Məlumat

22.6: Hidrolitik və müxtəlif mühitlər - Nişasta, Yağsız Süd, Jelatin, İndol, Karbamid, Kligler/TSI - Biologiya

22.6: Hidrolitik və müxtəlif mühitlər - Nişasta, Yağsız Süd, Jelatin, İndol, Karbamid, Kligler/TSI - Biologiya


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Giriş

Bir çox bakteriya ətraf mühitə ifraz etdikləri fermentlər istehsal edə bilər. Bu testlər seriyasında siz sözügedən qida maddəsinin hidrolizini və ya hidroliz məhsulunun özünü müşahidə etməklə ekzofermentlərin istehsalını aşkar edəcəksiniz.

Son sınaq birləşmiş paketdir. Kligler və ya Üçqat Şəkər Dəmiri (iki çox oxşar test) fermentasiya yolu ilə şəkərin istifadəsini və qaz istehsalını və hidrogen sulfid ((ce{H2S})) istehsal etmək qabiliyyətini aşkar edə bilər. (ce{H2S}) istehsalı bəzi bakteriyaların unikal qabiliyyətidir və çox müəyyənedici faktor ola bilər.

İndol Testi - Triptofan Hidrolizi

Məqsəd: triptofanaz istehsalını aşkar etmək. IMViC testlərinin bir hissəsi.

Media: Tripton Agar lövhələri

Reagentlər/göstəricilər: İndol quru slaydlar

Mexanizm/reaksiyalar: Triptofanaz triptofanın hidrolizinə səbəb olur → indol + piruvik turşu

İstiqamətlər: Steril taxta çubuqdan istifadə edərək (peyvənd məftilindən istifadə etməyin) TA boşqabından az miqdarda bakteriya seçin və quru slaydın bir hissəsindəki sahəyə toxunun. Təxminən 30 saniyə ərzində rəng dəyişikliyini çəhrayı/qırmızıya baxın. QURU SLAYDLAR BİR ÇOX SINAQ ÜÇÜN İSTİFADƏ EDİLƏ BİLƏR (4 / Kvadrat, 4 Kvadrat Slayd. YENİ Slayd PAKETİNİ AÇMADAN ƏVVƏL HƏR Slayddan İSTİFADƏ EDİN).

Təfsir:

  • (+) = Rəngi ​​30 saniyə ərzində qırmızıya dəyişir.
  • (-) = Qırmızıya rəng dəyişikliyi yoxdur

Nişastanın hidrolizi

Məqsəd: Amilazanın istehsalını aşkar etmək.

Media: Nişasta Aqar plitələri (1% nişasta)

Reagentlər/göstəricilər: Qram yodu

Mexanizm/reaksiyalar: Yod nişasta ilə təmasda olduqda mavi-qara olur.

İstiqamətlər: Nişastalı agarı düz bir xəttlə çəkin. İnkubasiyadan sonra Gram yodunu əlavə edin, böyüməni və ətrafı orta səviyyədə əhatə etmək üçün müdrikcə, az miqdarda atın.

Təfsir:

  • (+) = Nişastanın amilazlar tərəfindən hidrolizə edildiyi koloniyaların ətrafındakı rəngsiz zona.
  • (-) = Zona yoxdur, orta böyüməyə dərhal bitişik mavi-qaradır.

Ureaz testi

Məqsəd: Ureaz istehsalını aşkar etmək

Media: Karbamid bulyonu

Reagentlər/göstəricilər: Fenol Qırmızı

Mexanizm/reaksiyalar: Ureaz karbamidi ammonyak və karbon qazına hidroliz edir. Ammonyak mədəniyyətin pH səviyyəsini artırır və fenol qırmızının sarıdan parlaq çəhrayıya çevrilməsinə səbəb olur.

İstiqamətlər: Karbamid bulyonunu aşılayın və 24 – 48 saat inkubasiya edin.

Təfsir:

  • (+) = Qırmızı və ya parlaq çəhrayı rəng (pH > 8.4)
  • (-) = Sarı rəng (pH <6)

Kazein Hidrolizi (Yağlı süd)

Məqsəd: Casease istehsalını aşkar etmək.

Media: Yağsız Süd Ağar

Mexanizm/reaksiyalar: Kazeaz kazeini peptidlərə və amin turşularına proteolizə edir.

İstiqamətlər: Aqarı düz bir xəttlə kəsin və 24 – 48 saat inkubasiya edin.

Təfsir:

  • (+) = Böyümə ətrafındakı təmiz zona kazeaz vasitəsilə kazeinin hidrolizini göstərir

  • (-) = Aydın zona yoxdur.

Jelatinin mayeləşdirilməsi

Məqsəd: Jelatinazın istehsalını təyin etmək.

Media: Qidalandırıcı Jelatin Dərin (12-15% jelatin)

Mexanizm/reaksiyalar: Jelatinaza jelatin→polipeptidlər→amin turşularının parçalanmasına və mayeləşməsinə səbəb olur.

İstiqamətlər: Tüpün mərkəzindən aşağıya doğru ⅔ dərin bıçaqla aşılama. İnkubasiyadan sonra oxumadan əvvəl 1 saat soyuducuda saxlayın.

Təfsir:

  • (+) = Mayeləşmə (soyuducudan sonra)
  • (-) = Soyuducuda olan gellər, mayeləşmə yoxdur.

Bu test zəif müsbətləri aşkar etmir və istifadə olunan jelatinin konsentrasiyası bəzi orqanizmlərin böyüməsini maneə törədə bilər.

Üçqat Şəkərli Dəmir Ağar (TSI)

(Qeyd edək ki, ya TSI, ya da KIA istifadə olunacaq və fərq testdə mövcud olan şəkərlərdədir)

Məqsəd: Enterobacteriaceae-nin dekstroz (qlükoza), laktoza və saxarozanı fermentləşdirmək və qaz və/və ya hidrogen sulfid istehsal etmək qabiliyyəti ilə fərqlənməsi.

Media: TSI tərkibində dəmir sulfat, fenol qırmızı, dekstroza (qlükoza), laktoza və saxaroza var.

Mexanizm/reaksiyalar:

Fermentasiya: Fenol qırmızısı turşu mühitində sarıya çevrilir.

Dekstroz fermentasiya olunur; mühitin gövdəsi sarıya çevrilir və maili qırmızı qalır.

Laktoza və ya saxaroza fermentasiya olunur; butt və maili hər ikisi sarıya çevrilir.

Qaz: Fermentasiya nəticəsində yaranan qaz mühitdə qırılmalar və ya çatlar kimi görünə bilər.

Hidrogen sulfidi: Bir neçə bakteriya (ce{SO4})=-ni (ce{H2S}) (hidrogen sulfid) səviyyəsinə endirməyə qadirdir. Dəmir (ce{H2S}) ilə birləşərək (ce{FeS}) (dəmir sulfid) qara rəngli birləşmə əmələ gətirir. Bu, götünü qara rəngə çevirəcək. Beləliklə, qara butt (ce{H2S}) istehsalını göstərir.

İstiqamətlər: İynə ilə ikiqat peyvənd: agarın maili səthi zolaqlar, sonra bıçaqlayın, 24 – 48 saat inkubasiya edin.

Təfsir: Maili/But, Qaz, (ce{H2S})

  • ALK/A: (+) Dekstroz = Turşu ətinin üzərində qələvi meyl (qırmızı) (sarı)

  • A/A: (+) Dekstroza, Laktoza və/yaxud saxaroza= Turşu ətinin üzərindəki turşu meyli

  • ALK/ALK: Dəyişiklik yoxdur, qələvi butt üzərində qələvi meyl

  • G: Qaz hasilatı

  • (ce{H2S}) (+): = Hidrogen Sulfid istehsalı = qara (turşu mühitdə istehsal olunur)

Kligler Iron Agar (KIA)

Məqsəd: Enterobacteriaceae-nin dekstroz (qlükoza), laktoza fermenti və qaz və/və ya hidrogen sulfid istehsal etmək qabiliyyəti ilə fərqlənməsi.

Media: KIA tərkibində dəmir sulfat, fenol qırmızı, dekstroza (qlükoza), laktoza var.

Mexanizm/reaksiyalar:

Fermentasiya: Fenol qırmızısı turşu mühitində sarıya çevrilir.

Dekstroz fermentasiya olunur; mühitin gövdəsi sarıya çevrilir və maili qırmızı qalır.

Laktoza fermentasiya olunur; butt və maili hər ikisi sarıya çevrilir.

Qaz: Fermentasiya nəticəsində yaranan qaz mühitdə qırılmalar və ya çatlar kimi görünə bilər.

Hidrogen sulfidi: Bir neçə bakteriya (ce{SO4})=-ni (ce{H2S}) (hidrogen sulfid) səviyyəsinə endirməyə qadirdir. Dəmir (ce{H2S}) ilə birləşərək (ce{FeS}) (dəmir sulfid) qara rəngli birləşmə əmələ gətirir. Bu, götünü qara rəngə çevirəcək. Beləliklə, qara butt (ce{H2S}) istehsalını göstərir.

İstiqamətlər: İğnə ilə ikili peyvənd: Ağarın dərin, sonra maili səthinin ortasına bıçaqla vurun, 24 – 48 saat inkubasiya edin.

Təfsir: Maili/But, Qaz, (ce{H2S})

  • ALK/A: (+) Dekstroza = Turşu ətinin üzərində qələvi meyl (qırmızı) (sarı)

  • A/A: (+) Dekstroza və Laktoza = Turşu ətinin üstünə meyilli

  • ALK/ALK: Dəyişiklik yoxdur, qələvi quyruq üzərində qələvi meyl

  • G: Qaz hasilatı

  • (ce{H2S}) (+): = Hidrogen Sulfid istehsalı = qara (turşu mühitdə istehsal olunur)

Materiallar

  • Tələbə anbar orqanizmləri
  • 1 boşqab Nişasta Ağar/GP
  • 1 boşqab Yağsız Süd Aqar/GP
  • 1 boru Jelatin/bütün orqanizmlər
  • 1 boşqab Triptofan Agar/2 GNR (hər boşqaba 2 GNR aşılayın)
  • 1 boru Karbamid bulyon/GNR istisna olmaqla hamısı
  • 1 boru TSI və ya Kligler/GNR

Prosedurlar

  1. Hər bir GP-ni Nişasta Aqar boşqabına aşılayın
  2. Hər bir GP-ni Yağsız Süd Ağar boşqabına aşılayın
  3. Jelatin borusuna hər bir ehtiyatınızın iynəsi ilə bıçaqla aşılayın
  4. Triptofan Agar boşqabına hər biri 2 GNR aşılayın, cəmi GNR-ləri aşılayın
  5. GNR-lərdən başqa bütün ehtiyatlarınızı karbamid bulyon borusuna aşılayın
  6. GNR-lərin hər birini TSI və ya Kligler-ə aşılayın (iynə ilə aşılayın, bıçaqlayın, sonra maili çəkin)

Nəticələr

Peyvənd edilmiş bakteriyaların nəticələrini verin

Bakteriya

nişasta

Yağsız süd

Jelatin

İndol

karbamid

TSI/Kligler

S/B G (ce{H2S})

Nəticə

  • Nəticələrinizi yoxlayın və aşağıdakıları müəyyən etmək üçün hansı testin və ya testlər dəstinin (əgər varsa) daha yaxşı olacağını bildirin (bunu bütün fond mədəniyyətləriniz üçün etmək yaxşı olar!)
    • E. coli
    • Mycobacterium smegmatis
    • B. cereus
    • Lactococcus lactis



Şərhlər:

  1. Sevy

    Belə bir blog olduğuna da inana bilmirəm :)

  2. Dutilar

    Razıyam, bu əla bir fikirdir.

  3. Garnell

    Hesab edirəm ki, səhv edirsiniz. Mən mövqeyimizi müdafiə edə bilərəm.

  4. Bryen

    Çox əyləncəli rəy



Mesaj yazmaq