə edərək çevrilmiş DH5-α E. coli2. Nəticə budur ki, nəzarət qurdlarınız gözəl şəkildə flüoresanlaşmalıdır və eksperimental qurdlar nəzərəçarpacaq dərəcədə zəif rəngdə olacaq. RNAi prosesi AMR tərəfindən təqdim olunan linkdə gözəl izah olunur. - Kendall

Bakteriyalar DNT plazmidi ilə kodlanmış RNT molekullarını transkripsiya edəcəklər. Bu RNT-lər maraqlandığınız gendən gələn ardıcıllıqlara əlavə ardıcıllıqlara sahib olacaqlar.

Nematod bakteriyaları yedikdə, bakteriyanın əmələ gətirdiyi RNT molekulları qurdun hüceyrələri tərəfindən alınacaq.

Daha sonra Dicer fermenti dsRNT-ni kiçik parçalara ayırır. Bu fraqmentlər daha sonra maraq genindən transkripsiya edilmiş mRNA-larla hibridləşə bilirlər. Bu, ya ribosomların düzgün bağlanmamasına səbəb olacaq, ya da çərçivədən kənar və ya əsas amin turşuları olmadan tərcüməyə başlayacaq və ya tərcüməni erkən dayandıracaq.

Nəticə odur ki, hüceyrələr ya maraq doğuran gen tərəfindən kodlanan zülal istehsal etməyəcək, ya da qeyri-funksional zülal istehsal edəcək. Əgər @Kendallın dediyi kimi, maraq doğuran gen GFP kimi reportyor gendirsə, müdaxilə təcrübəsinin nəticəsi flüoresan olmayan C.elegans olacaq. Əgər maraq doğuran gen aktin kimi struktur zülaldırsa, onda siz aktin geninin soxulcan hüceyrələrinə vurulmasının təsirlərini görəcəksiniz.

JoVE.com-dan olan bu onlayn video protokolu haqqında ətraflı məlumat verilir C.elegans-da RNT təcrübə aparır və həmçinin protokolun necə həyata keçirildiyini nümayiş etdirir.


Videoya baxın: Group 1: C. elegans as a Model Organism (Iyul 2022).


Şərhlər:

  1. Etienne

    Məncə siz haqlı deyilsiniz. müzakirə edəcəyik.

  2. Zulkik

    Ola bilsin ki, sizin sözünüzlə razılaşaram

  3. Lendell

    Mən yekunam, üzr istəyirəm, amma bu tamamilə başqadır, bunun əvəzinə mənə lazımdır.

  4. Cadman

    Olduqca doğru! Düşünürəm ki, bu nə yaxşı fikirdir.

  5. Dayner

    Möhtəşəm, çox yaxşı məlumat

  6. Bradburn

    Bu, təəssüf doğurur ki, indi ifadə edə bilmirəm - işə tələsirəm. Mən sərbəst buraxılacağam - mütləq rəyi ifadə edəcəyəm.



Mesaj yazmaq