Məlumat

Mədəniyyətdə hüceyrələri böyütmək və onları klonlaşdırmaq arasında fərq nədir?

Mədəniyyətdə hüceyrələri böyütmək və onları klonlaşdırmaq arasında fərq nədir?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Hela hüceyrələrindəki vikipediya səhifəsi Corc Geyin "bir xüsusi hüceyrəni təcrid etmək, onu çoxaltmaq və hüceyrə xəttinə başlamaq" qabiliyyətinə istinad edir. Daha sonra deyilir: "1955-ci ildə HeLa hüceyrələri müvəffəqiyyətlə klonlanan ilk insan hüceyrələri idi."

Hüceyrələri çoxaltmaqla onları klonlaşdırmaq arasında fərq nədir? Necə çoxalmaq klonlanmır?


Klonlar bir ana hüceyrədən genetik olaraq eyni olan qız hüceyrələridir. Beləliklə, bir hüceyrədən mədəniyyətə başlasanız, bütün yeni hüceyrələr bu hüceyrənin klonlarıdır. İlk üç hüceyrə (qırmızı, yaşıl və mavi) klonal genişlənməyə məruz qalır.

Hüceyrə mədəniyyətində hüceyrələri çoxaltsanız, adətən minlərlə hüceyrədən başlayırsınız, bunu rəqəmin ikinci hissəsində görmək olar. Bu hüceyrələr genetik olaraq eyni deyil, çünki onlar fərdi olaraq mutasiyaları toplayırlar. Beləliklə, qarışıqdakı hər bir "başlanğıc hüceyrənin" qız hüceyrələri (onların çoxu) texniki olaraq klonlardır, lakin bütün mədəniyyət klon kimi görünmür. Bu mövzuda Vikipediyaya da baxın.


Mədəni Hüceyrələr: Xüsusiyyətlər, Artım Parametrləri və Sinxronizasiya

1. Normal şəraitdə in vivo çoxalmayan hüceyrələr yetişdirilə və kulturalarda çoxaldıla bilər.

2. Mədəni hüceyrələrdə hüceyrə-hüceyrə qarşılıqlı əlaqəsi çox aşağıdır.

3. İn vivo hüceyrələrin üçölçülü arxitekturasına mədəni hüceyrələrdə rast gəlinmir.

4. Becərilmiş hüceyrələrə hormonal və qidalı təsir in vivo hüceyrələrdən fərqlənir.

5. Kultivasiya olunmuş hüceyrələr differensiallaşdırılmış və ixtisaslaşmış funksiyaları yerinə yetirə bilməzlər.

6. Yetişdirilmiş hüceyrələrin mühiti ixtisaslaşmamış hüceyrələrin çoxalmasına və yayılmasına kömək edir.

Kultura hüceyrələrə ətraf mühitin təsiri:

Ətraf mühit faktorları mədəniyyətdəki hüceyrələrə güclü təsir göstərir. Ətraf mühitə təsirin baş verdiyi əsas yollar sadalanır:

i. Hüceyrələrin böyüdüyü substratın və ya fazanın təbiəti. Bir qatlı mədəniyyətlər üçün substrat bərk (məsələn, plastik), asma mədəniyyətlər üçün isə mayedir.

ii. Kultura qida maddələri və fiziki-kimyəvi xassələri üçün istifadə olunan mühitin tərkibi.

iii. Hormonların və böyümə faktorlarının əlavə edilməsi.

iv. Qaz fazasının tərkibi.

v. Kultura inkubasiyasının temperaturu.

Aşağıdakı parametrlərə xüsusi istinadla mədəni hüceyrələrin bioloji və digər aspektləri qısaca təsvir edilmişdir:

4. Kultura hüceyrələrinin metabolizmi.

5. Hüceyrə kulturasının başlanması.

6. Hüceyrə xətlərinin təkamülü və inkişafı.

Hüceyrə yapışması:

Bərk toxumalardan alınan hüceyrələrin əksəriyyəti mədəniyyətlərdə yapışan monolaylar kimi böyüyür. Doku aqreqasiyası və ya subkulturadan əldə edilən hüceyrələr substrata yapışır və sonra çoxalmağa başlayır. Mədəniyyət texnikasının ilk günlərində substrat kimi bir qədər mənfi yüklü şüşələr istifadə edilmişdir. Son illərdə elektrik ionlarının boşalması ilə müalicə olunduqdan sonra polistirol kimi plastiklər istifadə olunur.

Hüceyrə yapışması hüceyrədənkənar matrisdəki molekullar üçün hüceyrə səthi reseptorları vasitəsilə baş verir. Görünür ki, hüceyrələr substratda yayılan matris zülalları ifraz edirlər. Sonra hüceyrələr reseptorlar vasitəsilə matrisa bağlanır. Əvvəlki hüceyrə mədəniyyəti olan substratların (şüşə və ya plastik) yapışma üçün daha yaxşı səth sahəsi təmin etmək üçün şərtləndirildiyi ümumi bir müşahidədir.

Hüceyrə yapışma molekulları:

Hüceyrə-hüceyrə yapışmasında və hüceyrə-substrat yapışmasında ümumi olaraq hüceyrə yapışma molekulları (CAMs) adlandırılan üç qrup zülallar iştirak edir.

Hüceyrə-hüceyrə yapışma molekulları:

Bu zülallar ilk növbədə homoloji hüceyrələr arasında hüceyrələrarası qarşılıqlı əlaqədə iştirak edir. CAM-lar iki növdür - kalsiumdan asılı olanlar (kaderinlər) və kalsiumdan müstəqil CAM-lar.

Bu molekullar hüceyrə substratının qarşılıqlı təsirinə vasitəçilik edirlər. Integrin's fibronektin və kollagen kimi matris molekulları üçün reseptorlara malikdir.

Bunlar aşağı yaxınlıqlı trans membran reseptorlarıdır. Proteoqlikanlar matriks kollagenə və böyümə faktorlarına bağlana bilər. Hüceyrə yapışma molekulları mədəni hüceyrələrin sitoskeletonlarına yapışdırılır.

Hüceyrə Proliferasiyası:

Mədəniyyət hüceyrələrinin yayılması dörd fərqli fazaya malik olan hüceyrə dövrü vasitəsilə baş verir (Şəkil 35.1).

Bu mərhələdə (M = mitoz), xromosomları təşkil edən iki xromatid qız hüceyrələrə ayrılır.

Bu boşluq 1 fazası hüceyrənin DNT sintezinə doğru irəliləməsini, dövrəyə yenidən daxil olub-olmamasını və ya diferensiasiyaya doğru getməsini müəyyən edən müxtəlif nəzarət proseslərinə çox həssasdır.

Bu mərhələ DNT replikasiyasının baş verdiyi DNT sintezi ilə xarakterizə olunur.

Bu, hüceyrəni mitoza yenidən daxil olmağa hazırlayan boşluq 2 mərhələsidir. DNT-nin bütövlüyü, təmiri və ya apoptoza daxil olması (proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü) təmir mümkün olmadıqda iki yoxlama nöqtəsi ilə müəyyən edilir - DNT sintezinin başlanğıcında və G.2 faza.

Hüceyrə proliferasiyasına nəzarət:

Mədəniyyətdəki hüceyrələr üçün ətraf mühit siqnalları hüceyrə dövranını və bununla da hüceyrə çoxalmasını tənzimləyir. Mühitdəki hüceyrələrin aşağı sıxlığı müəyyən böyümə faktorlarının (məsələn, epidermal böyümə faktoru, trombositlərdən əldə edilən böyümə faktoru) olması ilə birlikdə hüceyrələrin hüceyrə dövrünə daxil olmasına imkan verir.

Digər tərəfdən, yüksək hüceyrə sıxlığı və hüceyrələrin sıxlığı hüceyrə dövranını və bununla da yayılmasını maneə törədir. Ətraf mühit faktorlarının təsiri ilə yanaşı müəyyən hüceyrədaxili amillər də hüceyrə dövranını tənzimləyir. Məsələn, siklinlər təşviq edərkən, p53 və Rb gen məhsulları hüceyrə dövrünə mane olur.

Hüceyrə diferensasiyası:

Müxtəlif hüceyrə mədəniyyəti şərtləri maksimum hüceyrə çoxalmasına və hüceyrə xətlərinin yayılmasına kömək edir.

Hüceyrə proliferasiyasını təşviq edən amillər arasında aşağıdakılar vacibdir:

ii. Aşağı Ca 2+ konsentrasiyası

iii. Böyümə faktorlarının mövcudluğu

Hüceyrə diferensiasiyası prosesinin baş verməsi üçün hüceyrələrin çoxalması ciddi şəkildə məhdudlaşdırılmalı və ya tamamilə ləğv edilməlidir.

Hüceyrə diferensiasiyası aşağıdakı amillərlə təşviq edilə bilər (və ya induksiya edilə bilər):

ii. Yüksək Ca 2+ konsentrasiyası.

iii. Fərqləndirmə induktorlarının mövcudluğu (məsələn, hidro&şikortizon, sinir böyümə faktoru).

Yuxarıdakılardan göründüyü kimi, hüceyrələrin çoxalması və hüceyrə differensiasiyası üçün fərqli və demək olar ki, əks şərtlər tələb olunur. Buna görə də hüceyrə diferensiasiyası tələb olunarsa, iki fərqli şərt dəsti lazımdır.

1. Hüceyrə proliferasiyasını optimallaşdırmaq üçün.

2. Hüceyrə diferensiasiyasını optimallaşdırmaq.

Fərqləndirmənin saxlanması:

İndi məlumdur ki, hüceyrələr üç ölçülü strukturları saxlandıqda öz doğma və orijinal funksiyalarını uzun müddət saxlayırlar. Bu orqan mədəniyyətləri ilə mümkündür. Bununla belə, orqan mədəniyyətləri yayıla bilməz.

Son illərdə bəzi işçilər monolayer mədəniyyətləri birləşdirərək üç ölçülü strukturlar yaratmağa çalışırlar. Bundan əlavə, hüceyrələrin xüsusi matrislərdə (məsələn, sellüloza, kollagen geli, qlikoproteinlərin matrisi) üzərində və ya içərisində in vitro kulturasiyası da üçölçülü strukturlara malik hüceyrələrlə nəticələnir.

Dedifferensasiya hüceyrələrin in vitro kulturasiyası zamanı onların ixtisaslaşdırılmış xassələrinin dönməz şəkildə itirilməsinə aiddir. Bu, differensiallaşmış in vitro hüceyrələri öz xüsusiyyətlərini itirdikdə baş verir (Şəkil 35.2). In vivo vəziyyətdə, kök hüceyrələrin kiçik bir qrupu diferensiallaşmış hüceyrə hovuzu yaratmağa qadir olan progenitor hüceyrələrə səbəb olur (Şəkil 35.2A).

Digər tərəfdən, in vitro mədəniyyət sistemində, proliferasiyaya davam edən progenitor hüceyrələr əsasən istehsal olunur. Yeni əmələ gələn hüceyrələrin çox az hissəsi diferensiallaşmış hüceyrələr yarada bilir (şək. 35.2B). Xalis nəticə bloklanmış fərqdir. Dedifferensasiya hüceyrələrin ixtisaslaşdırılmış xassələrinin dönməz şəkildə itirilməsini nəzərdə tutur. Digər tərəfdən, de-adaptasiya müvafiq şərait yaratmaqla hüceyrələrin ixtisaslaşdırılmış xassələrinin yenidən induksiyasına aiddir.

Mədəni Hüceyrələrin Metabolizmi:

Enerji aspektlərinə xüsusi istinadla məməlilərin mədəni hüceyrələrinin metabolizmi Şəkil 35.3-də təsvir edilmişdir. Yetişdirilmiş hüceyrələr enerji mənbəyi kimi qlükoza və ya qlutamindən istifadə edə bilər. Bu iki birləşmə də mühüm anabolik prekursorlar yaradır.

Qlükoza qlikolizlə parçalandıqca, əsasən laktat əmələ gəlir. Bunun səbəbi, normal mədəniyyət şəraitində (məsələn, atmosfer oksigeni və suya batmış mədəniyyət) oksigenin məhdud tədarükü ilə anaerob vəziyyət yaradır. Ortaya ifraz olunan laktat toplanır.

Qlikolizdə əmələ gələn piruvatın bir hissəsi Krebs dövrü ilə oksidləşir. Qlükozanın kiçik bir hissəsi (4-9%) biosintetik yollar üçün riboza 5-fosfat və reduksiya edən ekvivalentləri (NADPH) təmin etmək üçün pentoza fosfat yoluna daxil olur, məsələn. nukleotidlərin sintezi.

Glutamin mədəni hüceyrələr üçün vacib bir enerji mənbəyidir. Qlutaminaz fermentinin təsiri ilə qlutamin qlutamat və ammonium ionlarını istehsal etmək üçün dezaminasiyaya məruz qalır. Qlutamat transaminasiya (və ya oksidləşdirici deaminasiya) zamanı Krebs dövrünə daxil olan a-ketoglutarat əmələ gətirir.

Piruvat əsasən mühitə asanlıqla atılan alanin istehsal etmək üçün transaminasiya reaksiyasında iştirak edir. Sürətlə böyüyən mədəni hüceyrələrdə transaminasiya reaksiyası qlutamin mübadiləsinin dominant yoludur.

Qlutaminin deaminasiyası mədəni hüceyrələr üçün zəhərli olan sərbəst ammonium ionlarını buraxır və onların böyüməsini məhdudlaşdırır. Son illərdə ammonyak istehsalını minimuma endirmək üçün dipeptidlər glutamil-alanin və ya glutamil-glisin istifadə olunur. Bundan əlavə, bu dipeptidlər mühitdə daha sabitdir.

Artıq qeyd edildiyi kimi, qlutamindən alınan α-ketoqlutarat (qlutamat vasitəsilə) Krebs dövrünə daxil olur və karbon qazına və suya oksidləşir. Curbs dövrünün düzgün işləməsi üçün dövrün aralıq hissələrinin balanslaşdırılması tələb olunur.

Curbs dövrünün iki metaboliti, yəni malat və oksaloasetat dövrü tərk edir və müvafiq olaraq piruvat və fosfoenol piruvata çevrilir. Sonuncu iki birləşmə asetil KoA şəklində Krebs dövrünə yenidən daxil ola bilər. Beləliklə, Curbs dövrünün davamlılığı qorunur. Qlükoza, eləcə də qlutamin ATP şəklində enerji təmin etmək üçün mədəni hüceyrələr tərəfindən metabolizə olunur.

Hüceyrə Mədəniyyətinin Başlanması:

Hüceyrə mədəniyyəti enzimatik və ya mexaniki müalicə vasitəsilə toxumadan alınan hüceyrələr tərəfindən başlana bilər. İlkin mədəniyyət selektiv prosesdir və nəticədə nisbətən vahid hüceyrə xətti ilə nəticələnir. Seçim hüceyrələrin tək qatlı mədəniyyətlər (substratlara yapışaraq) və ya asma kulturalar kimi yaşamaq qabiliyyətinə görə baş verir.

Yetişdirilmiş hüceyrələr arasında bəzi hüceyrələr böyüyə və çoxala bilər, bəziləri isə mədəniyyət mühitində yaşaya bilmir. Hüceyrələr, substratın mövcudluğu işğal olunana qədər monolaylı mədəniyyətlərdə böyüməyə davam edir.

Qovuşma termini mədəni hüceyrələr mövcud böyümə sahəsindən tam istifadə edərək bir-biri ilə sıx əlaqə qurduqda istifadə olunur. Sıxlığa görə böyümə məhdudiyyətinə həssas olan bəzi hüceyrələr üçün birləşmə nöqtəsinə çatdıqdan sonra hüceyrələr böyüməyi dayandırır. Bununla belə, transformasiya olunmuş hüceyrələr birləşməyə qarşı həssasdır və böyüməyə davam edir.

Mədəniyyət birləşdikdə hüceyrələr aşağıdakı xüsusiyyətlərə malikdir:

1. Mənşə toxumasına ən yaxın morfoloji oxşarlıq (yəni ana toxuma).

2. Hüceyrələrin xüsusi funksiyalarının yerli hüceyrələrlə müqayisə oluna bilən ifadəsi.

Hüceyrə xətlərinin təkamülü və inkişafı:

Birinci subkulturadan sonra yetişdirilən əsas mədəniyyət hüceyrə xətti adlanır. Müəyyən edilmiş bir hüceyrə xətti sonrakı subkulturasiya yolu ilə yayıla bilər. Subkulturalar təkrarlandıqca, ən sürətlə çoxalan hüceyrələr üstünlük təşkil edir, yayılmayan və ya yavaş yayılan hüceyrələr isə sulandırılır və nəticədə yox olur.

Hüceyrə bölünməsinin məhdud sayda (yəni populyasiyanın ikiqat artması) sonradan normal toxumada ölməsinin genetik cəhətdən müəyyən edilmiş hadisəsi qocalıq adlanır. Bununla belə, germ hüceyrələri və transformasiya edilmiş hüceyrələr davamlı olaraq çoxalmağa qadirdirlər. İn vitro mədəniyyətdə transformasiya olunmuş hüceyrələr davamlı hüceyrə xətlərinin yaranmasına səbəb ola bilər.

Davamlı hüceyrə xəttinin təkamülü Şəkil 35.4-də təsvir edilmişdir. Mədəniyyətdəki məcmu hüceyrə sayı log miqyasında Y oxunda, X oxu isə həftələrlə vaxtı təmsil edir. Davamlı hüceyrə xəttinin inkişafı üçün vaxt dəyişkəndir. Məsələn, insan diploid fibroblastları üçün davamlı hüceyrə xətti təxminən 14 həftədə yaranır, qocalma isə adətən 30 və 60 hüceyrə ikiqatından sonra 10 ilə 20 həftə arasında baş verə bilər.

Davamlı hüceyrə xətlərinin inkişafı:

Birlikdə transformasiya adlandırılan mədəniyyətdəki müəyyən dəyişikliklər davamlı hüceyrə xətlərinin yaranmasına səbəb ola bilər. Transformasiya kortəbii şəkildə baş verə bilər, kimyəvi və ya viral səbəb ola bilər. Transformasiya, əsasən, təmas inhibəsinin itirilməsi, böyümənin sıxlığının məhdudlaşdırılması və ankraj müstəqilliyi kimi böyümə xüsusiyyətlərinin dəyişdirilməsini əhatə edir. Əbədiləşdirmə termini mədəni hüceyrələrin sonsuz ömrünün əldə edilməsi üçün tez-tez istifadə olunur.

Hüceyrələrin hüceyrə xəttlərində davamlı böyümə qabiliyyəti hüceyrələrdəki genetik dəyişkənliyi təmsil edir. Çox vaxt p 53 geninin silinməsi və ya mutasiyası hüceyrələrin davamlı yayılmasından məsuldur. Normal hüceyrələrdə normal p 53 geni hüceyrə dövrünün dayandırılmasından məsuldur. Davamlı hüceyrə xətlərinin əksəriyyəti diploid və tetraploid dəyər arasında xromosom sayına malik olan anevloiddir.

Normal hüceyrələr və davamlı hüceyrə xətləri:

Normal hüceyrələrin böyük əksəriyyəti davamlı hüceyrə xətləri meydana gətirə bilmir. Məsələn, normal insan fibroblastları təxminən 50 nəsil ərzində çoxalmağa davam edir və sonra bölünməyi dayandırır. Bununla belə, onlar təxminən 18 ay canlı qalırlar. Və ömrü boyu fibroblastlar euploid olaraq qalırlar. Cücə fibroblastları da oxşar şəkildə davranırlar. Epidermal hüceyrələr və limfoblastik hüceyrələr davamlı hüceyrə xətləri yaratmağa qadirdir.

Mədəniyyət hüceyrələrinin xarakteristikası:

Becərilmiş hüceyrələrin və ya hüceyrə xətlərinin xarakteristikası hüceyrə sıralarının hüceyrə bankları vasitəsilə yayılması və tədqiqat laboratoriyaları ilə kommersiya şirkətləri arasında əlaqə yaratmaq üçün vacibdir.

Aşağıdakı aspektlərə xüsusi istinadla hüceyrə xətlərinin səciyyələndirilməsi ümumiyyətlə aparılır:

4. Hüceyrə xəttinin transformasiya olunub-olunmaması.

5. Xüsusi hüceyrə xətlərinin müəyyən edilməsi.

Hüceyrələrin morfologiyası:

Becərilmiş hüceyrələrin sadə və birbaşa identifikasiyası onların morfoloji xüsusiyyətlərini müşahidə etməklə həyata keçirilə bilər. Bununla belə, morfologiyaya ehtiyatla baxmaq lazımdır, çünki o, əsasən mədəniyyət mühitindən asılıdır. Məsələn, (mədəniyyətin) mərkəzində böyüyən epitelial hüceyrələr kənarları aydın şəkildə müəyyən edilmiş müntəzəm çoxbucaqlıdır, periferiyada böyüyənlər isə qeyri-müntəzəm və şişkindirlər.

Mədəniyyət mühitinin tərkibi və substratdakı dəyişikliklər də hüceyrə morfologiyasına təsir göstərir. Bir toxuma mədəniyyəti laboratoriyasında fibroblastik və epitel terminləri adətən hüceyrələrin mənşəyini deyil, görünüşünü təsvir etmək üçün istifadə olunur.

Bu hüceyrələr üçün uzunluq adətən eninin iki qatından çoxdur. Fibroblastik hüceyrələr təbiətdə bipolyar və ya çoxqütblüdür.

Bu hüceyrələr təbiətcə nizamlı ölçülərə malik çoxbucaqlıdır və adətən monolaylarda böyüyür. Fibroblastoid (fibroblast kimi) və epiteloid (epiteliyabənzər) terminləri fibroblastik və ya epitelial hüceyrələr kimi müəyyən etmək üçün xüsusi simvollara malik olmayan hüceyrələr üçün istifadə olunur.

Hüceyrələrin mənşəli növləri:

Hüceyrə xətlərinin növlərinin müəyyən edilməsi aşağıdakı üsullarla həyata keçirilə bilər:

b. İzofermentlərin elektroforezi.

c. Hər iki üsulun birləşməsi.

Son illərdə molekulyar zondlardan istifadə etməklə xromosomların identifikasiyası aparılır.

Mənşə toxumasının müəyyən edilməsi:

Hüceyrə xətlərinin mənşəli toxuma ilə müəyyən edilməsi aşağıdakı iki xüsusiyyətə istinad etməklə həyata keçirilir:

1. Hüceyrələrin mənsub olduğu nəsil.

2. Hüceyrələrin vəziyyəti, yəni kök hüceyrələri, prekursor hüceyrələri.

Hüceyrə xəttinin identifikasiyası üçün toxuma markerləri:

Hüceyrə xəttinin identifikasiyası üçün mühüm toxuma və ya nəsil markerlərindən bəziləri qısaca təsvir edilmişdir.

Hüceyrə markerləri kimi diferensiallaşdırılmış məhsullar:

Yetişdirilmiş hüceyrələr, tam ifadədə, identifikasiya üçün hüceyrə markerləri kimi xidmət edən diferensiasiya markerləri istehsal etməyə qadirdir.

Bəzi nümunələr aşağıda verilmişdir:

a. Hepatositlər üçün albumin.

b. Melanositlər üçün melanin

c. Eritroid hüceyrələri üçün hemoglobin

d. Əzələ hüceyrələri üçün miyozin (və ya tropomiyozin).

Toxuma markerləri kimi fermentlər:

Kultura hüceyrələrində fermentlərin identifikasiyası aşağıdakı simvollara istinad etməklə edilə bilər:

Hüceyrə xəttinin identifikasiyası üçün geniş istifadə olunan ferment markerləri Cədvəl 35.1-də verilmişdir.

Tirozin aminotransferaza hepatositlər üçün, tirozinaz isə melanositlər üçün spesifikdir. Serumdakı kreatin kinaz (MM) əzələ hüceyrələri üçün marker kimi xidmət edir, kreatin kinaz (BB) isə neyronların və neyroendokrin hüceyrələrin aşkarlanması üçün istifadə olunur.

Filament zülalları toxuma markerləri kimi:

Aralıq filament zülalları toxuma və ya nəsil markerləri kimi çox geniş istifadə olunur.

Misal üçün:

a. Astrositlər glial fibrilyar asidik protein (GFAP) tərəfindən aşkar edilə bilər.

b. Əzələ hüceyrələri desmin tərəfindən müəyyən edilə bilər.

c. Sitokeratin tərəfindən epiteliya və mezotel hüceyrələri.

Hüceyrə səthi antigenləri toxuma markerləri kimi:

Mədəniyyət hüceyrələrinin antigenləri toxuma və ya mənşəli hüceyrələrin aşkarlanması üçün faydalıdır. Əslində, identifikasiya hüceyrə xətləri üçün çoxlu antikorlar hazırlanmışdır (kommersiya dəstləri mövcuddur) (Cədvəl. 35.2). Bu antikorlar hüceyrə səthi antigenlərinə və ya digər zülallara qarşı qaldırılır.

İfraz edilmiş antigen a-fetoproteinə qarşı qaldırılan antikorlar fetal hepatositlərin identifikasiyası üçün marker kimi xidmət edir. Hüceyrə səthi antigenlərinin, yəni inteqrinlərin antikorları hüceyrə xətlərinin ümumi aşkarlanması üçün istifadə edilə bilər.

Transformasiya edilmiş hüceyrələr:

Transformasiya yeni genetik materialın alınması nəticəsində fenotipin dəyişməsi hadisəsidir. Transformasiya genetik qeyri-sabitliyin təşviqi ilə əlaqələndirilir.

Transformasiya edilmiş və becərilmiş hüceyrələr aşağıdakılara istinad edərək bir çox simvolda dəyişikliklər göstərir:

e. Xüsusi məhsulun formalaşması.

Hüceyrə xətlərini xarakterizə edərkən, hüceyrə xəttinin şiş hüceyrələrindən əmələ gəldiyini və ya kulturada transformasiyaya uğradığını müəyyən etmək üçün yuxarıdakı simvolları nəzərə almaq lazımdır.

Xüsusi Hüceyrə Xətlərinin İdentifikasiyası:

Bir mədəniyyət laboratoriyasında xüsusi hüceyrə xətlərini müəyyən etmək üçün bir çox yanaşma var:

c. RNT və protein analizi

Hüceyrə xəttinin əldə edildiyi növ və cinsi xromosom analizi ilə müəyyən etmək olar. Bundan əlavə, xromosomların analizi ilə normal və bədxassəli hüceyrələri ayırmaq da mümkündür. Normal hüceyrələrdə daha sabit xromosomların olduğunu qeyd etmək olar.Xromosom analizi ilə bağlı istifadə olunan mühüm texnikalar qısaca təsvir edilmişdir.

Bu texnika ilə fərdi xromosom cütləri arasında morfoloji fərq az olduqda müəyyən etmək mümkündür. Xromosom bantlanması Giemsa boyanmasından istifadə etməklə edilə bilər.

Xromosomların birbaşa sayı 50-100 yayılma arasında aparıla bilər. Lucida kamerası və ya qapalı dövrə televiziyası faydalı ola bilər.

Xromosomların karyotipləşdirilməsi:

Bu texnikada xromosomlar kəsilir, ardıcıllıqla sıralanır və sonra vərəqə yapışdırılır. Şəkil slayddan yazıla və ya skan edilə bilər. Xromosomların karyotipləşdirilməsi xromosomların sayılması ilə müqayisədə çox vaxt aparır.

Normal hüceyrəyə düşən DNT-nin ümumi miqdarı kifayət qədər sabitdir və mənşə növü üçün xarakterikdir, məs. insan, cücə və hamster fibroblastlarından normal hüceyrə xətləri. Bununla belə, DNT tərkibi siçanın normal hüceyrə xətlərində, həmçinin xərçəngli toxumalardan alınan hüceyrə xətlərində dəyişir. Transformasiya edilmiş hüceyrələrin əksəriyyəti anevloid və heteroploiddir. DNT analizi bu cür hüceyrələrin xarakteristikası üçün xüsusilə faydalıdır. DNT-nin analizi DNT hibridizasiyası və DNT barmaq izi ilə həyata keçirilə bilər.

Məşhur Southern blotting texnikası unikal DNT ardıcıllığını aşkar etmək üçün istifadə edilə bilər. Bu məqsədlə radioizotop, flüoresan və ya lüminessent etiketləri olan xüsusi molekulyar zondlardan istifadə edilə bilər. İstənilən hüceyrə xəttlərindən DNT çıxarılır, məhdudlaşdırıcı endonükleazlarla kəsilir, elektroforezə məruz qalır, nitroselülozda ləkələnir və sonra molekulyar (etiketli) zond və ya zondlar dəsti ilə hibridləşdirilir. Bu yanaşma ilə hüceyrə xətlərindəki xüsusi DNT ardıcıllıqları aşkar edilə bilər.

Hüceyrənin DNT-sində transkripsiya olunmayan müəyyən bölgələr var. Peyk DNT olaraq adlandırılan bu bölgələrin heç bir məlum funksiyası yoxdur və onların genetik təkamül üçün rezervuar ola biləcəyinə inanılır. Peyk DNT bölgələri hiper dəyişkənlik bölgələri hesab olunur. Bu bölgələr xüsusi məhdudlaşdırıcı endonükleazlarla kəsilə və cDNA zondlarından istifadə etməklə aşkarlana bilər.

Elektroforez və avtoradioqrafiyadan istifadə etməklə peyk DNT variasiyalarının nümunələri aşkar edilə bilər. DNT barmaq izləri adlanan bu cür nümunələr hüceyrə xəttinə xasdır. Son illərdə DNT barmaq izi texnikası çox populyar və hüceyrə xətlərinin mənşəyini təyin etmək üçün güclü bir vasitəyə çevrilmişdir.

RNT və protein analizi:

Hüceyrə xəttinin fenotip xüsusiyyətləri gen ifadəsi, yəni RNT və/və ya zülalların identifikasiyası ilə aşkar edilə bilər. mRNA-lar Northern blot texnikası ilə, zülallar isə Western blot texnikası ilə müəyyən edilə bilər.

Hüceyrələr in vitroda becərildikdə in vivo fermentlərin bəzi fəaliyyətləri itirilir. Məsələn, qaraciyər hüceyrələrinin arginaza fəaliyyəti kultivasiyadan sonra bir neçə gün ərzində itir. Bununla belə, müəyyən hüceyrə xətləri onların aşkarlanması üçün istifadə edilə bilən xüsusi fermentləri ifadə edir, məsələn. hepatositlər üçün tirozin aminotransferaza, beyində astrogliya üçün glutamil sintaza aktivliyi. Hüceyrə xəttinin aşkarlanmasında faydalı olan fermentlərin daha çox nümunəsi üçün Cədvəl 35.1-ə baxın.

Eyni reaksiyanı kataliz edən bir fermentin çoxsaylı formalarına izofermentlər və ya izozimlər deyilir. İzofermentlər bir çox fiziki və kimyəvi xüsusiyyətlərə görə fərqlənir - struktur, elektroforetik və immunoloji xassələri, K.m və Vmaks dəyərlər.

İzofermentlər elektroforez və xromatoqrafiya kimi analitik üsullarla ayrıla bilər. Ən tez-tez agaroza, sellüloza asetat, nişasta və poliakrilamiddən istifadə etməklə elektroforez istifadə olunur. Xam ferment elektroforetik mühitin bir nöqtəsində tətbiq olunur. İzofermentlər miqrasiya edərkən müxtəlif zolaqlarda paylanır, bu da uyğun xromogen substratlarla boyanmaqla aşkar edilə bilər.

İzofermentlər növlər və ya toxumalar üçün xarakterikdir. Hüceyrə xəttinin aşkarlanması üçün aşağıdakı fermentlərin izoenzimləri adətən istifadə olunur:

c. Qlükoza 6-fosfat dehidrogenaz

d. Aspartat aminotransferaza

İzoferment analizi hüceyrə xətlərinin növlərarası çarpaz çirklənməsinin aşkarlanması üçün də faydalıdır. Məsələn, siçan hüceyrə xəttinin hamster hüceyrə xətti ilə çirklənməsi peptidaz B izoenzimlərindən istifadə etməklə müəyyən edilə bilər.

Hüceyrə xətləri antikorların istifadəsi ilə antigenik markerlərin aşkarlanması ilə xarakterizə edilə bilər. Antigenik markerlər hüceyrə səthində yerləşə və ya hüceyrələr tərəfindən mədəniyyət mühitinə ifraz oluna bilər. Müxtəlif hüceyrə növlərinin aşkarlanması üçün ümumi istifadə edilən bəzi antikorlar Cədvəl 35.2-də verilmişdir (bax. səh. 430).

Mədəni Hüceyrələrin Artım Parametrlərinin Ölçüsü:

Müəyyən bir mədəniyyətin böyümə vəziyyəti haqqında məlumat tələb olunur:

a. Dizayn mədəniyyəti təcrübələri.

b. Mədəniyyətə müntəzəm qulluq.

c. Hüceyrə proliferasiyasının ölçülməsi.

d. Subkulturanın vaxtını bilin.

e. Müəyyən bir stimul və ya toksinə mədəniyyət reaksiyasını təyin edin.

Mədəni hüceyrələrin böyüməsinin ölçülməsi ilə bağlı ümumi istifadə edilən bəzi terminlər izah olunur.

Əhalinin ikiqat artması vaxtı (PDT):

Loqarifmik (log) fazanın ortasında hüceyrə populyasiyasının ikiqat artması üçün vaxt intervalı.

Hüceyrə dövrü və ya nəsil vaxtı:

Hüceyrə bölgüsündə bir nöqtədən dövrün eyni nöqtəsinə qədər, bir bölünmədən sonra. Beləliklə, hüceyrə dövrünün müddəti hüceyrə dövrünün bir nöqtəsindən eyni nöqtəyə yenidən çatana qədər ölçülür.

Bu, bütün mövcud substratın (böyümə sahəsi) istifadə edildiyi və hüceyrələrin bir-biri ilə sıx təmasda olduğu mədəniyyət mərhələsini ifadə edir.

Hüceyrələr digər qonşu hüceyrələrlə tam təmasda olduqda hüceyrə hərəkətliliyinin və plazma membranının fırlanmasının qarşısını alır. Bu, əsasən birləşmə vəziyyətində baş verir və hüceyrə proliferasiyasının dayandırılması ilə nəticələnir.

Ortanın hər ml-də olan hüceyrələrin sayı.

Yayla mərhələsində hüceyrələrin sıxlığı (hüceyrə/ml 2, səth sahəsi).

Mədəni hüceyrələrin böyümə dövrü:

Mədəniyyət hüceyrələrinin böyümə dövrü şərti olaraq üç faza ilə təmsil olunur - geriləmə mərhələsi, log (eksponensial) faza və yayla mərhələsi (Şəkil 35.5). Kultura hüceyrələrinin xüsusiyyətləri fazalara görə dəyişir.

Lag fazası uyğunlaşma dövrünü təmsil edir, bu müddət ərzində hüceyrə hüceyrə səthini və hüceyrədənkənar matrisi əmələ gətirir (tripsinizləşmə zamanı itirilir), substrata yapışır və yayılır. Hüceyrələri çoxalmağa hazırlayan müəyyən fermentlərin (məsələn, DNT polimeraza) və struktur zülalların artan sintezi var.

İxtisaslaşdırılmış məhsulların istehsalı yox olur, hüceyrə çoxalması dayandırılana qədər yenidən görünməyə bilər. Gecikmə fazası, subkultura və təkrar toxumdan sonra hüceyrələrin proliferasiyası üçün hazırlıq mərhələsini təmsil edir.

Log fazası geriləmə mərhələsindən sonra hüceyrələrin eksponensial böyüməsi ilə xarakterizə olunur.

Log fazasının müddəti aşağıdakılara istinad edərək hüceyrələrdən asılıdır:

c. Proliferasiyadan sonra sıxlıq.

Kütləvi fazada mədəni hüceyrələr yüksək canlılıq qabiliyyəti ilə ən vahid və təkrarlana bilən vəziyyətdədirlər. Bu nümunə götürmək üçün ideal vaxtdır. Giriş mərhələsi bir və ya iki populyasiyanın ikiqat artması ilə birləşməyə çatdıqdan sonra başa çatır.

Hüceyrələr birləşməyə çatdıqca böyümə sürəti xeyli azalır və mədəni hüceyrələrin çoxalması demək olar ki, dayanır.

Bu mərhələ yayla və ya stasionar fazanı təmsil edir və aşağıdakılarla xarakterizə olunur:

b. Plazma membranının azaldılması.

c. Minimum səth sahəsini tutan hüceyrələr.

f. Qida maddələrinin və böyümə faktorlarının tükənməsi.

g. Struktur zülalların sintezinin azalması.

h. Xüsusi məhsulların formalaşmasının artması.

Bir qat meydana gətirən normal mədəni hüceyrələrin əksəriyyəti birləşməyə çatdıqda böyüməyi dayandırır. Hüceyrələrin bəziləri isə mühitin doldurulması ilə birləşmədən sonra böyüməyə davam edir (az sürətdə), çox qatlı hüceyrələr əmələ gətirir. Transformasiya edilmiş mədəniyyət hüceyrələri adətən plato fazasında normal hüceyrələrlə müqayisədə daha yüksək hüceyrə sıxlığına çatır (Şəkil 35.6).

Mədəni Hüceyrələrin Kaplama Effektivliyi:

Hüceyrələrin aşağı sıxlığında koloniya əmələ gəlməsini əks etdirən örtük səmərəliliyi hüceyrə proliferasiyası və sağ qalmasını təhlil etmək üçün istifadə edilən bir ölçüdür.

Hüceyrələr, aşağı sıxlıqda, tək hüceyrə süspansiyonları şəklində becərildikdə, onlar diskret koloniyalar şəklində böyüyürlər. Kaplamanın səmərəliliyi aşağıdakı kimi hesablanır.

Kaplama səmərəliliyi = Yaranan koloniyaların sayı/No. toxumlanmış hüceyrələrin sayı × 100

Klonlaşdırma səmərəliliyi termini hər bir koloniya bir hüceyrədən böyüdükdə istifadə olunur (örtmə səmərəliliyi əvəzinə).

Hüceyrələrin daha yüksək sıxlıqda sağ qalmasını təmsil edən toxum səpmə səmərəliliyi aşağıdakı kimi hesablanır.

Toxum səmərəsi = Bərpa olunan hüceyrələrin sayı/No. toxumlanmış hüceyrələrin sayı × 100

Hüceyrə Sinxronizasiyası:

Sinxronizasiya hərfi mənada iki və ya daha çox şeyin eyni vaxtda baş verməsi deməkdir. Məsələn, iki və ya daha çox saat eyni vaxtı göstərmək üçün sinxronlaşdırıla bilər. Mədəniyyətdə hüceyrə dövrünün müxtəlif mərhələlərində olan hüceyrələr sinxronlaşdırıla bilər ki, hüceyrələr eyni fazada olsunlar. Hüceyrə sinxronizasiyası hüceyrə dövrü boyunca hüceyrələrin irəliləməsini öyrənmək üçün tələb olunur. Hüceyrə sinxronizasiyasına nail olmaq üçün bir neçə laboratoriya texnikası işlənib hazırlanmışdır.

Onlar geniş şəkildə iki qrupa bölünür:

1. Hüceyrələrin ayrılması üçün fiziki fraksiya.

2. Hüceyrələrin ayrılması üçün kimyəvi blokada.

Fiziki üsullarla hüceyrənin ayrılması:

Aşağıdakı xüsusiyyətlərə əsaslanan fiziki fraksiya və ya hüceyrə ayırma üsulları istifadə olunur:

c. Hüceyrə səthinin epitoplarına antikorların yaxınlığı.

d. İşıq səpilməsi və ya etiketlənmiş hüceyrələr tərəfindən flüoresan emissiya.

Tez-tez istifadə olunan iki üsul, yəni mərkəzdənqaçma ilə elütriasiya və flüoresanla aktivləşdirilmiş hüceyrə ayrılması burada qısaca təsvir edilmişdir.

Mərkəzdənqaçma elütriasiyası:

Fiziki xüsusiyyətlər - hüceyrə ölçüsü və çökmə sürəti mərkəzdənqaçma ilə elutriasiya texnikasında işləyir. Mərkəzdənqaçma elütriatoru (Beckmandan) hüceyrələrin məhsuldarlığının və həllinin daha yaxşı olması üçün çökmə sürətini artırmaq üçün inkişaf etmiş bir cihazdır. Hüceyrələrin ayrılması xüsusi hazırlanmış sentrifuqada və rotorda həyata keçirilir (şək. 35.7). Rotor dönərkən mühitdəki hüceyrələr ayırıcı kameraya vurulur.

Mərkəzdənqaçma qüvvəsi sayəsində hüceyrə kənarlara doğru itələnəcək. Daha sonra mühit kameradan elə pompalanır ki, mərkəzdənqaçma axını hüceyrələrin çökmə sürətinə bərabər olsun. Hüceyrələrdəki fərqlərə görə (ölçüsü, sıxlığı, hüceyrə səthinin konfiqurasiyası) hüceyrələr müxtəlif sürətlə çökməyə meyllidirlər və kamerada müxtəlif mövqelərdə tarazlığa çatırlar.

Elutriatordakı bütün əməliyyata port vasitəsilə baxmaq olar, çünki kamera stroboskopik işıqla işıqlandırılır. Tarazlıqda axın sürəti artırıla və hüceyrələr çıxarıla və müxtəlif fraksiyalarda toplayıcı qablarda ayrıla bilər. Hüceyrələrin ayrılmasını tam mühitdə həyata keçirmək mümkündür ki, hüceyrələr ayrıldıqdan sonra birbaşa kultura olunsun.

Floresensiya ilə aktivləşdirilmiş hüceyrə çeşidlənməsi:

Floresensiya ilə aktivləşdirilmiş hüceyrə çeşidlənməsi işığın səpilməsi (məsələn, hüceyrə ölçüsü) və ya flüoresan emissiyası (əvvəlcədən işlənmiş DNT, RNT, zülallar, antigenlər ilə) ilə aşkar edilə bilən fərqlərə əsasən hüceyrələri çeşidləmək üçün bir üsuldur. Prosedur hüceyrələrdən səpələnmiş işığın aşkarlanması və qeydə alınması üçün lazer şüası vasitəsilə bir hüceyrə axınının keçməsini nəzərdə tutur. Hüceyrələr flüoresan ləkə ilə əvvəlcədən müalicə edildikdə (məsələn, DNT üçün xromomisin A), lazer tərəfindən həyəcanlanan flüoresan emissiya aşkar edilə bilər.

Flüoresanla aktivləşdirilmiş hüceyrələrin çeşidlənməsi prinsipinə əsaslanan iki alət istifadə olunur:

Bu alət hüceyrə ölçüsü və DNT floresansının birləşməsinin ölçülməsi əsasında hüceyrə dövrünün müxtəlif mərhələlərində hüceyrələri (populyasiyadan) çeşidləməyə qadirdir.

2. Flüoresanla aktivləşdirilmiş hüceyrə çeşidləyicisi (FACS):

Bu alətdə hüceyrələrdən gələn emissiya siqnalları ölçülür və hüceyrələr toplama borularına bölünür.

Fiziki üsullar arasında müqayisə:

Çox sayda hüceyrənin ayrılması üçün mərkəzdənqaçma elütriatoruna üstünlük verilir. Digər tərəfdən, flüoresanla aktivləşdirilmiş hüceyrə çeşidlənməsi əsasən kiçik miqdarda hüceyrələrdən yüksək dərəcəli saf hüceyrələrin fraksiyalarını əldə etmək üçün istifadə olunur.

Kimyəvi blokada ilə hüceyrənin ayrılması:

Hüceyrələr metabolik reaksiyaların qarşısını almaqla ayrıla bilər. Metabolik blokadaların iki növü istifadə olunur - DNT sintezinin maneə törədilməsi və qida çatışmazlığı.

DNT sintezinin qarşısının alınması:

Hüceyrə dövrünün S fazasında DNT sintezi timidin, aminopterin, hidroksiurea və sitozin arabinosid kimi inhibitorlardan istifadə etməklə inhibə edilə bilər. Bu inhibitorların təsirləri dəyişkəndir. Hüceyrə dövrü əsasən S fazasında bloklanır ki, bu da canlı hüceyrələrlə nəticələnir.

Qida çatışmazlığı:

Təxminən 24 saat ərzində mədəniyyət mühitindən serum və ya izolösinin xaric edilməsi G-də hüceyrələrin yığılması ilə nəticələnir.1 faza. Qidalanma çatışmazlığının bu təsiri onların əlavə edilməsi ilə bərpa edilə bilər ki, bu zaman hüceyrə sinxronizasiyası baş verir.

Hüceyrə Sinxronizasiyasının bəzi məqamları:

a. Fiziki üsullarla hüceyrənin ayrılması kimyəvi prosedurlardan daha effektivdir.

b. Kimyəvi blokada çox vaxt hüceyrələr üçün zəhərlidir.

c. Transformasiya edilmiş hüceyrələr qida çatışmazlığı ilə sinxronlaşdırıla bilməz.

d. Birinci dövrədə yüksək səviyyəli hüceyrə sinxronizasiyası (>80%) əldə edilə bilər, ikinci dövrədə isə <60% olacaqdır. Üçüncü dövrədə hüceyrə paylanması təsadüfi baş verə bilər.

Hüceyrə qocalması və apoptoz:

Hüceyrələr mədəniyyətdə böyüdükcə, qocalma səbəbindən qocalırlar və daha çox çoxalda bilmirlər. Hüceyrələrin proliferativ ömrünün sona çatması qocalma adlanır.

Hüceyrə qocalması:

Hüceyrələrin böyüməsi adətən populyasiyanın ikiqat artması (PD) kimi ölçülür. PD-lər kulturasiya dövründə hüceyrə populyasiyasının iki dəfə artmasına aiddir və aşağıdakı düsturla hesablanır.

Giriş10 (Yığılan hüceyrələrin sayı) – log10 (Toxumlanmış hüceyrələrin sayı)/ log10 2

Qocalıq fenomeni daha çox insan fibroblast mədəniyyətləri ilə öyrənilmişdir. 30-60 populyasiya ikiqat artdıqdan sonra mədəniyyət əsasən qocalmış fibroblastlardan ibarətdir. Bu qocalmış fibroblastlar mitotik stimullara cavab olaraq bölünə bilmirlər. Qeyd etmək lazımdır ki, hüceyrələr birdən-birə əmələ gəlmir, kulturun ömrü boyu tədricən toplanır və sayı artır.

Kulturalarda hüceyrə artımının ölçülməsi üçün istifadə olunan müxtəlif parametrlər aşağıda verilmişdir:

a. Hüceyrə sayının birbaşa ölçülməsi.

b. DNT/RNT tərkibinin təyini.

c. Protein/ATP konsentrasiyasının qiymətləndirilməsi.

Yaşlanmanın ölçülməsi:

Yaşlı hüceyrələrin birbaşa ölçülməsi olduqca çətindir.

Dolayı tədbirlərdən bəziləri bunlardır:

a. Metabolik fəaliyyətin itirilməsi

b. Etiketli prekursorun (3 H-timidin) DNT-yə daxil olmaması.

c. Müəyyən histokimyəvi üsullar.

Yaşlanma ilə əlaqəli β-qalaktosidaza aktivliyinin təhlili

Yaşlanma zamanı lizosomal ferment β-qalaktosidazanın həddindən artıq ekspressiyası baş verir. Bu fermentin yüksəlməsi hüceyrənin daimi bölünməyən vəziyyətə daxil olması ilə də hüceyrə ölçüsünün artması ilə əlaqələndirilir. Mədəniyyətdə qocalmış hüceyrələrin sayı qocalma ilə əlaqəli β-qalaktosidaza (SA-β) analizi ilə ölçülə bilər.

Təhlil aşağıdakı mərhələlərdən ibarətdir:

1. Hüceyrələri yuyun və fiksator (məsələn, para formaldehid) istifadə edərək düzəldin və yenidən yuyun.

2. Sabit hüceyrələrə boyama məhlulunu (buferdə həll edilmiş dimetilformamiddə X-gal tozu) əlavə edin və inkubasiya edin.

3. Qocalmış hüceyrələr sayıla bilən sıx mavi rəng nümayiş etdirir.

Apoptoz:

Proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü (PCD) prosesi apoptoz adlanır. Hüceyrə ölümü müəyyən bir stimul və ya xarici mühitdən alınan bir neçə siqnal nəticəsində başlaya bilər. Apoptoz özünəməxsus hüceyrə mexanizmləri nəticəsində baş verir ki, bu da nəhayət özünü məhv etməyə gətirib çıxarır. Hüceyrə qonşu toxumalara minimal təsir göstərərək hüceyrə komponentlərinin nizamlı şəkildə deqradasiyasına səbəb olan bir sıra molekulyar hadisələri aktivləşdirir.

In situ apoptozun səbəbləri:

1. Düzgün inkişaf üçün:

Dölün barmaqlarının və ayaq barmaqlarının formalaşması onların arasında olan toxumaların çıxarılmasını tələb edir. Bu, adətən apoptoz yolu ilə həyata keçirilir.

2. Orqanizmin bütövlüyünə təhlükə yaradan hüceyrələrin məhv edilməsi:

Orqanizmlərə zərər verə biləcək hüceyrələri məhv etmək və çıxarmaq üçün proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü lazımdır.

Bəzi nümunələr sadalanır:

a. Embrion inkişafı zamanı zədələnmiş DNT-yə malik hüceyrələr. Əgər onlar məhv edilməsələr, anadangəlmə qüsurlarla nəticələnə bilərlər.

b. İmmunitet sisteminin hüceyrələri müvafiq immun funksiyasından sonra apoptoza məruz qalırlar. Bu, otoimmün xəstəliklərin qarşısını almaq üçün lazımdır, məsələn. romatoid artrit.

c. Viruslarla yoluxmuş hüceyrələr apoptozla məhv edilir.

3. Mənfi siqnallara görə hüceyrə məhvi:

Hüceyrələrdə apoptozu təşviq edən bir neçə mənfi siqnal var. Bunlara sərbəst radikalların yığılması, ultrabənövşəyi şüalara, rentgen şüalarına və kemoterapevtik dərmanlara məruz qalma daxildir.

Apoptozun mexanizmi:

Proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü üç fərqli mexanizmə görə baş verə bilər:

1. Daxili siqnallara görə apoptoz.

2. Xarici siqnallarla tetiklenen apoptoz, məsələn. şiş nekrozu faktoru-α (TNF-α), limfotoksin.

3. Reaktiv oksigen növləri ilə tetiklenen apoptoz.

Apoptozda kaspazların rolu:

Bir qrup ferment, yəni aktivləşdirilmiş proteazlar proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümündə mühüm rol oynayır. Bu proteazlar əslində sisteinil aspartat spesifik proteinazlardır və ya qısacası, ümumiyyətlə kaspazlar adlanır. Fərqli substratlarda hərəkət edən, nəticədə hüceyrə ölümünə səbəb olan təxminən on müxtəlif növ kaspaz var. Məsələn, kapsaz I interleykin 1β-ni parçalayır.

Kaspaz fəaliyyətinin qarşısının alınması:

Kaspazlar apoptozda yaxından iştirak etdikləri üçün onların fəaliyyətini maneə törətməklə hüceyrə ölümünün qarşısını almaq mümkündür. Kaspazları və beləliklə, apoptozu inhibə edə bilən müəyyən spesifik peptidlər müəyyən edilmişdir.

Apoptozun ölçülməsi:

Ölü və ya ölməkdə olan hüceyrələri aşkar etməyin sadə və asan yolu birbaşa mikroskopik müşahidədir. Ölən hüceyrələr faza kontrastlı mikroskop altında müəyyən edilə bilən sıx cisimlərlə yuvarlaqlaşdırılır. Apoptozdan keçmiş hüceyrələr adi boyanma üsulları ilə aşkar edilə bilən parçalanmış xromatin ehtiva edir. Son illərdə apoptozu ölçmək üçün daha həssas və etibarlı üsullar hazırlanmışdır.

Onlardan bəziləri qısaca təsvir edilmişdir:

ADP/ATP nisbətinin təyini:

Hüceyrələrin həm böyüməsi, həm də apoptozu ATP tələb edir. Ancaq böyümənin dayanması olduqda, ADP-nin yüksəlməsi baş verir. Beləliklə, ADP/ATP nisbətinin ölçülməsi ölü hüceyrələrə işıq salacaq. Əslində, ADP/ATP nisbətlərinin ölçülməsi üçün bəzi analiz sistemləri ticari olaraq mövcuddur.

Apoptoz üçün əhəmiyyətli biokimyəvi hadisə endogen nukleaz aktivliyinin aktivləşməsidir. Bu ferment DNT-ni sərbəst 3-hidroksil qrupları olan fraqmentlərə ayırır. Yeni əmələ gələn kiçik DNT fraqmentləri DNT polimeraza fermentindən istifadə etməklə genişləndirilə bilər.Əgər etiketli nukleotidlər DNT fraqmentinin uzadılması üçün istifadə edilərsə, onları aşkar etmək olar.

TUNEL TdT-vasitəçili dUTP nick end-labeling testinin qısaldılmasıdır. TUNEL endogen nukleaz aktivliyi ilə əmələ gələn DNT fraqmentlərinin təyini üçün çox sürətli və effektivdir. Apoptotik nüvələr flüoresan izotiyosiyanat (FITC) və 4,6-diaminofenilindoldan istifadə edərək flüoresan texnika ilə müəyyən edilə bilər.

Apoptoz zamanı genomik DNT mono və oliqonukleosomal DNT fraqmentlərinə parçalanır. Bu fraqmentləri agaroz elektroforezi ilə ayırmaq və aşkar etmək olar. Apoptotik hüceyrələrin nukleosom fraqmentləri elektroforezdə xarakterik nərdivan nümunəsi verir.

Testin məhdudiyyətləri:

DNT nərdivan testi çox spesifik deyil, çünki apoptoza məruz qalmış bir neçə hüceyrə DNT nərdivanını göstərməyə bilər. Bundan əlavə, apoptoza məruz qalmayan bəzi hüceyrələr də DNT nərdivanlarını göstərə bilər, bu səbəblərə görə DNT nərdivan testi apoptozun ölçülməsi üçün bəzi digər testlərlə birləşdirilir.


Mədəniyyətdə Xərçəng Hüceyrələri

Normal hüceyrələr məhdud sayda hüceyrə bölünməsindən keçir (70, cavan heyvanlardan yığılan hüceyrələr üçün həddir) qüvvəsi azalıb ölməzdən əvvəl. Buna deyilir replikativ qocalma. Bunun səbəbi telomerazanı sintez edə bilməmələri ola bilər.

Xərçəng hüceyrələr ölməz ola bilər, yəni mədəniyyətdə qeyri-müəyyən müddətə çoxalır.

Misal: HeLa hüceyrələri bütün dünyada laboratoriyalarda becərilir. Onların hamısı 1951-ci ildə xəstəliyindən vəfat edən He nrietta Laksın xərçəngindən (uşaqlıq boynunun) çıxarılan hüceyrələrindən törəmişdir. (2013-cü ildə HeLa hüceyrələrinin DNT ardıcıllığı insan papilloma virusunun 18 (HPV-18) ilə inteqrasiya etdiyini ortaya qoydu. güclü onkogenin yuxarı axını MYC. [Daha çox])

Mədəniyyətdəki xərçəng hüceyrələri telomeraz istehsal edir.

Normal hüceyrələr: toxuma mədəniyyəti qabına qoyulduqda, qabın səthi bir-birinə toxunan bir hüceyrə təbəqəsi ilə örtülənə qədər çoxalırlar. Sonra mitoz dayandırılır. Bu fenomen deyilir əlaqə inhibəsi.

Xərçəng hüceyrələr təmasda inhibə göstərmir. Yeməyin səthi örtüldükdən sonra hüceyrələr təpələrə yığılaraq bölünməyə davam edir.

Fotoşəkillərdə (G. Steven Martin-in izni ilə) siçan göstərilir fibroblastlar kulturada böyüyən (birləşdirici toxuma hüceyrələri). Üst fotodakı hüceyrələr təmas inhibəsini göstərir. Aşağıdakılar etmir. Aşağıdakı hüceyrələrin olduğu deyilir çevrilmişdir. Bu hüceyrələr (3T3 hüceyrələri adlanır) siçan xərçəngindən deyil, normal hüceyrələrin laboratoriya müalicəsi ilə istehsal edilmişdir. Radiasiya, müəyyən kimyəvi maddələr və müəyyən viruslar hüceyrələri dəyişdirmək qabiliyyətinə malikdir. Transformasiya edilmiş hüceyrələr xərçəngdən törəməsələr də, uyğun sınaq heyvanına (çılpaq siçan kimi) yeridildikdə çox vaxt bədxassəli şişlərə çevrilə bilərlər.

Normal hüceyrələr öz toxuma mədəniyyət mühitində onlara verilməli olan qida maddələri ilə bağlı hədsiz dərəcədə narahatdırlar.

Xərçəng hüceyrələr (və çevrilmiş hüceyrələr) adətən daha sadə mədəniyyət mühitində böyüyə bilər.

Normal hüceyrələr adətən növün normal xromosom dəstinə, yəni normal karyotipə malikdirlər.


Prokaryotik və eukaryotik hüceyrələr arasındakı fərqlər nələrdir?

Prokaryotik və eukaryotik hüceyrələr arasındakı fərqləri öyrənin.

Prokaryotik hüceyrələr və eukaryotik hüceyrələr Yer kürəsində mövcud olan iki növ hüceyrədir. İkisi arasında bir neçə fərq var, lakin aralarındakı ən böyük fərq, eukaryotik hüceyrələrin hüceyrənin genetik materialını ehtiva edən fərqli bir nüvəyə sahib olmasıdır, prokaryotik hüceyrələrin isə nüvəsi yoxdur və bunun əvəzinə sərbəst üzən genetik material var.

Prokaryotik və eukaryotik hüceyrələr nədir?

Bütün canlıları üç əsas sahəyə bölmək olar: Bakteriyalar, Arxeya və Eukaria. Bakteriyalar və Arxeya sahələrində tapılan ilk növbədə təkhüceyrəli orqanizmlər prokaryotlar kimi tanınır. Bu orqanizmlər prokaryotik hüceyrələrdən və ən kiçik, ən sadə və ən qədim hüceyrələrdən ibarətdir.

Eukarya domenindəki orqanizmlər daha mürəkkəb eukaryotik hüceyrələrdən ibarətdir. Eukariotlar adlanan bu orqanizmlər birhüceyrəli və ya çoxhüceyrəli ola bilər və onlara heyvanlar, bitkilər, göbələklər və protistlər daxildir. Bir çox insanlar mayaların və ya göbələklərin prokaryotlar və ya eukaryotlar olub-olmaması ilə bağlı aydın deyillər. Hər ikisi eukaryotlardır və bütün digər eukariotlarla oxşar hüceyrə quruluşunu paylaşırlar.

Milli Sağlamlıq İnstitutlarına (NIH) görə, eukaryotlar ən azı 2,7 milyard il əvvəl, 1-1,5 milyard illik prokaryotik təkamüldən sonra inkişaf etmişdir. Alimlər fərz edirlər ki, nüvə və digər eukaryotik xüsusiyyətlərin ilk olaraq bir prokaryotik orqanizm digərini udduqdan sonra əmələ gəlmiş ola bilər, Texas Universitetinə görə. Bu nəzəriyyəyə görə, udulmuş orqanizm o zaman ev sahibinin fəaliyyətinə töhfə vermiş olardı.

Prokaryotlar və eukariotlar arasında ortaq nə var?

Prokaryotik və eukaryotik hüceyrələr bir çox fərqlərə malik olsalar da, onlar aşağıdakılar da daxil olmaqla bəzi ümumi xüsusiyyətlərə malikdirlər:

    : Canlıların bütün xüsusiyyətlərini təyin edən genetik kodlaşdırma.
  • Hüceyrə (və ya plazma) membranı: Hüceyrəni ətraf mühitdən ayıran və daxil olan və çıxan materiallar üçün seçici maneə rolunu oynayan xarici təbəqə.
  • Sitoplazma: Hüceyrə daxilində əsasən su, duz və zülallardan ibarət jele kimi maye.
  • Ribosomlar: Zülalları əmələ gətirən orqanoidlər.

Prokaryotlar və eukariotlar necə fərqlənir?

Nüvə/DNT: Təbiət Təhsilinə görə, eukaryotik hüceyrələr iki lipid membrandan ibarət nüvə zərfi ilə əhatə olunmuş bir nüvəyə malikdir. Nüvə eukaryotik hüceyrənin DNT-sini saxlayır. Vaşinqton Universitetinə görə, prokaryotik hüceyrələrin nüvəsi yoxdur, onların sərbəst üzən DNT-ni saxlayan membransız nukleoid bölgəsi (hüceyrənin açıq hissəsi) var.

Hüceyrədəki bütün DNT xromosomlar kimi tanınan fərdi parçalarda tapıla bilər. Eukaryotik hüceyrələrdə hüceyrə bölünməsi zamanı mayoz və mitoz keçirən bir çox xromosom var, əksər prokaryotik hüceyrələr isə yalnız bir dairəvi xromosomdan ibarətdir. Bununla belə, son tədqiqatlar göstərdi ki, bəzi prokaryotlarda dörd xətti və ya dairəvi xromosom var, Nature Education. Misal üçün, Vibrio vəba, xoleraya səbəb olan bakteriya iki dairəvi xromosoma malikdir.

Eukaryotik hüceyrələrdə orqanoidlər: Eukaryotik hüceyrələrdə prokaryotik hüceyrələrdə olmayan bir neçə digər membrana bağlı orqanellər var. Bunlara mitoxondriya (qida enerjisini biokimyəvi reaksiyaları gücləndirmək üçün adenozin trifosfata və ya ATP-yə çevirmək), kobud və hamar endoplazmatik retikulum (sintez edilmiş zülalları daşıyan membranla bağlanmış boruların bir-birinə bağlı şəbəkəsi), qolgi kompleksi (zülalları ifraz etmək üçün çeşidləyir və qablaşdırır) və daxildir. bitki hüceyrələri vəziyyətində, xloroplastlar (fotosintez aparır). Bu orqanoidlərin hamısı eukaryotik hüceyrənin sitoplazmasında yerləşir.

Jurnalda dərc edilən 2020-ci il hesabatına görə, yalnız eurkaryotlar membrana bağlı orqanoidləri daşısalar da, son sübutlar göstərir ki, həm eukariotlar, həm də prokaryotlar membranı olmayan orqanoid strukturlar yarada bilirlər. Milli Elmlər Akademiyasının Materialları (PNAS).

Məsələn, bakteriyada Escherichia coli, PNAS araşdırmasına görə, molekullar və zülallar sitoplazmada maye "bölmələr" yaratmaq üçün birləşir. Bu bölmələr neftin su ilə qarışdıqda damcı əmələ gəlməsinə bənzər şəkildə əmələ gəlir Miçiqan Universiteti. Bu cür membransız strukturlar bir çox bakteriya növlərində, o cümlədən Mycobacterium tuberculosisvərəmə səbəb olan siyanobakteriyalar, fotosintetik bakteriya növü də xəstəliyə səbəb ola bilər.

Ribosomlar: Eukaryotik hüceyrələrdə ribosomlar daha böyük, daha mürəkkəb və membranla bağlanmışdır. Onlar müxtəlif yerlərdə tapıla bilər: Bəzən endoplazmatik retikulumda sitoplazmada və ya nüvə membranına yapışır (nüvə üzərində örtülü).

Prokaryotik hüceyrələrdə ribosomlar səpələnmiş və sitoplazma boyunca sərbəst şəkildə üzməkdədir. Prokaryotik hüceyrələrdəki ribosomlar da daha kiçik subunitlərə malikdir. Bütün ribosomlar (həm eukaryotik, həm də prokaryotik hüceyrələrdə) biri daha böyük, biri daha kiçik olan iki alt bölmədən ibarətdir. Eukariotlarda bu parçalar elm adamları tərəfindən 60-S və 40-S alt vahidləri kimi müəyyən edilir. Prokariotlarda ribosomlar 50-S və 30-S adlanan bir qədər kiçik subunitlərdən ibarətdir.

Britaniya Hüceyrə Biologiyası Cəmiyyətinin məlumatına görə, subunitlərin növlərindəki fərq alimlərə müəyyən növ yoluxucu bakteriyalara hücum edən streptomisin kimi antibiotik preparatları hazırlamağa imkan verib. İşin mənfi tərəfi, bəzi bakterial toksinlər və poliomielit virusu, eukaryotik hüceyrələrin tərcümə mexanizmini və ya xəbərçi RNT-nin zülallara çevrilməsi prosesini müəyyən etmək və onlara hücum etmək üçün öz üstünlükləri üçün ribosom fərqlərindən istifadə edir.

Reproduksiya: Əksər eukariotlar cinsi yolla çoxalırlar (baxmayaraq ki, bəzi protistlər və təkhüceyrəli göbələklər mitoz yolu ilə çoxala bilərlər, bu da funksional olaraq aseksual çoxalmaya bənzəyir). Prokaryotlar cinsi yolla çoxalırlar, nəticədə nəsillər valideynin tam klonu olur. Bəzi prokaryotik hüceyrələrdə, Biologiya Anlayışlarına görə, konjugasiya adlanan cinsi proses zamanı genetik material mübadiləsi üçün istifadə edilən yapışqan tük kimi çıxıntılar olan pili var. Konjugasiya bakteriyalarda, protozoalarda və bəzi yosunlarda və göbələklərdə baş verə bilər.

Hüceyrə divarları: Əksər prokaryotik hüceyrələr plazma membranını əhatə edən və orqanizmə forma verən sərt hüceyrə divarına malikdir. Eukariotlarda onurğalıların hüceyrə divarı yoxdur, lakin bitkilər var. Prokariotların hüceyrə divarları kimyəvi cəhətdən ilk növbədə sellülozadan ibarət olan bitki hüceyrələrinin eukaryotik hüceyrə divarlarından fərqlənir. Vaşinqton Universitetinə görə, məsələn, bakteriyalarda hüceyrə divarları peptidoqlikanlardan (şəkər və amin turşularından) ibarətdir.

Əlavə resurslar:

  • Amoeba Sisters tərəfindən prokaryotik və eukaryotik hüceyrələr arasındakı fərqi izah edən bu animasiya videosuna baxın.
  • Prokaryotların eukariotlara necə təkamül etdiyini öyrənin.
  • Prokaryotik və eukaryotik hüceyrələrin mikroskopik şəkillərini müqayisə edin.

Bu məqalə 18 iyun 2021-ci ildə Live Science işçilərinin yazıçısı Nicoletta Lanese tərəfindən yeniləndi.


Molekulyar klonlaşdırma, ev sahibi orqanizmlərdə rekombinant DNT molekullarını birləşdirmək və çoxaltmaq üçün istifadə edilən eksperimental molekulyar biologiya üsulları qrupudur. Klonlama sözünün istifadəsi metodun eyni DNT molekullarına malik hüceyrə populyasiyasını yaratmaq üçün tək bir molekulun təkrarlanmasını nəzərdə tutduğuna istinad edir. Ümumiyyətlə, molekulyar klonlama iki ayrı orqanizmin DNT ardıcıllığından istifadə edir: klonlanacaq DNT-nin mənbəyi olan növlər və növlər gələcəkdə rekombinant DNT-nin çoxalması üçün canlı ev sahibi kimi çıxış edəcəklər. Molekulyar klonlama yanaşmaları müasir biologiya və tibbdə müxtəlif aktual sahələr üçün mərkəzi yer tutur.

Hüquqi nöqteyi-nəzərdən, embrion kök hüceyrələrinin istehsalı üçün klonlaşdırılmış insan embrionlarının istehsalı embrionların qorunması və insan klonlaşdırma üsullarından istifadə ilə əlaqədardır. Bu, patent hüququ baxımından da suallar doğurur. Bununla belə, milli qaydalar bu işdə yeganə müvafiq müddəalar deyil. Bioelm sahəsində tədqiqatların və təcrübələrin getdikcə beynəlmiləlləşməsi ilə əlaqədar olaraq, beynəlxalq qaydaların və bəyannamələrin də nəzərə alınması vacibdir. Bu qaydalar hal-hazırda nadir hallarda hüquqi qüvvəyə malik olsa da, çox vaxt milli səviyyədə qanunvericiliyin inkişafı üçün struktur təmin edir.

Hal-hazırda nə Birləşmiş Millətlər Təşkilatı (UNO / UNESCO) səviyyəsində, nə də ümumAvropa səviyyəsində (Avropa Şurası / Avropa İttifaqı) insan klonlama üsullarının istifadəsini tənzimləyən aydın, qanuni qaydalar yoxdur. Bununla belə, hər iki səviyyədə müvafiq tənzimləmə cəhdləri, eləcə də hüquqi cəhətdən məcburi olmasa da, tövsiyə statusuna malik rəylər/bəyanatlar mövcuddur. 11 noyabr 1997-ci ildə YUNESKO tərəfindən qəbul edilmiş İnsan Genomu və İnsan Hüquqları üzrə Ümumdünya Bəyannaməsinin 11-ci maddəsində qeyd edilir ki, “insanların cinsi klonlaşdırılması kimi insan bütövlüyünə zərər vuran praktikalara yol verilməməlidir.’ Beləliklə, hüquqi status. tədqiqat məqsədləri üçün klonlama açıq olaraq qalır.

8 mart 2005-ci ildə Birləşmiş Millətlər Təşkilatının Baş Assambleyası 6-cı Komitənin (Hüquq) 24 fevral 2005-ci il tarixli tövsiyəsi əsasında İnsanın Klonlaşdırılmasına dair Bəyannaməni qəbul etdi. Bu Bəyannamədə bütün BMT Üzv Dövlətlərinə müraciəti ehtiva edir. tibbi səbəblərdən belə insan klonlamasının bütün növləri.

Bəyannamədə bildirilir ki, insan klonlaşdırılmasının bütün formaları insan ləyaqəti və insan həyatının qorunması ilə bir araya sığmır. Səsvermə bəyannamənin tərəfdarları və əleyhdarları arasında dərin bölünməni əks etdirir. Tərəfdarlar bunu fərdi bütövlüyün müdafiəsində və vətəndaş hüquqlarının inkişafında əlamətdar hesab edirlər. Müxaliflər reproduktiv klonlaşdırma qadağası ilə tibbi məqsədlər üçün klonlaşdırma qadağası arasındakı əlaqəni tənqid edərək, bunun qaçırılmış reproduktiv klonlaşdırmanın qadağan olunmuş aktına dair məcburi konvensiyanın qəbul edilməsi üçün vacib bir fürsət olduğunu ifadə etdilər. Hazırkı bəyannamə məcburi deyil və sadəcə təklif funksiyasına malikdir. Bəyannamənin əleyhinə səs verən hökumətlərin, o cümlədən Çin, Belçika və Böyük Britaniyanın nümayəndələri bunu “terapevtik klonlaşdırma” mövzusundakı mövqelərinə az təsir göstərməli olan qətnamə kimi tanınıblar.’.

Birləşmiş Krallıqda 1990-cı ildə qəbul edilmiş İnsan Gübrələmə və Embriologiya Aktı, başqa bir insan embrionundan və ya yetkin hüceyrədən alınan embriondan olan nüvə ilə embrion hüceyrənin nüvəsinin dəyişdirilməsini açıq şəkildə qadağan edir.

Bölmə 3(3)(d) müəyyən edir ki, 1990-cı il Qanununa əsasən verilmiş lisenziya embrion hüceyrəsinin nüvəsini başqa bir fərdin, embrionun hüceyrəsindən götürülmüş nüvə ilə əvəz etməyə və ya sonradan embrionun yaradılmasına icazə verə bilməz. Digər tərəfdən, bu, 1990-cı il Qanunu ilə açıq şəkildə qadağan edilməyib və ’embrion parçalanması’, əkizləşmənin kortəbii şəkildə baş verdiyi və eyni klonlanmış embrionların yaradılması üçün in vitro da həyata keçirilə bilən mexanizm deyil.

Avropa Şurasının İnsan Hüquqlarının və İnsanların Ləyaqətinin Müdafiəsi Konvensiyasına Genetika və Təbabətin həyata keçirilməsinə dair, İnsanların Klonlaşdırılmasının Qadağan edilməsinə dair Əlavə Protokolunda xüsusi olaraq qeyd olunur ki, insanın klonlaşdırılmasına yönəlmiş istənilən hərəkət genetik cəhətdən başqa bir insana oxşayan, diri və ya ölü olması qadağandır. Klonlaşdırma bütün dünyada qadağandır və in vitro laboratoriya şəraitində yalnız heyvanlar üçün icazə verilir və insanlar üçün hələ təsdiqlənməyib.


Klonlaşdırma haqqında düşünmək: Biotexnologiya dövründə etika

Milli Evangelistlər Assosiasiyası (NAE) üçün İdarə Heyətimizin sədri Dr. Jeff Hardin tərəfindən yazılmış məqaləni paylaşırıq. NAE ictimai meydanda Evangelistlərin dəyərlərini və maraqlarını təmsil edir və nazirlik rəhbərləri, pastorlar, kilsələr və məzhəblər üçün resurslar hazırlayır. NAE müxtəlif elm mövzularında əla resurslar dərc etmişdir. Tövsiyə etməyi çox sevdiyimiz iki şey: Allah və Elm görüşdükdə və bunların ən kiçikini sevəndə: Dəyişən İqlimə Müraciət.

Bu məqalədə Jeff biotexnologiyanın iki yüksək risk sahəsini, klonlaşdırma və gen redaktəsini və xristianların onlar haqqında düşünməyə necə başlaya biləcəyini təsvir edir. Daha dərinə getmək və gözlərinizin önündə inkişaf edən embrionların bəzi zəhmli videolarını görmək istəyirsinizsə, Jeffin Embrionlar və Etika mövzusunda BioLogos konfrans çıxışına baxmağınızdan əmin olun.

21-ci əsrdə elmi fantastika sürətlə elmi həqiqətə çevrilir. Xristianlar necə cavab verməlidirlər? Evangelistlərin Milli Assosiasiyası xristianlara əsas bibliya inanclarına əsaslanan bütün mərhələlərdə insan həyatına ardıcıl yanaşma inkişaf etdirməyə kömək etməkdə ön sıralarda olmuşdur.

Biri odur ki, bütün insanlar Allahın surətini daşıyırlar (Yaradılış 1:27), buna görə də biz insan təbiətinin bu vacib cəhətini dəyişdirməyə və ya aradan qaldırmağa çalışan texnologiyalardan imtina etməliyik. İkincisi odur ki, uşaqlar məhsullar deyil, doğulmuş hədiyyələrdir (Məzmur 127:3-5), Allahın əvvəldən onlarla birlikdə olduğu (Məzmur 139:13-14). Üçüncüsü odur ki, sağalmaq üçün təkan olsa da, biz texnoloji optimizmə müqavimət göstərməliyik, çünki insan biliyi məhduddur (Yaradılış 2:16-17) və biz günaha ümumən meylliyik (Romalılara 3:23). Gəlin bu bibliya yanaşmasının iki başlıq tutan texnologiya üçün nəticələrini nəzərdən keçirək.

Klonlama

Yunanca “budaq” sözündən olan “klon” əsas “kopya” fikrini daşıyır. Klonlama 1997-ci ildə Dolly adlı qoyunun köməyi ilə klonlanmış hadisə yerində partladı somatik hüceyrə nüvəsinin ötürülməsi. Bu texnika mayalanmamış yumurtadan nüvənin çıxarılmasını, bədəndəki hüceyrədən nüvənin əlavə edilməsini (“somatik” yunanca “bədən” sözündən gəlir) və inkişafın aktivləşdirilməsini nəzərdə tutur. Nadir hallarda (Dolly 277 cəhddə yeganə uğur idi!), bir heyvan bağışlanan nüvə ilə eyni genetik tikinti blokları ardıcıllığı ilə doğula bilər. Klonlaşdırma səmərəsizdir, çünki bağışlanan nüvədə DNT və zülallara kimyəvi dəyişiklikləri tam bərpa etmək çətindir.

Oreqon Sağlamlıq Elmləri Universitetində görülən işlər 2013-cü ildə insanlarda klonlaşdırmanın mümkün olduğunu göstərdi. Niyə klon? İki səbəb irəli sürülüb. In terapevtik klonlama, bir xəstə ilə genetik olaraq eyni olan bir embrion istehsal olunur, ardınca terapiyada istifadə üçün embrion kök hüceyrələrini toplamaq üçün həmin embrion məhv edilir.

Reproduktiv klonlamanın məqsədi körpədir. Texnologiya hər iki halda eynidir, yeganə fərq klonun son istifadəsidir.

Klonlaşdırılmış insanlar haqqında necə düşünməliyik? Dolly tamamilə qoyun kimi olduğu kimi, klonlar da tamamilə insan olacaq, buna görə də biz embrionları məhv etmək üçün alternativlər axtarmalıyıq. Bir yanaşma somatik hüceyrələri birbaşa olaraq adlandırılan kök hüceyrələrə çevirir induksiya edilmiş pluripotent kök hüceyrələr (iPS hüceyrələri). iPS hüceyrələri klonların genetik üstünlüklərinə malikdir, lakin embrionların məhv edilməsinin qarşısını alır.

Reproduktiv klonlama haqqında nə demək olar? Hətta səmərəsizliyin öhdəsindən gəlmək mümkün olsa belə, xristianlar bunu bir çox səbəblərə görə rədd etmişlər, o cümlədən əmtəələşmə. Tam yetkin klonlar toxuma təmin edə bilər və ya sevilən bir insan üçün genetik olaraq eyni "əvəzetmə" ni bərpa etməyə imkan verə bilər. İstənilən halda klonlaşdırılmış insan fərd artıq öz-özlüyündə bir məqsəd deyil, bir əmtəədir.

Genomun redaktəsi

İkinci yüksək dərəcədə yayılmış texnikadır genomun redaktəsi. Bu texnologiyanın CRISPR/Cas9 (CRISPR "daha xırda" kimi tələffüz olunur) adlanan bir versiyası redaktə üçün çox xüsusi bir DNT parçasını hədəf alır. Təfərrüatlar mürəkkəbdir, lakin əsas məqsəd deyil. Söz emal sənədində müəyyən hərflər dəstini vurğulamaq və sil düyməsini basmaq kimi DNT tikinti blokları silinə bilər. Daha da güclü şəkildə, DNT tikinti blokları söz prosessorunda "yapışdırmaq" əmrindən istifadə etməklə əvəz edilə bilər.

Bu texnologiya insanlarda necə istifadə edilə bilər? Bir qüsuru düzəltmək üçün xəstənin bədəninin hüceyrələrini redaktə edə bilərsiniz, bu yanaşma olaraq bilinir somatik hüceyrə terapiyası. Bu cür redaktələr gələcək nəslə ötürülməzdi. Daha çox mübahisəlidir germline terapiya: Döllənmiş yumurta redaktə edilərsə, düzəlişlər bütün hüceyrələr tərəfindən miras alınacaq və gələcək nəsillərə ötürüləcək. Bunu niyə düşünmək olar? Tay-Sachs xəstəliyi kimi az sayda xəstəlik, dağıdıcı, erkən ölümə səbəb olan tək bir gen mutasiyasından qaynaqlanır. Bir embriondakı zədələnmiş genin bərpası təkcə həmin embrionda deyil, həmin şəxsin uşaqlarında da xəstəliyin qarşısını alır.

Bu cür müalicələr nə qədər uzaqdır? Çox deyil. Oreqon Sağlamlıq Elmləri Universitetində eyni tədqiqatçılar CRISPR/Cas9-un insan embrionlarında işlədiyini göstərdilər. Onlar genişlənmiş ürəyin inkişafı ilə əlaqəli mutasiyanı bərpa etdilər. Onlar redaktə edilmiş embrionların sağ qalmasına icazə verməsələr də, onların işi insan embrionlarının redaktə edilməsinin mümkün olduğunu göstərdi.

Bir çox elm adamları mikrob xəttinin redaktəsinə moratorium və beynəlxalq müzakirəyə çağırdılar. Dindar xristian və ABŞ Milli Sağlamlıq İnstitutunun direktoru Frensis Kollinz üçün bu, parlaq bir xəttdir: “Klinik məqsədlər üçün embrionlarda insan cücərmə xəttinin dəyişdirilməsi konsepsiyası... demək olar ki, hamı tərəfindən keçilməməsi lazım olan bir xətt kimi qəbul edilmişdir. .”

Fransisin "demək olar ki," istifadə etməsi peyğəmbərlik idi. 2018-ci ilin sonlarında çinli alim He Jankui, HİV-ə qarşı müqavimətdə iştirak edən genin redaktəsi ilə iki qız körpənin doğulduğunu bildirdi. Beynəlxalq ictimaiyyət onun işini məsuliyyətsiz olaraq qınadı.

Xristianlar genomun redaktəsi haqqında necə düşünməlidirlər? Birincisi, indi ciddi düşünmək lazımdır. İkincisi, embrionlara xəstələrdən çox təcrübə kimi yanaşmaq həyat mədəniyyətinə uyğun gəlmir. Üçüncüsü, somatik terapiya vəd etsə də, xristianlar cücərmə texnologiyasından ağıllı şəkildə istifadə etmək qabiliyyətimizdən son dərəcə ehtiyatlı olmalıdırlar. Nəhayət, bəziləri ciddi xəstəlik üçün təmir edildikdə, eyni zamanda əlavə təkmilləşdirmələr etməyi təklif etdi. Xristianları şəfa və təkmilləşdirmə arasındakı xətti bulandıran bu impuls narahat etməlidir.

Biotibbi texnologiya inanılmaz sürətlə irəliləyir. Müqəddəs Kitaba əsaslanan, düşüncəli məsihçilər bu məsələlər haqqında yaxşı düşünməlidirlər. Bunu etmək bacarığımız gələcəyin formalaşmasında həlledici olacaqdır.

Bu məqalə ilk dəfə Milli Evangelistlər Assosiasiyasının jurnalı olan Evangelicals-da çıxdı.

Jeff Hardin

Diskursda söhbətə qoşulun

BioLogos-da “mərhəmətli dialoq” elm və imanın çətin məsələləri haqqında birgə dialoq apararkən Məsihin lütfünü nümayiş etdirmək deməkdir.

Allahın Kəlamı. Tanrının Dünyası. Gələnlər qutunuza çatdırılır.

BioLogos kilsəyə və dünyaya elm və bibliya imanı arasındakı harmoniyanı göstərir. Resurslar, yeniləmələr və daha çoxunu əldə edin.


Hüceyrə xəttinin tətbiqləri

A. Peyvəndlərin istehsalı

Hüceyrə mədəniyyətinin ən mühüm istifadələrindən biri peyvəndlərin tədqiqi və istehsalıdır. Hüceyrə mədəniyyətində böyük miqdarda virus yetişdirmək qabiliyyəti nəhayət poliomielit peyvəndinin yaradılmasına səbəb oldu və hüceyrələr bu gün də quduz, suçiçəyi, hepatit B və qızılca kimi bir çox digər xəstəliklər üçün vaksinlər istehsal etmək üçün geniş miqyasda istifadə olunur. Erkən dövrlərdə tədqiqatçılar poliovirusu yetişdirmək üçün canlı heyvanlardan istifadə etməli idilər, lakin hüceyrə mədəniyyəti texnikalarının inkişafı sayəsində onlar virus istehsalı üzərində daha böyük nəzarətə nail ola bildilər və nəticədə peyvəndlər və müxtəlif müalicələr hazırladılar. Bununla belə, davamlı hüceyrə xətləri insan peyvəndləri üçün virus istehsalında istifadə edilmir, çünki bunlar bədxassəli toxumadan alınır və ya bədxassəli xüsusiyyətlərə malikdir.

B. Virusların yetişdirilməsi və öyrənilməsi

Hüceyrə kulturası digər heyvanlarla müqayisədə rahat, qənaətcil, idarə olunması asan olduğu üçün virusların yayılması üçün geniş istifadə olunur. Sitopatik təsirləri müşahidə etmək və virusun böyüdüyü xüsusi hüceyrələri seçmək, həmçinin yoluxucu dövrü öyrənmək asandır. Hüceyrə xətləri virus araşdırması üçün əlverişlidir, çünki hüceyrə materialı davamlı olaraq mövcuddur. Davamlı hüceyrə xətləri əvvəllər böyüməsi çətin və ya qeyri-mümkün olan bir çox virusun yetişdirilməsində son dərəcə faydalı olmuşdur.

C. Hüceyrə və molekulyar biologiya

Hüceyrə mədəniyyəti hüceyrə və molekulyar biologiyada istifadə olunan əsas vasitələrdən biridir, hüceyrələrin normal fiziologiyasını və biokimyasını (məsələn, metabolik tədqiqatlar, yaşlanma), müxtəlif zəhərli birləşmələrin hüceyrələrə təsirini, mutagenez və kanserogenez. Bu tətbiqlərdən hər hansı biri üçün hüceyrə mədəniyyətindən istifadənin əsas üstünlüyü klonal hüceyrələr toplusundan istifadə etməklə əldə edilə bilən nəticələrin ardıcıllığı və təkrarlanabilirliyidir.

D. In Xərçəng Araşdırma

Normal hüceyrələr radiasiya, kimyəvi maddələr və viruslar kimi üsullarla xərçəng hüceyrələrinə çevrilə bilər. Bu hüceyrələr daha sonra xərçəngi daha yaxından öyrənmək və potensial yeni müalicələri sınaqdan keçirmək üçün istifadə edilə bilər.

E. Gen terapiyası

Funksional genə malik olan hüceyrələr funksional olmayan genlərə malik hüceyrələrlə əvəz edilə bilər və bunun üçün hüceyrə kulturası texnikasından istifadə olunur.

F. İmmunoloji tədqiqatlar

Hüceyrə mədəniyyəti üsulları müxtəlif immun hüceyrələrin, sitokinlərin, limfoid hüceyrələrin işini və xəstəliyə səbəb olan agentlərlə ev sahibi hüceyrələr arasında qarşılıqlı əlaqəni bilmək üçün istifadə olunur.

Hüceyrə xətləri in vitro gübrələmə (IVF) texnologiyasında, rekombinant zülalda, dərman seçimi və təkmilləşdirilməsində də istifadə olunur.


Klonlama necə işləyir

Təbiət milyardlarla ildir orqanizmləri klonlayır. Məsələn, çiyələk bitkisi a qaçışçı (dəyişdirilmiş gövdə forması), qaçışın kök saldığı yerdə yeni bitki yetişir. Həmin yeni bitki bir klondur. Oxşar klonlama otda, kartofda və soğanda baş verir.

İnsanlar minlərlə ildir ki, bu və ya digər şəkildə bitkiləri klonlayırlar. Məsələn, bir bitkidən kəsilən yarpaq götürüb onu yeni bitkiyə çevirəndə (vegetativ yayılma), siz orijinal bitkini klonlayırsınız, çünki yeni bitki donor bitki ilə eyni genetik quruluşa malikdir. Vegetativ çoxalma ona görə işləyir ki, kəsilmənin ucu xüsusi olmayan hüceyrələr toplusunu əmələ gətirir. kallus. Uğurla, kallus böyüyəcək, bölünəcək və müxtəlif ixtisaslaşmış hüceyrələr (köklər, gövdələr) meydana gətirəcək və nəticədə yeni bir bitki meydana gətirəcəkdir.

Bu yaxınlarda elm adamları xüsusi kök parçalarını götürərək, onları kök hüceyrələrinə parçalayaraq və kök hüceyrələrini qida ilə zəngin bir mədəniyyətdə böyütməklə bitkiləri klonlaya bildilər. Mədəniyyətdə ixtisaslaşmış hüceyrələr ixtisaslaşmamış olurlar (fərqləndirilmişdir) kalluslara. Zərbələr daha sonra kök parçalarının alındığı orijinal bitki ilə eyni olan yeni bitkilərə çevrilmək üçün müvafiq bitki hormonları ilə stimullaşdırıla bilər.

Bu prosedur adlanır toxuma mədəniyyətinin yayılması, bağbanlar tərəfindən qiymətli orkide və digər nadir çiçəklər yetişdirmək üçün geniş istifadə edilmişdir.


İnsan Reproduktiv Klonlaşdırılmasının Elmi və Tibbi Aspektləri (2002)

Bu fəsildə tapşırıq bəyanatımızda aşağıdakı suallara cavab veririk:

Heyvanların, o cümlədən insanların klonlaşdırılması nə deməkdir? Onun məqsədləri nədir? Kök hüceyrə tədqiqatından nə ilə fərqlənir?

Bu suallara cavabını təşkil etmək üçün panel aşağıdakı mətndə bölmə başlıqları kimi görünən bir sıra alt suallar hazırladı.

HEYVANLARIN O cümlədən İNSANLARIN REPRODUKTİV KLONLANMASI NƏ DEYİLDİR?

Reproduktiv klonlaşdırma genetik cəhətdən eyni fərdlərin qəsdən istehsalı kimi müəyyən edilir. Hər bir yeni yaradılan fərd orijinalın klonudur. Monozigotik (eyni) əkizlər təbii klonlardır. Klonlar nüvədə və bədənlərindəki hər hüceyrənin xromosomlarını və mdashoflarını ehtiva edən bölmədə eyni genetik material dəstlərini ehtiva edir. Beləliklə, iki klondan olan hüceyrələrin nüvələrində eyni DNT və eyni genlər var.

Bütün hüceyrələr, o cümlədən yumurtalar, həmçinin mitoxondriya adlanan enerji yaradan &ldquofactories&rdquo bəzi DNT-ləri ehtiva edir. Bu strukturlar sitoplazmada, hüceyrənin nüvədən kənarda yerləşən bölgəsindədir. Mitoxondriya öz DNT-lərini ehtiva edir və müstəqil şəkildə çoxalır. Həqiqi klonlar həm nüvələrdə, həm də mitoxondriyada eyni DNT-yə malikdir, baxmayaraq ki, termin klonlar də istifadə olunur

eyni nüvə DNT-yə malik, lakin fərqli mitoxondrial DNT-yə malik şəxslərə istinad etmək.

REPRODUKTİV KLONLAŞMA NECƏ EDİLİR?

Canlı məməlilərin klonlarını hazırlamaq üçün iki üsuldan istifadə olunur. Hər ikisi bir embrionun uterusda implantasiyasını və sonra normal bir hamiləlik və doğum müddətini tələb edir. Bununla belə, insan və ya heyvanların reproduktiv klonlaşdırılması implantasiya üçün uyğun olan genetik cəhətdən eyni embrionların əldə edilməsi üçün istifadə edilən üsulla müəyyən edilmir. Burada hələ işlənməmiş və ya təsvir edilməmiş üsullar, ən azı biri implantasiya və doğuş üçün nəzərdə tutulmuş embrion olan genetik cəhətdən eyni fərdlərlə nəticələnsə, klonlaşdırmanı təşkil edərdi.

Bu günə qədər reproduktiv klonlama üçün istifadə olunan iki üsul aşağıdakılardır:

&öküz Somatik hüceyrə nüvə transferindən (SCNT) istifadə edərək klonlama [1]. Bu prosedur xromosomların yumurtadan çıxarılması ilə başlanır, bu da enükle edilmiş bir yumurta yaratmaqdır. Xromosomlar klonlanacaq fərdin və ya embrionun somatik (bədən) hüceyrəsindən alınan nüvə ilə əvəz olunur. Bu hüceyrə birbaşa insandan, mədəniyyətdə yetişdirilən hüceyrələrdən və ya dondurulmuş toxumadan əldə edilə bilər. Sonra yumurta stimullaşdırılır və bəzi hallarda bölünməyə başlayır. Bu baş verərsə, bir sıra ardıcıl hüceyrə bölünməsi blastosist və ya preimplantasiya embrionunun meydana gəlməsinə səbəb olur. Blastosist daha sonra heyvanın uterusuna köçürülür. Blastosistin uterusa uğurlu implantasiyası onun sonrakı inkişafı ilə nəticələnə bilər və bəzən bir heyvanın doğulması ilə nəticələnə bilər. Bu heyvan nüvənin donoru olan fərdin klonu olacaq. Onun nüvə DNT-si yalnız bir genetik valideyndən miras qalmışdır.

Müəyyən bir fərdin klonlaşdırıla biləcəyi vaxtların sayı nəzəri olaraq yalnız somatik hüceyrə nüvələrini qəbul etmək üçün əldə edilə bilən yumurtaların sayı və inkişaf etməkdə olan embrionları qəbul etmək üçün mövcud olan dişilərin sayı ilə məhdudlaşır. Bu prosedurda istifadə edilən yumurta, köçürülmüş somatik nüvəni verən eyni fərddən alınırsa, nəticədə rüşeym alınacaq. hamısı onun genetik materialı&mdashnüvə və mitoxondrial&mdash tək bir fərddən. Yumurta nüvə donorunun anasından gəlirsə, bu da doğru olacaq, çünki mitoxondriyalar ana tərəfindən miras alınır. Eyni nüvələri bir donordan yumurtalara köçürməklə çoxlu klonlar da istehsal oluna bilər. Əgər somatik hüceyrə nüvəsi və yumurta müxtəlif fərdlərdən gəlirsə, onlar nüvə donoru ilə eyni olmayacaqlar, çünki klonlar bir qədər fərqli mitoxondrial genlərə malik olacaqlar [2 3]

&öküz Embrionun parçalanması ilə klonlama. Bu prosedur ilə başlayır in vitro gübrələmə (IVF): sperma ilə qadının bədənindən kənarda birləşmə

bir ziqot yaratmaq üçün yumurta. Ziqot (bundan sonra da embrion adlanır) iki, sonra isə dörd eyni hüceyrəyə bölünür. Bu mərhələdə hüceyrələr ayrıla bilər və ayrı-ayrı, lakin eyni blastokistlərə çevrilməsinə icazə verilə bilər, sonra uterusa implantasiya edilə bilər. Hüceyrələrin məhdud inkişaf potensialı o deməkdir ki, prosedur təkrarlana bilməz, buna görə də embrionun parçalanması yalnız iki eyni siçan və ehtimal ki, dörd eyni insandan çox ola bilməz.

Embrionun parçalanmasında DNT iki fərddən və yumurtanı meydana gətirən anadan və sperma əmələ gətirən atadan olan mikrob hüceyrələri tərəfindən təmin edilir. Beləliklə, təbii yolla və ya standart IVF ilə formalaşmış embrionlar kimi, iki valideyn var. Onların mitoxondrial DNT-si eynidir. Bu klonlaşdırma üsulu monoziqot əkizlərin və nadir hallarda hətta dördəmlərin təbii formalaşması ilə eyni olduğu üçün bu hesabatda ətraflı bəhs edilmir.

KLOONLAR TAM EYNİ GÖRÜNÜŞ VƏ DAVRANIŞ EDƏCƏK?

Klonlar bir-birləri ilə genetik olaraq eyni olsalar belə, fiziki və ya davranış xüsusiyyətləri baxımından eyni olmayacaqlar, çünki bu xüsusiyyətlərin yeganə müəyyənedicisi DNT deyil. Bir cüt klon uşaqlıqda olarkən fərqli mühitlər və qida maddələri ilə qarşılaşacaq və böyüdükcə valideynlərindən, cəmiyyətdən və həyat təcrübəsindən fərqli girişlərə məruz qalacaqları gözlənilir. Eyni nüvə donorlarından və eyni mitokondrial donorlardan əldə edilən klonlar, yetkin insanın somatik hüceyrə nüvəsinin donoru olduğu halda olduğu kimi, müxtəlif vaxtlarda doğularsa, ətraf mühit və qidalanma fərqlərinin monoziqot (eyni) ilə müqayisədə daha qabarıq olacağı gözlənilir. ) əkizlər. Və hətta monoziqot əkizlər də genetik və ya epigenetik cəhətdən tam eyni deyillər, çünki mutasiyalar, stokastik inkişaf dəyişikliyi və müxtəlif izləyici təsirlər (DNT-də valideynə xas kimyəvi işarələr) hər əkiz üçün fərqli töhfələr verir [3 4].

Eyni mitoxondriyaya malik olmayan klonlarda əlavə fərqlər baş verə bilər. Bu cür klonlar bir fərd nüvəyə, digəri isə yumurtaya töhfə verərsə və tək bir fərddən olan nüvələr çoxlu donorlardan yumurtalara köçürülərsə yaranır. Fərqlərin bədənin enerjiyə yüksək tələbat olan hissələrində və əzələ, ürək, göz və beyin kimi və hüceyrə nömrələrini təyin etmək üçün hüceyrə ölümü üzərində mitoxondrial nəzarətdən istifadə edən bədən sistemlərində özünü göstərməsi gözlənilə bilər [5 6].

Reproduktiv Klonlaşdırmanın MƏQSƏDLƏRİ NƏDİR?

Mal-qaranın klonlaşdırılması [1] səmərəli böyümə və yüksək süd istehsalı kimi mövcud əlamətlər birləşməsini təkrarlamaq üçün bir vasitədir.

cinsi çoxalmada baş verən genetik &ldqulottery&rdquo və qarışdırma olmadan. Bu, müəyyən bir genetik modifikasiyası olan bir heyvanın, məsələn, süddə əczaçılıq məhsulu istehsal etmək qabiliyyətinin, təbii cütləşmədən daha sürətli təkrarlanmasına imkan verir [7 8]. Üstəlik, bütöv bir heyvana nisbətən mədəni hüceyrələrdə genetik modifikasiya daha asanlıqla edilə bilər və dəyişdirilmiş hüceyrə nüvəsi lazımi tipdə bir klon yaratmaq üçün enükle edilmiş yumurtaya köçürülə bilər. Siçanlar kimi elmi təcrübələrdə istifadə edilən məməlilər fundamental bioloji mexanizmlər haqqında anlayışımızı artırmaq məqsədi daşıyan tədqiqatın bir hissəsi kimi klonlaşdırılır.

Prinsipcə, insanın reproduktiv klonlaşdırılması [9] yolu ilə uşaq dünyaya gətirmək istəyənlərə aşağıdakılar daxildir:

Onlardan biri və ya başqa bir nüvə donoru ilə genetik cəhətdən eyni olan uşaq sahibi olmaq istəyən sonsuz cütlər

Onlarla və ya başqa bir nüvə donoru ilə genetik cəhətdən eyni olan uşaq sahibi olmaq istəyən digər şəxslər

Uşağını itirmiş və genetik cəhətdən eyni olan başqa bir uşaq sahibi olmaq istəyən valideynlər

Özünün və ya uşağının xəstəliyini müalicə etmək üçün transplantaya (məsələn, kordon qanı) ehtiyacı olan və buna görə də klonlanmış döldən və ya yeni doğulmuşdan genetik olaraq eyni toxuma toplamaq istəyən insanlar.

İnsan reproduktiv klonlaşdırılmasının mümkün səbəbləri onların əsaslandırılması dərəcəsinə görə təhlil edilmişdir. Məsələn, 10-cu istinadda təklif olunur ki, gametik cəhətdən sonsuz valideynlə genetik əlaqə yaratmağa yönəlmiş insan reproduktiv klonlaşdırılması, cinsi cəhətdən məhsuldar bir şəxsin konkret genomu seçmək cəhdindən daha əsaslandırıla bilər.

Transplantasiya edilə bilən toxuma, klonlama nəticəsində yaranan bir uşağın doğulmasına ehtiyac olmadan əldə edilə bilər. Məsələn, embrionlar tərəfindən istehsal olunur in vitro gübrələmə (IVF) nəqli uyğunluğu üçün yazıla bilər və gələcəkdə nüvə transplantasiyası ilə çıxarılan kök hüceyrələr transplantasiya edilə bilən toxuma istehsalına imkan verə bilər.

Sonsuz fərdlər üçün açıq olan alternativlər 4-cü Fəsildə müzakirə olunur.

Reproduktiv klonlaşdırma kök hüceyrə tədqiqatından nə ilə fərqlənir?

Aşağıda qısa şəkildə ümumiləşdirilən və Milli Akademiyaların son hesabatında daha ətraflı müzakirə edilən kök hüceyrələr üzərində son və cari işlər. Kök Hüceyrələr və Regenerativ Təbabətin Gələcəyi [11] insanın reproduktiv klonlaşdırılması ilə birbaşa əlaqəli deyil. Bununla belə, a

Ümumi ilkin addım&mdashya nüvə transplantasiyası və ya somatik hüceyrə nüvə transferi (SCNT) adlanır&mdash Konqresi təkcə insanın reproduktiv klonlamasını deyil, həm də kök hüceyrə tədqiqatının müəyyən sahələrini qadağan edən qanun layihələrini nəzərdən keçirməyə vadar etdi. Kök hüceyrələr təkrar-təkrar bölünmə qabiliyyətinə malik olan və həm xüsusi hüceyrələr, həm də daha çox kök hüceyrələr meydana gətirən hüceyrələrdir. Bəziləri, məsələn, bəzi qan və beyin kök hüceyrələri birbaşa böyüklərdən [12-19], digərləri isə preimplantasiya embrionlarından əldə edilə bilər. Embrionlardan əldə edilən kök hüceyrələrə embrion kök hüceyrələr (ES hüceyrələri) deyilir. Milli Akademiyaların yuxarıda qeyd olunan hesabatında kök hüceyrə tədqiqatının hazırkı vəziyyəti haqqında ətraflı məlumat verilir [11].

ES hüceyrələrinə pluripotent kök hüceyrələr də deyilir, çünki onların nəslinə postimplantasiya embrionunda, döldə və tam inkişaf etmiş orqanizmdə tapıla bilən bütün hüceyrə növləri daxildir. Onlar erkən embrionların (blastosistlərin) daxili hüceyrə kütləsindən əmələ gəlir [20-23]. Müəyyən bir blastokistin daxili hüceyrə kütləsindəki hüceyrələr genetik olaraq eynidir və hər blastosist yalnız bir ES hüceyrə xətti verir. Kök hüceyrələr daha nadirdir [24] və böyüklərdə tapılması preimplantasiya embrionlarına nisbətən daha çətindir və təcrid olunduqdan sonra bəzi yetkin kök hüceyrələrin hüceyrə xətlərinə çevrilməsi daha çətin olmuşdur [25 26].

ES hüceyrələrindən və ya digər kök hüceyrələrdən müxtəlif hüceyrə və toxumaların istehsalı cari tədqiqatın mövzusudur [11 27-31]. Bu cür hüceyrələrdən sümük iliyindən başqa bütöv orqanların (sümük iliyi transplantasiyasında istifadə olunacaq) istehsalı hələ əldə olunmayıb və onun son uğuru qeyri-müəyyəndir.

Kök hüceyrələrə hazırkı maraq onların müxtəlif xəstəliklərdən və zəiflədən xəstəliklərdən əziyyət çəkən insanlara xüsusi sağlam hüceyrələrin, toxumaların və orqanların terapevtik transplantasiya potensialından irəli gəlir. Yetkin kök hüceyrələri ilə aparılan tədqiqatlar göstərir ki, onlar bu məqsədlər üçün, o cümlədən hüceyrələrin əldə edildiyi toxumalardan başqa toxumalar üçün faydalı ola bilər [12 14 17 18 25-27 32-43]. Mövcud biliklərə əsasən, böyüklərin bütün növ toxumalar üçün kifayət qədər kök hüceyrə mənbəyi olması ehtimalı azdır [11 44-47]. ES hüceyrə xətləri transplantasiya üçün potensial maraq doğurur, çünki bir hüceyrə xətti qeyri-müəyyən müddətə çoxala bilər və yalnız bir növ ixtisaslaşmış hüceyrəni deyil, transplantasiya üçün lazım ola biləcək bir çox müxtəlif növ xüsusi hüceyrələr (beyin, əzələ və s.) yarada bilər. 20 28 45 48 49]. Bununla belə, ya yetkin kök hüceyrələrinin, ya da ES hüceyrələrinin terapevtik potensialının böyüklüyü yaxşı başa düşülməzdən əvvəl daha çox araşdırma tələb olunacaq.

Kök hüceyrələrin terapevtik potensialı ilə bağlı ən vacib suallardan biri də onlardan əldə edilən hüceyrələrin, toxumaların və bəlkə də orqanların transplantasiyadan imtina riski minimal olmaqla transplantasiya edilə biləcəyidir. İdeal olaraq, transplantasiya üçün əlverişli olan yetkin kök hüceyrələri xəstələrin özlərindən əldə edilə bilər. Belə hüceyrələr və ya toxumalardan əldə edilir

onlar, genetik olaraq xəstənin öz xüsusiyyətləri ilə eyni olacaq və immunitet sistemi tərəfindən rədd edilməyəcəklər.Bununla belə, əvvəllər təsvir edildiyi kimi, kifayət qədər yetkin kök hüceyrələrin mövcudluğu və onların hüceyrə və toxuma növlərinin tam çeşidini meydana gətirmə potensialı qeyri-müəyyəndir. Üstəlik, genetik mənşəli bir pozğunluq vəziyyətində, xəstənin öz yetkin kök hüceyrələri eyni qüsuru daşıyacaq və terapevtik transplantasiya üçün istifadə edilməzdən əvvəl böyüdülməli və genetik olaraq dəyişdirilməlidir.

Somatik hüceyrə nüvə transferinin və ya nüvə transplantasiyasının tətbiqi transplantasiyadan imtina riski minimal olan transplantasiya terapiyaları üçün istifadə oluna bilən kök hüceyrələri əldə etmək üçün alternativ yol təklif edir. Bu prosedur və bəzən terapevtik klonlaşdırma, tədqiqat klonlaması və ya reproduktiv olmayan klonlaşdırma adlanır və burada belə adlandırılır. kök hüceyrələri istehsal etmək üçün nüvə transplantasiyası&mdash, transplant resipiyentinin hüceyrələri ilə genetik olaraq eyni olan pluripotent ES hüceyrələri yaratmaq üçün istifadə edilə bilər [50]. Beləliklə, yetkin kök hüceyrələr kimi, bu cür ES-hüceyrələr də bənzərsiz transplantasiyalarda görülən rəddi yaxşılaşdırmalıdır.

İki növ yetkin kök hüceyrə və qanda sümük iliyi və dərinin kök hüceyrələrini meydana gətirən kök hüceyrələr və hazırda istifadə edilən yalnız iki kök hüceyrə müalicəsini paylaşırlar. Lakin Milli Akademiyaların rsquo adlı hesabatında qeyd edildiyi kimi Kök Hüceyrələr və Regenerativ Təbabətin Gələcəyi, digər yetkin kök hüceyrələrin potensialının dəqiq qiymətləndirilməsinə qədər bir çox sual qalır [11]. Yetkin kök hüceyrələr üzərində aparılan az sayda tədqiqat tək, təcrid olunmuş hüceyrədən başlayaraq kök hüceyrənin potensialını kifayət qədər müəyyən etmişdir və ya düzgün diferensasiya üçün lazımi hüceyrə mühitini və ya hüceyrələrin orqanı təkrar doldurma effektivliyinə nəzarət edən amilləri müəyyən etmişdir. Təqdim edilmiş yetkin kök hüceyrələrindən alınan hüceyrələrin birbaşa toxuma funksiyasına töhfə verdiyini göstərmək və hüceyrələr fərqlənmədən yetkin kök hüceyrələrini mədəniyyətdə saxlamaq qabiliyyətini artırmaq lazımdır. Nəhayət, bu qədər diqqəti cəlb edən tədqiqatların əksəriyyəti insan yetkin kök hüceyrələrindən çox siçanlardan istifadə etmişdir.

ES hüceyrələri transplantasiya üçün hüceyrə mənbəyi kimi öz potensial problemlərindən məhrum deyil. Mədəniyyətdə insan ES hüceyrələrinin böyüməsi üçün viruslar ola bilən siçan hüceyrələrinin &ldquofeeder&rdquo təbəqəsi tələb olunur və ES hüceyrələrini fərqləndirməyə icazə verildikdə bir anda hüceyrə növlərinin qarışığı meydana gələ bilər. İnsan ES hüceyrələri siçanlara daxil edildikdə xoşxassəli şişlər əmələ gətirə bilər [20], baxmayaraq ki, hüceyrələrin alıcıya yeridilməzdən əvvəl diferensiallaşmasına icazə verilərsə, bu potensial yox olur [51]. Siçan ES hüceyrələri ilə aparılan tədqiqatlar diabetin [30], Parkinson xəstəliyinin [52] və onurğa beyni zədələnməsinin [53] müalicəsi üçün vədlər göstərdi.

Nüvə transplantasiyası ilə hazırlanmış ES hüceyrələri, demək olar ki, bütün hüceyrə növlərini təmin edə bilməsi və uzun müddət mədəniyyətdə saxlanıla bilməsi baxımından yetkin kök hüceyrələrə nisbətən üstünlüyə malik olacaqdır. Mövcud biliklər qeyri-müəyyəndir və hər ikisi üzərində araşdırma aparılır

yetkin kök hüceyrələri və nüvə transplantasiyası ilə edilən kök hüceyrələrin terapevtik potensiallarını anlamaq üçün tələb olunur. (Bu bənd 2-ci Tapıntı və Tövsiyədə aydın şəkildə ifadə edilmişdir Kök Hüceyrələr və Regenerativ Təbabətin Gələcəyi [11] bu, qismən qeyd edir ki, &ldquregenerativ tibbin elmi və terapevtik potensialını ən səmərəli şəkildə inkişaf etdirmək üçün həm embrion, həm də yetkin insan kök hüceyrələrinin tədqiqi tələb olunacaq.&rdquo) Çox güman ki, ES hüceyrələri ilkin olaraq generasiya üçün istifadə olunacaq. sinir hüceyrələri və ya əzələ hüceyrələri kimi transplantasiya üçün tək hüceyrə növləri. Gələcəkdə, bir çox hüceyrə növlərini meydana gətirmək qabiliyyətinə görə, onlar toxumaların və nəzəri olaraq transplantasiya üçün mürəkkəb orqanların yaradılmasında istifadə edilə bilər. Lakin bu, onların ixtisaslaşmasını hər bir komponent hüceyrə tipinə yönəltmək üçün texnikanın mükəmməlliyini və sonra bu hüceyrələrin orqan üçün düzgün nisbətdə və məkan təşkilində yığılmasını tələb edəcəkdir. Bu, insulin istehsal edən mədəaltı vəzi adacığı kimi sadə bir quruluş üçün kifayət qədər sadə ola bilər, lakin ağciyər, böyrək və ya qaraciyər kimi mürəkkəb toxumalar üçün daha çətin olur [54 55].

Nüvə transplantasiyası yolu ilə kök hüceyrələrin istehsalı üçün tələb olunan eksperimental prosedurlar, xəstədən somatik hüceyrə nüvəsinin enükle edilmiş yumurtaya köçürülməsindən ibarət olacaq. in vitro embrionun blastosist mərhələsinə mədəniyyəti və bu blastosistin daxili hüceyrə kütləsindən pluripotent ES hüceyrə xəttinin alınması. Bu cür kök hüceyrə xətləri daha sonra terapevtik transplantasiya üçün laboratoriya mədəniyyətində ixtisaslaşmış hüceyrələrin (və mümkünsə, toxumaların və orqanların) əldə edilməsi üçün istifadə ediləcəkdir. Belə bir prosedur uğurlu olarsa, transplantasiyadan imtinanın əsas səbəblərindən qaçınmaq olar. Bununla belə, bu təklifin bir sıra mümkün çatışmazlıqları var. Heyvan modelləri ilə aparılan təcrübələr göstərir ki, hüceyrələrdə divergent mitoxondrial zülalların olması imtinaya səbəb ola bilən &ldquominor&rdquo transplantasiya antigenləri [56 57] yarada bilər [58-63] əgər yumurta transplantasiya resipiyentinin anası tərəfindən bağışlansaydı, bu problem olmazdı. və ya alıcının özü. Bəzi otoimmün xəstəliklər üçün xəstənin öz hüceyrələrindən klonlanmış hüceyrələrin transplantasiyası uyğun olmaya bilər, çünki bu hüceyrələr davam edən dağıdıcı proses üçün hədəf ola bilər. Və yetkin kök hüceyrələrinin istifadəsində olduğu kimi, genetik mənşəli bir pozğunluq vəziyyətində, xəstənin öz hüceyrələrindən nüvə transplantasiyası ilə əldə edilən ES hüceyrələri eyni qüsuru daşıyacaq və onlardan əvvəl böyüdülməli və genetik olaraq dəyişdirilməlidir. terapevtik transplantasiya üçün istifadə edilə bilər. Kök hüceyrələrin başqa bir mənbəyindən istifadə etmək, yetkin kök hüceyrələrində və ya nüvə transplantasiyasından əldə edilən kök hüceyrə xəttində xəstəlikdə iştirak edən bir və ya bir neçə genin korreksiyası kimi çətin vəzifədən daha çox mümkün ola bilər (immunosupressiya tələb olunsa da). xəstənin nüvəsi ilə başladı.

Nüvə transplantasiyasına əlavə olaraq, tədqiqatçıların azaldılmış ES hüceyrələri əldə edə biləcəyi iki başqa üsul var.

rədd etmək üçün başlıq. Milli Akademiyaların hesabatında bir çox mümkün genetik quruluşu əhatə edən ES hüceyrə xətləri bankı bir ehtimaldır. Kök Hüceyrələr və Regenerativ Təbabətin Gələcəyi bunu &ldquo təsəvvür etmək çətindir&rdquo kimi qiymətləndirdi [11]. Alternativ olaraq, embrion kök hüceyrələri müəyyən hüceyrə səthi zülallarını aradan qaldırmaq və ya təqdim etmək üçün hazırlana bilər, beləliklə, hüceyrələri alıcının immun sistemi üçün görünməz edir. Transplantasiyada bir çox yetkin kök hüceyrələrinin təklif edilən istifadəsində olduğu kimi, bu yanaşmaların heç biri hazırda uğur vədinə yaxın bir şey daşımır.

Nüvə transplantasiyası ilə embrion kök hüceyrələrinin hazırlanması reproduktiv klonlaşdırmadan uterusa heç bir şeyin implantasiya edilməməsi ilə fərqlənir. Tək başına ES hüceyrələrinin tam bir embriona səbəb olub-olmaması məsələsi asanlıqla yanlış şərh edilə bilər. Bəzi hesabatların başlıqları göstərir ki, siçan embrionları yalnız ES hüceyrələrindən əldə edilə bilər [64-72]. Bununla belə, bütün hallarda ES hüceyrələri ev sahibi embriondan, xüsusən də trofoblastdan və primitiv endodermadan əldə edilən hüceyrələrlə əhatə olunmalıdır. Plasentanın bir hissəsini təşkil etməklə yanaşı, blastosistin trofoblast hüceyrələri rüşeym üçün onun gələcək başının və kürəyinin (ön-arxa) oxunun oriyentasiyasını təyin etmək üçün lazım olan əsas naxış işarələri və ya siqnalları təmin edir. Bu mövqe məlumatı genetik olaraq təyin olunmur, lakin trofoblast hüceyrələri tərəfindən gübrələmə və ya yumurtanın aktivləşdirilməsindən dərhal sonra başlayan hadisələrdən əldə edilir. Bundan əlavə, müəyyən bir inkişaf pəncərəsi zamanı mövqe işarələrinin blastosistin daxili hüceyrələrinə çatdırılması çox vacibdir [73-76]. Siçan blastokistlərinin təcrid olunmuş daxili hüceyrə kütlələri öz-özünə implantasiya olunmur, lakin başqa bir embrionun trofoblast vezikülləri ilə birləşdikdə bunu edəcəklər [77]. Bunun əksinə olaraq, trofoblast veziküllərinə daxil edilmiş siçan ES hüceyrələrinin təcrid olunmuş dəstələri heç vaxt trofoblastın qeyri-mütəşəkkil kütləsindən fərqli olaraq, postimplantasiya embrionuna uzaqdan bənzəyən heç bir şeyə səbəb olmur. Başqa sözlə desək, siçan ES hüceyrələrinin normal inkişafda iştirak etməsinə nail olmağın yeganə yolu, bu hüceyrələr hamiləlik boyu canlı qalmasa belə, onları ev sahibi embrion hüceyrələri ilə təmin etməkdir (Richard Gardner, şəxsi ünsiyyət). İnsan [20] və primat [78-79] ES hüceyrələrinin kulturada trofoblast hüceyrələrinə səbəb ola biləcəyi bildirilmişdir. Bununla belə, bu trofoblast hüceyrələrində, ehtimal ki, yumurtadan blastosistin inkişafı zamanı normal olaraq əldə edilən mövqe işarələri yoxdur. Yuxarıda təsvir edilən siçan ES hüceyrələri ilə aparılan eksperimental nəticələrin işığında, uşaqlıq yolunda yerləşdirilmiş insan ES hüceyrələrinin topaklarının implantasiya olunaraq dölə çevrilməsi ehtimalı çox azdır. Bildirilib ki, mədəniyyətdə insan ES hüceyrələrinin yığınları, siçan ES hüceyrələrinin yığınları kimi, embrioid cisimlər kimi tanınan qeyri-mütəşəkkil aqreqatlara səbəb olur [80].

Nüvə transplantasiyası ilə əldə edilən ES hüceyrələri terapevtik transplantasiya üçün istifadəsi ilə yanaşı, laboratoriyalarda klinik tibb və insan inkişafı biologiyasında fundamental tədqiqatlar üçün vacib olan bir neçə növ tədqiqat üçün istifadə edilə bilər. Belə tədqiqatlar ola bilməzdi

siçan və ya meymun ES hüceyrələri ilə həyata keçirilir və normal mayalanmış blastosistlərdən hazırlanmış ES hüceyrələri ilə mümkün olma ehtimalı yoxdur. Məsələn, genetik xəstəlikləri olan insanlardan əldə edilən ES hüceyrələri nüvə transplantasiyası yolu ilə hazırlana bilər və mutasiyaya uğramış genlərin həm hüceyrə, həm də toxuma inkişafında və beynin sinir hüceyrələri kimi başqa cür öyrənilməsi çətin olan yetkin hüceyrələrdə rolunun təhlilinə imkan verəcəkdir. . Bu işin dezavantajı var ki, donor yumurtalarının istifadəsini tələb edir. Lakin bir çox hüceyrə növlərinin öyrənilməsi üçün bu hüceyrə növləri üçün ES hüceyrələrinin istifadəsinə alternativ ola bilməz, insan toxumalarından ilkin hüceyrə xətlərinin alınması hələ mümkün deyil.

ES hüceyrələrinin xüsusi hüceyrə tiplərinə diferensiallaşdırılması başa düşülə və idarə oluna bilsə, genetik olaraq müəyyən edilmiş insan ES hüceyrə xətlərini əldə etmək üçün nüvə transplantasiyasından istifadə dondurulmuş və ya embrionlardan asanlıqla əldə edilə bilməyən genetik cəhətdən müxtəlif hüceyrə xətlərinin yaradılmasına imkan verəcəkdir. IVF klinikalarında klinik ehtiyacdan artıq olanlar. Sonuncular ümumi əhalinin müxtəlifliyini əks etdirmir və qadının maksimum məhsuldarlıq dövründən daha yaşlı olduğu və ya bir tərəfdaşın sonsuz olduğu cütlüklərin genomlarına meyllidir. Bundan əlavə, həm sadə [81], həm də mürəkkəb (çox genli) irsi genetik meyllərlə əlaqəli xəstəlikləri olan şəxslərdən nüvə transplantasiyası yolu ilə kök hüceyrələri istehsal etmək vacib ola bilər. Məsələn, bəzi insanlarda onları &ldquoLou Gehrig&rsquos xəstəliyinə&rdquo (amyotrofik lateral skleroz və ya ALS) meylləndirən mutasiyalar olur, lakin bu şəxslərin yalnız bəziləri, ehtimal ki, əlavə genlərin təsiri ilə xəstələnirlər. Xəstəliklərə qarşı bir çox ümumi genetik meyllər oxşar mürəkkəb etiologiyalara malikdir, çox güman ki, İnsan Genom Layihəsi tərəfindən yaradılan məlumat tətbiq olunduqca belə xəstəliklərin daha çox aşkar olacağı ehtimalı var. Xəstələrdən və sağlam insanlardan nüvə transplantasiyası ilə hazırlanmış ES hüceyrələrindən istifadə etməklə belə hüceyrələrin inkişafını müqayisə etmək və xəstəliklərə meylliliyi modullaşdıran fundamental prosesləri öyrənmək mümkün olardı.

Nə ES hüceyrələri ilə iş, nə də transplantasiya üçün hüceyrə və toxumaların meydana gəlməsinə səbəb olan iş, blastosistlərin uşaqlıq yolunda yerləşdirilməsini nəzərdə tutmur. Beləliklə, 64-200 hüceyrə mərhələsindən kənarda heç bir embrion inkişaf yoxdur və dölün inkişafı yoxdur.

NƏTİCƏLƏR

2-1. Reproduktiv klonlaşdırma eyni nüvə genetik materialı (DNT) dəstlərini ehtiva edən fərdlərin yaradılmasını nəzərdə tutur. Tam genetik eyniliyə sahib olmaq üçün klonların yalnız eyni nüvə genləri deyil, eyni zamanda eyni mitoxondrial genləri də olmalıdır.

2-2. Klonlaşdırılmış məməli heyvanlar, yumurta hüceyrəsinin xromosomlarını klonlaşdırılacaq fərddən alınan nüvə ilə əvəz etməklə, ardınca hüceyrə bölünməsinin stimullaşdırılması və yaranan embrionun implantasiyası yolu ilə hazırlana bilər.

2-3. Klonlaşdırılmış fərdlər, istər eyni, istərsə də fərqli vaxtlarda doğulsalar, müqayisə edilə bilən yaşlarda bir-birləri ilə fiziki və ya davranış baxımından eyni olmayacaqlar.

2-4. Kök hüceyrələr geniş özünü yeniləmək və fərqləndirmək qabiliyyətinə malik hüceyrələrdir və buna görə də onlar terapevtik transplantasiya üçün potensial hüceyrə mənbəyi kimi vacibdir. Yumurtalara nüvə transplantasiyası yolu ilə əldə edilən embrion kök hüceyrələr immunoloji cəhətdən xəstənin hüceyrələrinə bənzəyən pluripotent (embrion) kök hüceyrə xətlərinin potensial mənbəyidir. Bu cür hüceyrələrlə aparılan tədqiqatın məqsədi minimal rədd edilmə şansı ilə terapevtik transplantasiya üçün hüceyrə və toxumalar istehsal etməkdir.

2-5. Nüvə transplantasiyası yolu ilə əldə edilən embrion kök hüceyrələri və hüceyrə xətləri orqan transplantasiyasından başqa istifadə üçün dəyərli ola bilər. Bu cür hüceyrə xətləri müxtəlif mürəkkəb genetik xəstəliklərə meylliliklə əlaqəli irsi genetik komponentləri öyrənmək və böyüklərdə təcrid olunmuş şəkildə öyrənilməsi çətin olan hüceyrələrə təsir etdikdə bu cür xəstəliklərin müalicəsini sınaqdan keçirmək üçün istifadə edilə bilər.

2-6. Nüvə transplantasiyası yolu ilə embrion kök hüceyrələrinin əldə edilməsi prosesi embrionun uşaqlıq yolunda yerləşdirilməsini nəzərdə tutmur və o, yeni bir fərd yarada bilməz.

İSTİFADƏLƏR

1. COLMAN A. Məməlilərdə somatik hüceyrə nüvə transferi: Tərəqqi və tətbiqlər. Klonlama 1999, 1(4):185-200.

2. WOLF E, ZAXARTCHENKO V, BREM G. Məməlilərdə nüvə ötürülməsi: son inkişaflar və gələcək perspektivlər. J Biotexnol 1998 oktyabr 27(65) 2-3:99-110.

3. CHAN AW, DOMINKO T, LUETJENS CM, NEUBER E, MARTINOVICH C, HEWITSON L, SIMERLY CR, SCHATTEN GP. Embrionun parçalanması ilə primat nəslinin klonal çoxalması. Elm 2000 14 yanvar, 287(5451):317-319.

4. HALL JG. Tvinninq: mexanizmlər və genetik təsirlər. Curr Opin Genet Dev 1996 iyun, 6(3):343-7.

5. HALL JG. Genomik imprinting: təbiəti və klinik əhəmiyyəti. Annu Rev Med 1997, 48:35-44.

6. SIMON DK, JOHNS DR. Mitoxondrial pozğunluqlar: klinik və genetik xüsusiyyətlər. Annu Rev Med 1999, 50:111-27.

7. FINNILA S, AUTERE J, LEHTOVIRTA M, HARTIKAINEN P, MANNERMAA A, SOINEN H, MAJAMAA K. tRNAGln-də nadir mitoxondrial DNT variantı 4336A>G olan xəstələrdə sensorinöral eşitmə itkisi və miqren riskinin artması. J Med Genet 2001 İyun 38(6):400-5.

8. MCCREATH KJ, HOWCROFT J, CAMPBELL KH, COLMAN A, SCHNIEKE AE, KIND AJ. Becərilmiş somatik hüceyrələrdən nüvə ötürülməsi yolu ilə gen hədəflənmiş qoyunların istehsalı. Təbiət 29 iyun 2000 405(6790):1066-9.

9. SCHNIEKE AE, KIND AJ, RITCHIE WA, MYCOCK K, SCOTT AR, RITCHIE M, WILMUT I, COLMAN A, CAMPBELL KH. Transfeksiya edilmiş fetal fibroblastlardan nüvələrin köçürülməsi ilə istehsal olunan insan faktoru IX transgenik qoyun. Elm 19 dekabr 1997 278(5346):2130-3.

10. FIDDLER M, PERGAMENT D, PERGAMENT E. İnsan klonlaşdırılmasında preimplantasiya genetikinin rolu. Prenat diaqnozu 1999-cu il dekabr 19(13):1200-4.

11. KÖK HÜCEYƏRLƏR VƏ REGENERATIV TƏBABIN GƏLƏCƏYİ ÜZRƏ KOMİTƏ, HƏYAT ELMLƏRİ ŞURALARI VƏ NEVROLOJİK VƏ DAVRANIŞ SAĞLAMLIĞI ÜZRƏ ŞURA. Kök Hüceyrələr və Regenerativ Təbabətin Gələcəyi. Milli Elmlər Akademiyası və Tibb İnstitutunun hesabatı. 2001 sentyabr

12. BAUM CM, WEISSMAN IL, TSUKAMOTO AS, BUCKLE AM, PEAULT B. Namizəd insan hematopoetik kök hüceyrə populyasiyasının təcrid edilməsi. Proc Natl Acad Sci U S A 01 aprel 1992 89(7):2804-8.

13. AZIZI SA, STOKES D, AUGELLI BJ, DIGIROLAMO C, PROCKOP DJ. Albinos siçovullarının beyninə implantasiya edilmiş insan sümük iliyinin stromal hüceyrələrinin aşılanması və miqrasiyası və astrosit greftləri ilə oxşarlıqlar. Proc Natl Acad Sci U S A 31 mart 1998-ci il 95(7):3908-13.

14. UCHİDA N, BUCK DW, HE D, REITSMA MJ, MASEK M, PHAN TV, TSUKAMOTO AS, GAGE ​​FH, WEISSMAN IL. İnsan mərkəzi sinir sisteminin kök hüceyrələrinin birbaşa təcrid edilməsi. Proc Natl Acad Sci U S A 19 dekabr 2000 97(26):14720-5.

15. PALMER TD, SCHWARTZ PH, TAUPIN P, KASPAR B, STEIN SA, GAGE ​​FH. Hüceyrə mədəniyyəti. Ölümdən sonra insan beynindən alınan progenitör hüceyrələr. Təbiət 03 may 2001-ci il 411(6833):42-3.

16. ZUK PA, ZHU M, MIZUNO H, HUANG J, FUTRELL JW, KATZ AJ, BENHAIM P, LORENZ HP, HEDRICK MH. İnsan yağ toxumasından çoxlu hüceyrələr: hüceyrə əsaslı müalicələr üçün təsirlər. Tissue Eng 2001-ci il aprel 7(2):211-28.

17. KRAUSE DS, THEISE ND, KOLLEKTOR Mİ, HENEGARIU O, HWANG S, GARDNER R, NEUTZEL S, SHARKIS SJ. Tək sümük iliyindən əldə edilən kök hüceyrə ilə çox orqanlı, çox nəsilli aşılama. Hüceyrə 04 may 2001-ci il 105(3):369-77.

18. TOMA JG, AKHAVAN M, FERNANDES KJL, BARNABÉ-HEIDER F, SADIKOT A, KAPLAN DR, MILLER FD. Məməli dərisinin dermisindən multipotent yetkin kök hüceyrələrin təcrid edilməsi. Təbiət Hüceyrə Biologiyası 2001 sentyabr, 3 778-784.

19. RIETZE RL, VALCANIS H, BROOKER GF, THOMAS T, VOSS AK, BARTLETT PF. Yetkin siçan beynindən pluripotent sinir kök hüceyrəsinin təmizlənməsi. Təbiət 16 avqust 2001 412(6848):736-9.

20. TOMSON JA, İTSKOVITZ-ELDOR J, SHAPIRO SS, WAKNITZ MA, SWIERGIEL JJ, MARSHALL VS, JONES JM. İnsan blastokistlərindən əldə edilən embrion kök hüceyrə xətləri. Elm 06 noyabr 1998-ci il 282(5391):1145-7.

21. EVANS MJ, KAUFMAN MH. Siçan embrionlarından pluripotensial hüceyrələrin kulturasında yaradılması. Təbiət 09 iyul 1981 292(5819):154-6.

22. MARTIN GR. Teratokarsinoma kök hüceyrələri ilə şərtləndirilmiş mühitdə yetişdirilmiş erkən siçan embrionlarından pluripotent hüceyrə xəttinin təcrid edilməsi. Proc Natl Acad Sci U S A 1981 dekabr 78(12):7634-8.

23. REUBINOFF BE, PERA MF, FONG CY, TROUNSON A, BONGSO A. İnsan blastokistlərindən embrion kök hüceyrə xətləri: in vitro somatik fərqləndirmə. Nat Biotexnol 2000 aprel, 18(4):399-404.

24. SHINOHARA T, BRINSTER RL. Spermatoqonial kök hüceyrələrin zənginləşdirilməsi və transplantasiyası. Int J Androl 2000, 23 Əlavə 2:89-91.


Bu, OCW üzrə 2400-dən çox kursdan biridir. Sol tərəfdə əlaqələndirilmiş səhifələrdə bu kurs üçün materialları araşdırın.

MIT OpenCourseWare bütün MİT kurrikulumini əhatə edən minlərlə MİT kurslarından materialların pulsuz və açıq nəşridir.

Qeydiyyat və ya qeydiyyat yoxdur. OCW materiallarını öz sürətinizlə sərbəst şəkildə nəzərdən keçirin və istifadə edin. Heç bir qeydiyyat yoxdur, başlanğıc və ya bitmə tarixləri yoxdur.

Bilik sizin mükafatınızdır. Öz həyat boyu öyrənmənizə rəhbərlik etmək və ya başqalarına öyrətmək üçün OCW-dən istifadə edin. Biz OCW-dən istifadə üçün kredit və ya sertifikat təklif etmirik.

Paylaşmaq üçün hazırlanmışdır. Daha sonra faylları endirin. Dostlarınıza və həmkarlarınıza göndərin. Dəyişdirin, yenidən qarışdırın və təkrar istifadə edin (sadəcə mənbə kimi OCW-ni göstərməyi unutmayın.)


Videoya baxın: عشرة أخطاء تجنبها لتتميز خلال حضور الاجتماعات (Iyun 2022).