Məlumat

CRISPR-Cas9 sistemində ApoCas9 nədir?

CRISPR-Cas9 sistemində ApoCas9 nədir?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Hazırda Cas9 nukleazlarının xüsusi analizi haqqında məqalə oxuyuram. Təcrübələrin birində onlar ApoCas9-dan (digər CRISPR nüvələrinin Apo variantları) bir növ nəzarət kimi istifadə etdilər.

Amma bütün məqalə onlar ApoCas9 müəyyən deyil? ApoCas9-un tərifini və fəaliyyətini onlayn yoxladım, lakin heç bir məhsuldar nəticə əldə etmədim.

CRISPR ilə əlaqəli nükleazların həssas və hüceyrəsiz aşkarlanması üçün universal üsul


Ümumiyyətlə, "apo" apoenzimi göstərmək üçün istifadə olunur - bu, əsas kofaktor(lar)ı olmayan fermentin zülal hissəsidir.

Bu faktiki olaraq müəyyən edilmişdir Eksperimental kağız bölməsi:

gRNA olmadan Cas9/Cpf1 (ApoCas9/Cpf1)

Belə ki, bu halda ApoCas9 bələdçi RNT ilə bağlı olmayan Cas9 endonükleazıdır.


CRISPR-Cas9


CRISPR/Cas9 sisteminə giriş

Sink barmaq nükleazları və transkripsiya aktivatoruna bənzər effektor nukleazlar kimi bu yaxınlarda hazırlanmış proqramlaşdırıla bilən redaktə vasitələri dəqiq genom modifikasiyası imkanlarını əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdırsa da, bu üsulların məhdudiyyətləri var. CRISPR (müntəzəm olaraq interspaced qısa palindromik təkrarlar)/Cas9 texnologiyası bu digər yeni nəsil genom redaktə alətləri ilə müqayisədə əhəmiyyətli təkmilləşməni təmsil edir, hədəfləmə, səmərəlilik və istifadə rahatlığının yeni səviyyəsinə çatır. CRISPR/Cas9 sistemi faktiki olaraq hər hansı bir orqanizmdə sayta xas genomik hədəflənməyə imkan verir.

II tip CRISPR/Cas sistemi prokaryotik adaptiv immun cavab sistemidir və kodlaşdırılmayan RNT-lərdən istifadə edərək Cas9 nukleazını sahəyə xüsusi DNT parçalanmasına təkan verir. Bu DNT zədəsi DNT təmiri yolu (NHEJ) və ya homoloji yönümlü təmir (HDR) yolu ilə birləşən qeyri-homoloji uc vasitəsilə hüceyrə DNT təmiri mexanizmləri ilə bərpa olunur.

CRISPR/Cas9 sistemi məməli hüceyrələrində genomun redaktəsinə vasitəçilik etmək üçün sadə, RNT-proqramlaşdırıla bilən metod yaratmaq üçün istifadə edilib və gen nokautları (yerləşdirmə/silmə yolu ilə) və ya knockinlər (HDR vasitəsilə) yaratmaq üçün istifadə oluna bilər. Gen pozulmaları yaratmaq üçün (Şəkil 1), Cas9 nukleazını müəyyən bir genomik yerə yönəltmək üçün tək bələdçi RNT (sgRNA) yaradılır. Cas9-un səbəb olduğu ikiqat zəncir qırılmaları NHEJ DNT təmir yolu ilə təmir edilir. Təmir xətalara meyllidir və beləliklə, gen funksiyasını poza biləcək əlavələr və silmələr (INDEL) tətbiq oluna bilər.

CRISPR/Cas9 vasitəçiliyi ilə gen pozulma prinsipi. DNT hədəfinə xas olan crRNA ardıcıllığından və Cas9 zülalı (1) ilə qarşılıqlı əlaqədə olan tracrRNA ardıcıllığından ibarət tək bələdçi RNT (sgRNA), DNT endonükleaz aktivliyinə malik olan Cas9 zülalının rekombinant formasına bağlanır (2). ). Yaranan kompleks hədəfə xas ikiqat zəncirli DNT parçalanmasına səbəb olacaq (3). Parçalanma sahəsi qeyri-homoloji son birləşmə (NHEJ) DNT təmir yolu ilə təmir ediləcək, bu, gen funksiyasını poza bilən əlavələr/delesiyalar (INDEL) ilə nəticələnə bilən xətaya meylli bir prosesdir (4).

CRISPR/Cas9 texnologiyası genomun redaktəsində inqilab edib, genomik hədəfləmənin, səmərəliliyin və sadəliyin əvvəllər əlçatmaz səviyyədə olmasına imkan verib. Guide-it məhsulları aşağıdakılar üçün sadələşdirilmiş metod təqdim etməklə CRISPR/Cas9 sisteminin istifadə imkanlarını daha da yaxşılaşdırır:


2021-ci ildə CRISPR kimə məxsusdur? Düşündüyünüzdən də mürəkkəbdir

Müasir təbabəti dəyişdirməsi gözlənilən genetik redaktə vasitəsi olan CRISPR-ın kimə məxsus olması sualı hüquqi mübarizələrin, anlaşılmaz adlandırma konvensiyalarının və molekulyar forma və funksiyanın incə variasiyalarının qarışıqlığıdır. Nəhayət, bu alətlər üçün patent hüquqlarına sahib olan qurumlar, demək olar ki, ondan kimin istifadə edə biləcəyinə, necə istifadə olunduğuna və nə qədər başa gəldiyinə nəzarət edəcəklər.

UC Berkeley və MIT-Harvard Broad Institute arasında orijinal CRISPR patent döyüşü gözəl olmadı. Patent döyüşləri nadir hallarda olur, lakin CRISPR-Cas9-un kimə məxsus olması ilə bağlı mübahisələr xüsusilə qızışıb. Bu təəccüblü deyil. CRISPR tibbin gələcəyi kimi təqdim edildiyindən, alətin bir hissəsinə sahib olmaq və lisenziyalaşdırmaq bacarığı orijinal CRISPR-Cas9 texnologiyası üzərində qurulmuş bir sıra şirkətlər üçün çox vacibdir.

Lakin 2021-ci ildə CRISPR-ə kimin sahib olması bir neçə il əvvəl olduğundan xeyli mürəkkəbdir. Daha çox şirkət, tədqiqatçı və akademik qurum incə fərqli CRISPR molekulları üçün patent müraciətləri etdikcə, əqli mülkiyyət hüquqlarını yalnız iki və ya üç böyük oyunçuya daraltmaq artıq mümkün deyil.

Niyə CRISPR vacibdir

CRISPR mahiyyətcə bakterial müdafiə mexanizmidir. Virus bakteriyaya yoluxduqda (bakteriofaq kimi tanınır), bakteriya bakteriofaqın DNT-sini kəsmək üçün CRISPR ilə əlaqəli molekuldan (Cas) istifadə edə bilər. Bakteriyalar daha sonra fag DNT-nin parçalarını öz genomuna daxil edir və gələcəkdə fagları tanıyıb məhv etməyə imkan verir.

Bakteriofaqlar öz DNT-lərini (qırmızı, ortada olan şəkildə) bakteriyaya yerləşdirirlər. CRISPR əslində faj DNT-ni kəsmək və saxlamaq üçün bakterial immun sistemidir ki, bakteriyalar gələcəkdə faqı tanıya və onunla mübarizə apara bilsinlər. Kredit: Victor Padilla-Sanchez, Amerika Katolik Universiteti, Mənbə: Milli Sağlamlıq İnstitutu Flickr

Cas zülallarının gözəlliyi ondadır ki, onlar xüsusi DNT ardıcıllığını tanımaq və kəsmək üçün proqramlaşdırıla bilirlər. Buna görə də CRISPR tez-tez “genetik qayçı” adlandırılır. Cas molekuluna bələdçi RNT molekulunun (gRNA) köməyi ilə DNT-ni harada kəsmək barədə göstərişlər verməklə, CRISPR tapmaq üçün proqramlaşdırılmış istənilən geni sıradan çıxarmaq gücünə malikdir.

DNT-nin kəsilməsinin nəticələri çox böyükdür. CRISPR əsaslı terapevtiklər irsi uşaqlıq korluğu və oraq hüceyrəli anemiya kimi vəziyyətlər üçün artıq klinik vədlər göstərmişdir. Texnologiya ilk növbədə aktiv olmayan bir geni söndürməklə bir çox genetik xəstəlikləri sağalda bilər. CRISPR həmçinin DNT-ni kəsə bilər, qırışı yeni seqmentlə əvəz edə və nasaz genetik mutasiyanı düzəldə bilər.

Hər kəs CRISPR pastasından bir dişləmək istəyir

Ən məşhur CRISPR-Cas molekulu Cas9-dur. Orijinal CRISPR patent döyüşü burada başlayır və mübahisə hələ də davam edir. Həm UC Berkeley, həm də MIT-Harvard Broad Institute 2012-ci ildə CRISPR-Cas9-a ƏM hüquqlarını iddia etdi. Geniş İnstitut ərizəsini sürətləndirmək üçün pul ödədiyindən, UC Berkeley ilk dəfə müraciət etsə də, onun patentləri ilk olaraq verildi. Bununla belə, Birləşmiş Ştatların Patent və Ticarət Nişanları İdarəsi (USPTO) 2013-cü ildə qüvvəyə minən ilk fayl sisteminə keçdi və patent döyüşü üçün səhnə yaratdı.

İlkin CRISPR-Cas9 ƏM hüquqlarına əsaslanan bir çox şirkətlərin də patentlərində üst-üstə düşürlər. Bəzi patentlər yalnız müəyyən xəstəliklər və ya tətbiqlər üçün CRISPR-Cas9 istifadə hüququnu əhatə edir.

Bu məqalə üçün əlaqə saxlanan mənbələr yalnız anonimlik şərti ilə danışmağa və birbaşa sitat gətirilməməsinə razılıq verdilər. Beləliklə, CRISPR-Cas9 patent mübahisələri hazırda baş xəbər olmasa da, texnologiya ilə birbaşa əlaqəli olanlar sözlərinin cari və ya gələcək məhkəmə proseslərində yanlış şərh edilməməsi üçün hər cür tədbir görürlər.

Bu günə qədər, əsas Cas9 patent mübahisəsindəki oyunçuların hər biri tərəfindən qurulan şirkətlər:

Patent mübahisəsindən kənarda, Doudna və Charpentier CRISPR “qayçılarının” ortaq kəşfləri kimi tanınıblar. Onların 2011-ci ildəki orijinal əməkdaşlığı nəticədə onlara 2020-ci ildə Kimya üzrə Nobel Mükafatını qazandırdı. Bu, tarixi bir qələbə idi - Doudna və Charpentier Mükafatı bölüşən ilk qadınlar oldu və bu, sintetik biologiyanı ictimai məlumatlılığın yeni səviyyəsinə gətirdi.

Bütün bu diqqət CRISPR-Cas9-a yönəldilib. Lakin Ca9 yalnız bir molekul deyil. Bu, DNT-ni bağlamaq və parçalamaq üçün çoxlu vəhşi tipli (təbii olaraq meydana gələn) və mühəndis fermentləridir. Cas9 molekulları da yeganə CRISPR fermentləri deyil. Cas12, Cas14, CasX və CasY kimi CRISPR komplekslərinin bütün ailələri müxtəlif təşkilatlar, şirkətlər, tədqiqatçılar və akademik institutlar tərəfindən kəşf edilmiş və patentləşdirilmişdir.

Hətta Cas adlandırma konvensiyaları çaşdırıcıdır. Fərqli qurumlar bir qədər fərqli adlandırma qaydalarından istifadə edirlər - bir adlandırma sistemində CasX digərində Cas12e-dir. Bəzi CRISPR Cas fermentləri də digərləri ilə sıx bağlıdır, demək olar ki, aralarında az fərq olan molekulyar qohumlar kimi.

Yüzlərlə, hətta minlərlə Cas varyasyonları var, bunların hamısı potensial olaraq patentləşdirilə bilər. CRISPR ƏM hüquqlarının daha da parçalandığı yer budur.

Patent Oyununun Digər Oyunçuları

CRISPR-ı kəşf edən ilk qurumlar patent sahibi olan yeganə qurumlar deyil. Əlbəttə ki, CRISPR-ni ilk dəfə kimin kəşf etməsi çox müzakirələrin məhsuludur. UC Berkeley və Emmanuelle Charpentier-dən başqa Vilnüs Universiteti də Cas9-dan eyni anda necə istifadə olunacağını kəşf etdi. Bununla belə, Vilnüs Universiteti genetik redaktə fəaliyyəti üçün lazım olan bütün komponentləri nümayiş etdirmədiyi üçün orijinal kəşflər siyahısından çıxarılıb.

CRISPR Cas9 (ağ) Hədəf DNT ardıcıllığını tapmaq və kəsmək üçün Bələdçi RNT-dən istifadə edir. Mənbə: WikiMedia

İndi DowDuPont, MilliporeSigma və Cellectis kimi şirkətlərin hamısı CRISPR-Cas9 patentlərinə malikdir.

Bəziləri, məsələn, DowDuPoint, patent müqavilələrini Caribou Biosciences və Emmanuelle Charpentier kimi bir çox CRISPR müəssisələrindən alıblar. Patent toplamaq üçün lisenziyalaşdırma şirkəti MPEG LA başqa bir marşruta keçdi. Şirkət müxtəlif şirkətlərdən bir neçə patent toplamaq prosesindədir və ona geniş spektrli CRISPR əqli mülkiyyətinə potensial giriş imkanı verir.

Problem ondadır ki, bu patentlərin hər biri daha böyük tortun kiçik seqmentlərini təmsil edir. Hansı Cas fermentlərinin və ya bu fermentlərin hansı dəyişikliklərinin son nəticədə faydalı olacağı hələ aydın deyil. Tədqiqatçı və ya şirkətin CRISPR-Cas patentlərinə sahib olması Cas komplekslərinin genetik redaktə üçün təsirli olacağı demək deyil. CRISPR Cas molekullarını kəşf etmək nisbətən asandır. İşləyənləri tapmaq daha çətindir.

Hamı CRISPR sahibidirsə nə olacaq?

CRISPR patent hüquqlarının gələcəyi üçün dörd mümkün ssenari var. Biri odur ki, CRISPR patentləri üçün müraciət edən insanların əksəriyyəti uğur qazanır. Bu halda, tədqiqatçılar və sahibkarlar üçün Cas molekulunun artıq patentləşdirilib və ya bu ƏM-in kimə məxsus olduğunu anlamaq çox çətin ola bilər. Tədqiqatçılar ehtiyac duyduqlarını tapmaq üçün bütün CRISPR növlərindən keçməyə məcbur olarlarsa, bu, tədqiqat və kəşfdə darboğaz yarada bilər.

CRISPR-Cas9 Duchenne əzələ distrofiyasının (DMD) əsas səbəbi olan protein distrofinin istehsalına təsir edən genetik mutasiyanı düzəldə bilər. Distrofinin bərpası (yaşıl rəngə boyanmış), DMD xəstələrinin ən azı 60%-ni müalicə edir. Kredit: Courtney Young, M.S., Melissa Spencer laboratoriyası, Kaliforniya Universiteti, Los Angeles. Mənbə: NIH

İkinci ssenari, bir çox qurum və şirkətin CRISPR hüquqlarına sahib olduğu bir dünya yaradır, lakin bu, nisbətən mütəşəkkildir (ilkin toz nəhayət çökəndə). CRISPR-ın daha əlçatan olması üçün tədqiqatda necə paylaşılacağını və istifadə olunacağını göstərən qaydalar olacaq.

Üçüncü ssenari, bir və ya iki əsas oyunçunun CRISPR-Cas9 patentləri üzərində inhisarçılığı olacaq. Onlar digər oyunçularla birləşərək və ya onları satın alaraq tədqiqat və istehsal mənzərəsini idarə edəcəkdilər. Bununla belə, bu, çox az ehtimaldır. Şirkətlər və tədqiqatçılar CasX kimi molekulların öz iterasiyaları ilə artıq daha aydın ƏM hüquqları inkişaf etdiriblər. Digər şirkətlər xüsusi CRISPR kompleksləri hazırlayıblar. Bütün Cas9 patentləri bir müəssisə tərəfindən alınsa belə, CRISPR-Cas bazarında başqa variantlar hələ də mövcud olacaq.

Cas9-un gələcəyin molekuluna çevrilmədiyi dördüncü ssenari də var. Ca9 kəşf edilən ilk CRISPR fermenti olsa da, onunla işləmək heç də asan deyil. CasX kimi molekulyar komplekslər daha kiçikdir, xəstələrə çatdırılması daha asandır və daha az hədəfdən kənar genetik kəsiklər edir. Cas9 hələ də hüquqi mübahisələrdə geniş yayılmış olsa da, bir çox tətbiqlər üçün seçim molekulu olmaya bilər.

Demək lazımdır ki, akademik qurumlar çox güman ki, Cas molekullarına az və ya heç bir ödəniş etmədən çıxış əldə edəcəklər. Akademik tədqiqatçıların özləri qazanc əldə etməyi planlaşdırmırlarsa, patentləşdirilmiş həyat elmi alətlərindən istifadə etməsi ənənəvi haldır.

CRISPR var və yoxdur

CRISPR tətbiqləri biofarma və terapevtiklərlə məhdudlaşmır. Kənd təsərrüfatı texnologiyası platformaları və ya hüceyrə mədəniyyəti ətləri artıq CRISPR texnologiyasından istifadə edir. İndiyə qədər bu sistem kifayət qədər yaxşı işləyir: bir çox şirkət ilkin Cas9 IP-yə sahibdir, onu lisenziyalaşdırır və öz məhsullarını və terapevtiklərini inkişaf etdirərkən qazanc əldə edir. Patent sisteminin işləməsi belədir. Ancaq bir və ya iki böyük oyunçunun monopoliyasında, İP sahiblərinin çıxara biləcəyi lisenziya haqları faktiki olaraq qeyri-məhdud ola bilər.

CRISPR ilə əsas bitkilərin mühəndisliyi daha yüksək məhsul əldə etmək və iqlim dəyişikliyinin təsirlərinə daha davamlı olmaq üçün bitkilərin modifikasiyasında əsas vasitə olacağı gözlənilir. Mənbə: DOI: 10.1126/science.aar7191

İkinci məsələ o zaman yaranır ki, şirkət birdən çox proqram üçün CRISPR istifadə etməlidir, lakin birdən çox şirkət xüsusi proqramlar üçün CRISPR hüquqlarının seqmentlərinə malikdir. Yeni şirkətlər texnologiyaya daxil olmaq üçün bir neçə lisenziya haqqı ödəməli ola bilər. Xüsusilə CRISPR kimi güclü bir alət üçün bu ödənişlər adətən yüksək olduğundan, bir çox perspektivli şirkətlər yalnız ödənişlər hesabına oyundan çıxa bilər. Bu ssenari innovasiya və elmi yaradıcılığı boğa bilər.

Hələ də CRISPR patentini almaq istəyirsiniz? Bilməli olduğunuz şey budur

CRISPR patent hüquqlarını çeşidləməyə çalışan hər kəs üçün ən böyük problem nə qədər patentin olduğunu tam başa düşməkdir.

USPTO-da aparılan axtarış 262 patent və ya CRISPR-Cas9 və 5000-dən çox ümumi CRISPR patentini siyahıya alan patent ərizəsini aşkar etdi. Və bunlar yalnız Cas9 üçün patent müraciətləridir. Bu, hələ kəşf edilməmiş digər Cas molekulları və ya Cas molekulları üçün artan patent sayına daxil deyil. Buraya Çin, Avropa, Böyük Britaniya və İsrail kimi digər böyük sintetik biologiya bölgələrindəki patent müraciətləri də daxil deyil.

CRISPR patentləri üçün rəqabətin gələcəkdə azalacağı güman edilmir, çünki daha çox şirkət və akademik mərkəzlər yarışa qoşulmağa çalışır. Yarış getdikcə qloballaşdı və daha çox ölkə CRISPR patentləri üçün müraciət edir - ayda 200 yeni patentlər verilir.

Aydın olmayan şey, bu çox sayda CRISPR patentinin elmin gələcəyinə necə təsir edəcəyidir. Texnologiyanın kommersiya istifadəsini məhdudlaşdırmaqla tərəqqiyə mane olacaqlar, yoxsa tədqiqatçılar üstün olub yeni müalicələri hamı üçün əlçatan edəcəklər? Toz çökəndə - əgər bu, ümumiyyətlə baş verirsə - ümid odur ki, CRISPR texnologiyası rəqabətli qiymətə geniş tətbiqlər üçün əlçatan olacaq. Biologiya mühəndisliyi gücü çox az adamla məhdudlaşmamalıdır. İndi Biologiya əsrindəyik. Əgər biz daha yaxşı bir gələcək qurmaq istəyiriksə, elmin təməl vədlərini tozda qoya bilmərik.

Əlavə araşdırmaya görə Marianna Limasa və bu əsər üçün əlavə yazıya görə Lana Bandoimə xüsusi təşəkkürlər.

Sintetik biologiyanın tibbin gələcəyini necə dəyişdirdiyi haqqında daha çox eşitmək istəyirsiniz? SynBioBeta-nın xüsusi Biopharma tədbirinə qoşulunBiletinizi bu gün alın!

Fiona Mişel

Fiona Mişel SynBioBeta-nın baş redaktorudur. O, tez-tez davamlılıq, CRISPR tədqiqatı, qida və kənd təsərrüfatı texnologiyası və kosmik səyahət üçün biotexnologiyaları əhatə edir. O, elmi yeniliklərin iqlim böhranımızla necə mübarizə apara biləcəyini və dünya miqyasında icmalara necə müsbət təsir göstərə biləcəyini göstərmək üçün həvəslidir.


Məsələlər

2015-ci ilin aprel ayında bir Çin qrupu CRISPR/Cas9-un (yaşayış qabiliyyəti olmayan) insan embrionlarına ilk tətbiqi haqqında məlumat verdi. Bu inkişaf, texnologiyanın azalan xərcləri ilə birlikdə texnologiyanın nə qədər istifadə ediləcəyi ilə bağlı böyük bioetik mübahisələrə səbəb oldu. Texnologiya iki əsas problemlə üzləşir.

Birinci məsələ fəlsəfi dilemmadır. Bu, CRISPR/Cas9-un genlərin gələcək nəslə ötürülməsindən məsul olan "mikrob xətti" hüceyrələri - yumurta və sperma - dəyişdirmək üçün nə dərəcədə istifadə edilməli olduğuna diqqət yetirir. Texnologiyanın dizayner körpələr yaratmaq üçün istifadə edilə bilməsi üçün daha uzun illər lazım olsa da, artıq bu məsələ ilə bağlı ictimai müzakirələr başlayıb. Qorxu o qədər böyükdür ki, bəzi elm adamları, o cümlədən CRISPR/Cas9-un pionerinə kömək edən bəzi alimlər onun mikrob hüceyrələrində istifadəsinə moratorium qoymağa çağırıblar.

İkinci məsələ təhlükəsizliklə bağlıdır. Əsas problemlərdən biri texnologiyanın hələ başlanğıc mərhələsində olması və genom haqqında biliklərin çox məhdud olmasıdır. Bir çox elm adamı xəbərdar edir ki, texnologiyanın dəqiqliyini artırmaq və genomun bir hissəsində edilən dəyişikliklərin başqa yerdə gözlənilməz nəticələrə səbəb ola biləcək dəyişikliklərə yol vermədiyinə əmin olmaq üçün hələ də çox iş lazımdır. Bu, texnologiyanın insan sağlamlığına yönəlmiş tətbiqlər üçün istifadəsinə gəldikdə xüsusilə vacib məsələdir. Digər kritik məsələ ondan ibarətdir ki, bitki və ya həşərat kimi orqanizm dəyişdirildikdən sonra onları vəhşi növdən ayırmaq çətindir və ətraf mühitə buraxıldıqdan sonra biomüxtəlifliyə təhlükə yarada bilər.

Siyasət qurucular hələ də texnologiyaya hansı məhdudiyyətlərin qoyulacağı barədə mübahisə edirlər. 2015-ci ilin aprelində ABŞ Milli Sağlamlıq İnstitutu insan embrionlarında CRISPR kimi genomun redaktə alətlərindən istifadə edən heç bir tədqiqatı maliyyələşdirməyəcəyini bildirən bir bəyanat verdi. Bu arada, Böyük Britaniyanın İnsan Gübrələmə və Embriologiya İdarəsi, bu cür araşdırmaların səlahiyyətinə düşəcək, CRISPR/Cas9 texnologiyasının 14 gündən kiçik insan-heyvan hibrid embrionlarında istifadə oluna biləcəyini bildirdi. Bu sahədə çalışan hər hansı bir tədqiqatçı əvvəlcə Agentlikdən lisenziya almalıdır. Böyük Britaniyanın digər aparıcı tədqiqat şuraları klinika öncəsi tədqiqatlarda CRISPR/Cas9 və digər genom redaktə vasitələrinin davamlı istifadəsini dəstəklədiklərini bildirdilər.

Tənzimləyicilər CRISPR/Cas9 ilə hansı məhdudiyyətlərin tətbiq edilməsini müzakirə edərkən, texnologiya böyük patent mübahisəsinin predmetinə çevrildi. Texnologiyanın patentləşdirilməsi üçün ilk ərizə DuPont tərəfindən 2007-ci ilin martında verilmişdir (WO/2007/025097). Bu, qida istehsalı, yemlər, kosmetika, şəxsi qulluq məhsulları və baytarlıq məhsulları üçün faqlara davamlı bakteriya ştammlarının yaradılması texnologiyasından istifadəni əhatə edir. O vaxtdan bəri üç böyük maliyyələşdirilən start-up biotexnologiya şirkəti və yarım düzün universitet patentlər təqdim edib. ABŞ-da iki əsas rəqabətli patent iddiası qaldırılıb. 25 may 2015-ci ildə təqdim edilən birinci sənəd, Berkli Kaliforniya Universitetində Cennifer Doudna və əvvəlcə Vyana Universitetində, indi isə Almaniyada Helmholz İnfeksion Tədqiqatlar Mərkəzində işləyən Emmanuelle Charpentierin rəhbərlik etdiyi işlərə əsaslanır. Ərizədə 155 iddia var və müxtəlif hüceyrə növləri üçün çoxsaylı tətbiqləri əhatə edir (ABŞ Patent Müraciəti No. PCT/US2013/032589). İkincisi, MIT-Harvard Geniş İnstitutu tərəfindən 12 dekabr 2012-ci ildə Feng Zhang-ın eukaryotik hüceyrələrdə genomun redaktəsi üçün CRISPR/Cas9 istifadəsinə yönəlmiş işi üçün təqdim edilmişdir. O, sürətli yol statusu aldı və 15 aprel 2014-cü ildə verildi (ABŞ Patenti No 8,697,359). 2015-ci ilin aprelində Charpentier və Kaliforniya və Vyana Universitetləri ABŞ Patent və Ticarət Nişanları İdarəsinə patentə etiraz etdilər. Patent mübahisəsinin həlli bir neçə il çəkəcək. Patentlər üzərində hüquqi mübahisələrin əsas tədqiqatlar üçün CRISPR-dən istifadəyə təsir göstərməsi ehtimalı azdır, çünki texnologiya açıq mənbəli repozitoriya vasitəsilə mövcuddur. Bununla belə, bu texnikadan istifadə edərək klinik tətbiqlərə təsir göstərə bilər.

Bu elmi profil Lara Marks tərəfindən 2016-cı ilin iyun ayında Silvia Camporesi, Xiofan Zeng və Jonathan Lind tərəfindən səxavətli töhfə ilə yazılmışdır. Parça 2020-ci ilin oktyabrında Lara Marks tərəfindən yeniləndi.


Gen redaktə edən "qayçı" aləti CRISPR-Cas9 həm də genetik "dimmer açarı" ola bilər

Laboratoriyada yetişdirilmiş bakteriyalarla apardıqları bir sıra təcrübələrdə Johns Hopkins alimləri CRISPR-Cas9 genləri üçün genetik dimmer açarı kimi geniş istifadə olunan gen kəsici sistem CRISPR-Cas9-un ikinci rolunun olduğuna dair sübutlar tapdılar. Onun CRISPR-Cas9 fəaliyyətini azaltmaq və ya azaltmaq rolu alimlərə tədqiqat məqsədləri üçün hüceyrələrin genetik mühəndisliyi üçün yeni yollar hazırlamağa kömək edə bilər.

İlk dəfə 1987-ci ildə bağırsaq bakteriyasının genomunda müəyyən edilən CRISPR-Cas9, 25 il sonra həyata keçirilən digər hüceyrə növlərində DNT ardıcıllığını kəsmək potensialına malik təbii olaraq meydana gələn, lakin qeyri-adi genlər qrupudur. Onun gen mühəndisliyindəki dəyəri canlı hüceyrələrdə, o cümlədən insan hüceyrələrində proqramlaşdırıla bilən gen dəyişikliyi sürətlə təqdir edildi və onun bütün dünyada minlərlə laboratoriyada genom "redaktoru" kimi geniş istifadəsi keçən il kimya üzrə Nobel mükafatının verilməsi zamanı tanındı. onun amerikalı və fransız birgə tərtibatçılarıdır.

CRISPR çoxluqlu, müntəzəm aralıqlı qısa palindromik təkrarları ifadə edir. CRISPR ilə əlaqəli protein 9-a istinad edən Cas9, DNT dilimini yaradan fermentin adıdır. Johns Hopkins Universiteti Tibb Məktəbinin molekulyar biologiya və genetika professoru Joshua Modell deyir ki, bakteriyalar təbii olaraq virus və ya digər potensial zərərli DNT-ni kəsmək və təhlükəni aradan qaldırmaq üçün CRISPR-Cas9-dan istifadə edir. Bu rolda Modell deyir: "CRISPR təkcə immun sistemi deyil, o, DNT-nin qısa bir parçasından tutaraq əvvəllər qarşılaşdığı təhlükələri xatırlaya bilən adaptiv immun sistemidir. Bu kubok çəkilişləri daha sonra Cas9-a nə kəsiləcəyini söyləyən "bələdçi RNT"lərə kopyalanır.

Elm adamları uzun müddətdir ki, CRISPR-Cas9 mexanizminin dəqiq addımlarını və onun bakteriyalardakı fəaliyyətinin necə yuxarı və ya aşağı yığıldığını tapmaq üçün çalışıblar. Ümumi, boğaz ağrısına səbəb olan bakteriya üçün CRISPR-Cas9 gen kəsici sistemini alovlandıran və ya maneə törədən genləri axtarırıq Streptococcus pyogenes, Johns Hopkins alimləri sistemin bu aspektinin necə işlədiyinə dair bir ipucu tapdılar.

Konkret olaraq, elm adamları CRISPR-Cas9 sistemində aktivləşdirildikdə bakteriyalarda sistemin aktivliyinin kəskin artmasına səbəb olan gen tapıblar. Bu genin məhsulu Cas9-u CRISPR sistemini yığışdırmaq üçün "qayçı" kimi deyil, əyləc kimi fəaliyyət göstərmək üçün yenidən proqramlaşdırdığı ortaya çıxdı.

"Toxunulmazlıq nöqteyi-nəzərindən bakteriyalar hüceyrəni təhdidlərdən xilas etmək üçün CRISPR-Cas9 fəaliyyətini gücləndirməlidirlər, lakin immun sistemi səhvən bakteriyaların komponentlərinə hücum etdikdə otoimmünitetin qarşısını almaq üçün də onu azaltmalıdırlar" deyir. aspirant Rachael Workman, Modellin laboratoriyasında işləyən bakterioloq.

“Əyləc”in təfərrüatlarını daha da dəqiqləşdirmək üçün komandanın növbəti addımı deaktivləşdirilmiş genin (tracrRNA) məhsulunu daha yaxşı başa düşmək idi. RNT DNT-nin genetik qohumudur və zülalların istehsalı üçün DNT "təlimatlarını" yerinə yetirmək üçün çox vacibdir. TracrRNA-lar zülal yaratmayan unikal RNT ailəsinə aiddir. Əvəzində, onlar Cas9 fermentinə işğalçı virusun kubok vuruşunu ehtiva edən bələdçi RNT-ni daşımağa və virusun uyğun DNT ardıcıllığını kəsməyə imkan verən bir növ iskele rolunu oynayırlar.

TracrRNA iki ölçüdə olur: uzun və qısa. Müasir gen kəsici CRISPR-Cas9 alətlərinin əksəriyyəti qısa formadan istifadə edir. Bununla belə, tədqiqat qrupu deaktivləşdirilmiş gen məhsulunun funksiyası tamamilə naməlum olan tracrRNA-nın uzun forması olduğunu aşkar etdi.

TracrRNA-nın uzun və qısa formaları quruluşca oxşardır və ümumi olaraq Cas9-a bağlanma qabiliyyətinə malikdir. Qısa formada tracrRNA da bələdçi RNT-yə bağlanır. Bununla belə, uzun formalı tracrRNA-nın bələdçi RNT-yə bağlanmasına ehtiyac yoxdur, çünki onun tərkibində artıq bələdçi RNT-ni təqlid edən bir seqment var. Modell deyir: "Əsasən, uzun formalı tracrRNA-lar qısa formada tracrRNA və bələdçi RNT funksiyasını birləşdirdi".

Bundan əlavə, tədqiqatçılar müəyyən etdilər ki, bələdçi RNT-lər normal olaraq viral DNT ardıcıllığını axtararkən, uzun formalı tracrRNA-lar CRISPR-Cas9 sisteminin özünü hədəfləyir. Uzun formada olan tracrRNA DNT-ni kəsmək əvəzinə onun üzərində oturmağa meyllidir. Bu, genin müəyyən bir bölgəsində baş verdikdə, o genin ifadə edilməsinin və ya funksional olmasının qarşısını alır.

Bunu təsdiqləmək üçün tədqiqatçılar genetik mühəndislikdən istifadə edərək müəyyən bir bölgənin uzun forması olan tracrRNA-nın uzunluğunu dəyişdirərək trakrRNA-nın daha çox bələdçi RNT kimi görünməsini təmin etdilər. Onlar tapdılar ki, dəyişdirilmiş uzun formalı tracrRNA ilə Cas9 yenidən özünü qayçı kimi aparır.

Digər təcrübələr göstərdi ki, çoxlu miqdarda uzun formada tracrRNA olan laboratoriyada yetişdirilən bakteriyalarda CRISPR ilə əlaqəli bütün genlərin səviyyələri çox aşağıdır. Uzun formalı tracrRNA bakteriyalardan çıxarıldıqda, CRISPR-Cas9 genlərinin ifadəsi yüz dəfə artdı.

Uzun formada tracrRNA olmayan bakterial hüceyrələr üç gün ərzində laboratoriyada becərildi və uzun formalı tracrRNA-nı ehtiva edən oxşar mədəni hüceyrələrlə müqayisə edildi. Təcrübənin sonunda uzun formalı tracrRNA-ya malik olmayan bakteriyalar tamamilə ölmüşdü ki, uzun formada tracrRNA normal olaraq hüceyrələri CRISPR-Cas9 aktivliyi çox yüksək olduqda baş verən xəstəlik və ölümdən qoruyur.

"Biz uzun formanın CRISPR ilə əlaqəli fəaliyyətini repressiya etdiyi, lakin aradan qaldırmadığı fikrini almağa başladıq" dedi Workman.

Uzun formalı tracrRNA-nın digər bakterial genləri basdırmaq üçün yenidən proqramlaşdırıla biləcəyini görmək üçün tədqiqat qrupu uzun formalı tracrRNA-nın boşluq bölgəsini dəyişdirərək yaşıl flüoresan istehsal edən bir gen üzərində oturmağa icazə verdi. Uzun formalı tracrRNA-nın bu mutasiya edilmiş versiyası olan bakteriyalar, normal uzun formalı tracrRNA-nı ehtiva edən bakteriyalardan daha az yaşıl rəngdə parıldadı və bu, uzun formalı tracrRNA-nın digər bakterial genləri sıralamaq üçün genetik olaraq hazırlana biləcəyini göstərir.

Tədqiqatçılar həmçinin Streptococcus bakteriya qrupunun təxminən 40%-də uzun formalı tracrRNA-nın genetik komponentlərini tapdılar. Uzun formalı tracrRNA-ya malik olmayan bakterial suşların əlavə tədqiqi, Workman deyir ki, potensial olaraq onların CRISPR-Cas9 sistemlərinin bütöv olub-olmadığını və bakteriyaların CRISPR-Cas9 sistemini geri qaytara biləcəyi digər yolları aşkar edəcək.

Təcrübələrin aşkar etdiyi dimmer qabiliyyəti, Modell deyir ki, tədqiqat məqsədləri üçün gen fəaliyyətini tənzimləməyə yönəlmiş yeni və ya daha yaxşı CRISPR-Cas9 alətlərinin dizaynı üçün imkanlar təqdim edir. "Gen redaktə ssenarisində tədqiqatçı gen fəaliyyətini maneə törətmək üçün uzun forma tracrRNA-dan istifadə etməklə yanaşı, müəyyən bir geni kəsmək istəyə bilər" deyir.


Yeni, sürətli CRISPR/Cas9 metodu zebra balığının onurğa beyni regenerasiyasında əsas genləri müəyyən edir

Yeni, sürətli skrininq yanaşması zebra balığının onurğa beyni zədələrinin təmirində mühüm rol oynayan immun sistemi ilə əlaqəli genləri müəyyən etmək üçün CRISPR/Cas9 texnologiyasından istifadə edir. Böyük Britaniyanın Edinburq Universitetindən Marcus Keatinge və Themistoklis Tsarouchas və həmkarları bu tapıntıları açıq giriş jurnalında təqdim edirlər. PLOS Genetika.

İnsanlarda və digər məməlilərdə kəsilmiş onurğa beyni sinir əlaqələri sağalmır, ona görə də onurğa beyni zədəsi daimi iflicə səbəb ola bilər. Bunun əksinə olaraq, zebra balığı makrofaqlar tərəfindən idarə olunan iltihabı əhatə edən bir prosesdə onurğa beyni zədəsindən sağalmağa qadirdir - bir növ immunitet sistemi hüceyrəsi. Bununla belə, makrofaqların zebra balığında onurğa beyninin bərpasına kömək etdiyi dəqiq proses sirli olaraq qalır.

Bu prosesi aydınlaşdırmağa kömək etmək üçün Keatinge, Tsarouchas və həmkarları zebra balığının onurğa beyninin bərpasında iştirak edən makrofaqlarla əlaqəli genləri sürətlə müəyyən etmək üçün yeni bir üsul hazırladılar. Strategiya CRISPR/Cas9 texnologiyasından istifadə edir ki, bu da tədqiqatçılara xüsusi genləri hədəf almağa və onları pozmağa imkan verir və bununla da onların funksiyasını aşkar edir. Sintetik RNT Oligo CRISPR bələdçi RNT-ləri (sCrRNAs) kimi tanınan molekullar bu genə xüsusi hədəflənməyə imkan verir.

Tədqiqatçılar yeni metodu sürfə zebra balığında onurğa beyni regenerasiyasını öyrənmək üçün tətbiq ediblər. Metodun açarı onurğa beyni iltihabı ilə əlaqəli regenerasiyada potensial olaraq mühüm rol oynadığı bilinən genləri hədəf alan 350-dən çox sCrRNA-nı sınaqdan keçirdikləri bir əvvəlcədən yoxlama mərhələsi idi. Bu sCrRNA-ların zebra balığına təqdim edilməsi, pozulduqda onurğa beyni zədəsindən sağalmanı pozan 10 geni müəyyən etməyə imkan verdi.

Əlavə təhlillər, yeni metodu təsdiq edərək, kəsilmiş onurğa siniri əlaqələrinin təmiri üçün çox vacib görünən dörd genə qədər siyahını daraltdı. Xüsusilə bir gen, tgfb1, bərpa prosesi zamanı iltihabın idarə edilməsində mühüm siqnal rolunu oynayır.

Yeni üsul və tapıntılar zebra balığında onurğa beyni bərpası anlayışını dərinləşdirməyə kömək edə bilər. Tədqiqatçılar həmçinin deyirlər ki, bu üsul digər bioloji proseslərdə də mühüm rol oynayan genləri yoxlamaq üçün uyğunlaşdırıla bilər.

Müəlliflər əlavə edirlər: "Zebra balığı zədədən sonra onurğa iliklərini tam bərpa edə bilir. Yeni və çox sürətli yoxlama platformasından istifadə edərək, biz regenerasiya üçün vacib olan immun sisteminin genlərini aşkar edirik. Biz tapdıqlarımızın zərdabın zədələnməsinin mümkünsüzlüyünə dair yeni anlayışlara gətirib çıxaracağını düşünürük. məməlilərin bərpası və bizim çox yönlü skrininq platformamız zebra balıqlarında digər xəstəlik və ya zədə modellərinə uyğunlaşdırılacaq."


Terapiya üçün CRISPR-Cas9: çətinliklər və onların aradan qaldırılması yolları

Sundaram Acharya,. Debojyoti Chakraborty, CRISPR-Cas9 Sistemi ilə Genom Mühəndisliyi, 2020

Mücərrəd

Kümelənmiş müntəzəm aralıqlı qısa palindromik təkrar/CRISPR ilə əlaqəli (CRISPR Cas) son illərdə genomun redaktəsi üçün yenidən təyin edilmiş prokaryotik adaptiv immun sisteminin tərkib hissəsidir. Bu sistemin dəqiqliyi, sadəliyi və çevikliyi biotexnologiya və təbabətə əsas tədqiqatları əhatə edən geniş bioloji tətbiqlər sahəsi açmışdır. Bundan əlavə, CRISPR-in multipleksləşdirmə imkanları monogen və yoluxucu həmkarları ilə birlikdə ümumi poligenik pozğunluqların modelləşdirilməsi və ya korreksiyası üçün perspektivli bir yanaşma təklif edir. Baxmayaraq ki, CRISPR tam dəqiq olmasa və onun spesifikliyi və çatdırılma üsulları ilə bağlı suallar qalmaqdadır, bu genom redaktə vasitəsinin möhkəmliyi və geniş tətbiqi bu problemləri həll etmək üçün çoxsaylı yollar açmışdır. Bu fəsildə biz CRISPR terapevtiklərinə doğru ilkin irəliləyişləri, mövcud çatdırılma üsullarını, terapevtik imkana çevrilməmişdən əvvəl CRISPR redaktə etməzdən əvvəl çətinlikləri və skamyadan çarpayıya tətbiq üçün mükəmməl CRISPR sisteminin yaradılması istiqamətində davam edən səyləri müzakirə edəcəyik.


CRISPR-Cas9 sistemində ApoCas9 nədir? - Biologiya

CSIR-Genomika və İnteqrativ Biologiya İnstitutu, Mathura Yolu, Yeni Dehli 110025, Hindistan
E-poçt: [email protected], [email protected]

Mücərrəd

CRISPR–Cas9 sistemi orqanizmlərin DNT ardıcıllığında dəyişikliklərin edilməsi prosesində inqilab etdi. RNT ilə idarə olunan DNT-nin bağlanması və parçalanmasının sadə modelinə əsaslanan bu molekulyar alətlər qutusu biologiya elmlərinin demək olar ki, bütün sahələrində tətbiq tapmışdır. CRISPR–Cas9-un hekayəsi, fiziki-kimyəvi struktur-funksiya tədqiqatlarından əhəmiyyətli girişlərdən istifadə edərək mühüm bioloji sualları həll etmək üçün bakterial adaptiv toxunulmazlığın bir komponentinin istifadə edildiyi kəşf və inkişafdan biridir. In this review, we trace the evolution of CRISPR–Cas9 from its predecessor genome editing tools and document its current status with an emphasis on chemical biology aspects of modulating its activity to generate a potent tool for gene therapy applications.


We would like to thank the Sharp lab members for discussion and critical reading of the manuscript, and M. Lindstrom for assistance on constructing figures. This work was supported by United States Public Health Service grants RO1-GM34277 and R01-CA133404 from the National Institutes of Health (P.A.S.), PO1-CA42063 from the National Cancer Institute (P.A.S.), and partially by Cancer Center Support (core) grant P30-CA14051 from the National Cancer Institute. X.W. is a Howard Hughes Medical Institute International Student Research fellow.

Maraqların toqquşması: The authors Xuebing Wu, Andrea J. Kriz and Phillip A. Sharp declare that they have no conflict of interests.

Supplementary Materials: The supplementary materials can be found online with this article at DOI 10.1007/s40484-014-0030-x.


New understanding of CRISPR-Cas9 tool could improve gene editing

The 3D structure of a base editor, comprised of the Cas9 protein (white and gray), which binds to a DNA target (teal and blue helix) complementary to the RNA guide (purple), and the deaminase proteins (red and pink), which switch out one nucleotide for another. (UC Berkeley graphic by Gavin Knott and Audrone Lapinaite)

Within a mere eight years, CRISPR-Cas9 has become the go-to genome editor for both basic research and gene therapy. But CRISPR-Cas9 also has spawned other potentially powerful DNA manipulation tools that could help fix genetic mutations responsible for hereditary diseases.

Researchers at the University of California, Berkeley, have now obtained the first 3D structure of one of the most promising of these tools: base editors, which bind to DNA and, instead of cutting, precisely replace one nucleotide with another.

First created four years ago, base editors are already being used in attempts to correct single-nucleotide mutations in the human genome. Base editors now available could address about 60% of all known genetic diseases – potentially more than 15,000 inherited disorders — caused by a mutation in only one nucleotide.

The detailed 3D structure, reported in the July 31 issue of the journal Elm, provides a roadmap for tweaking base editors to make them more versatile and controllable for use in patients.

“We were able to observe for the first time a base editor in action,” said UC Berkeley postdoctoral fellow Gavin Knott. “Now we can understand not only when it works and when it doesn’t, but also design the next generation of base editors to make them even better and more clinically appropriate.”

A base editor is a type of Cas9 fusion protein that employs a partially deactivated Cas9 — its snipping shears are disabled so that it cuts only one strand of DNA — and an enzyme that, for example, activates or silences a gene, or modifies adjacent areas of DNA. Because the new study reports the first structure of a Cas9 fusion protein, it could help guide the invention of myriad other Cas9-based gene-editing tools.

“We actually see for the first time that base editors behave as two independent modules: You have the Cas9 module that gives you specificity, and then you have a catalytic module that provides you with the activity,” said Audrone Lapinaite, a former UC Berkeley postdoctoral fellow who is now an assistant professor at Arizona State University in Tempe. “The structures we got of this base editor bound to its target really give us a way to think about Cas9 fusion proteins, in general, giving us ideas which region of Cas9 is more beneficial for fusing other proteins.“

Lapinaite and Knott, who recently accepted a position as a research fellow at Monash University in Australia, are co-first authors of the paper.

“This structure helps us understand base editors at a much deeper level,” said senior author Jennifer Doudna, UC Berkeley professor of molecular and cell biology and of chemistry and Howard Hughes Medical Institute investigator. “Now that we can see what we’re working with, we can develop informed strategies to improve the system.”

Editing one base at a time

In 2012, researchers first showed how to reengineer a bacterial enzyme, Cas9, and turn it into a gene-editing tool in all types of cells, from bacterial to human. The brainchild of Doudna and her French colleague, Emmanuelle Charpentier, CRISPR-Cas9 has transformed biological research and brought gene therapy into the clinic for the first time in decades.

The 3D structure of a base editor as it edits a stretch of DNA. (UC Berkeley graphic by Gavin Knott)

Scientists quickly co-opted Cas9 to produce a slew of other tools. Basically a mash-up of protein and RNA, Cas9 precisely targets a specific stretch of DNA and then precisely snips it, like a pair of scissors. The scissors function can be broken, however, allowing Cas9 to target and bind DNA without cutting. In this way, Cas9 can ferry different enzymes to targeted regions of DNA, allowing the enzymes to manipulate genes.

In 2016, David Liu of Harvard University and the Broad Institute of the Massachusetts Institute of Technology and Harvard combined a Cas9 with another bacterial protein to allow the surgically precise replacement of one nucleotide with another: the first base editor.

While the early adenine base editor was slow, the newest version, called ABE8e, is blindingly fast: It completes nearly 100% of intended base edits in 15 minutes. Yet, ABE8e may be more prone to edit unintended pieces of DNA in a test tube, potentially creating what are known as off-target effects.

The newly revealed structure was obtained with a high-powered imaging technique called cryo-electron microscopy (cryoEM). Activity assays showed why ABE8e is prone to create more off-target edits: The deaminase protein fused to Cas9 is always active. As Cas9 hops around the nucleus, it binds and releases hundreds or thousands of DNA segments before it finds its intended target. The attached deaminase, like a loose cannon, doesn’t wait for a perfect match and often edits a base before Cas9 comes to rest on its final target.

Knowing how the effector domain and Cas9 are linked can lead to a redesign that makes the enzyme active only when Cas9 has found its target.

“If you really want to design truly specific fusion protein, you have to find a way to make the catalytic domain more a part of Cas9, so that it would sense when Cas9 is on the correct target and only then get activated, instead of being active all the time,” Lapinaite said.

The structure of ABE8e also pinpoints two specific changes in the deaminase protein that make it work faster than the early version of the base editor, ABE7.10. Those two point mutations allow the protein to grip the DNA tighter and more efficiently replace A with G.

“As a structural biologist, I really want to look at a molecule and think about ways to rationally improve it. This structure and accompanying biochemistry really give us that power,” Knott added. “We can now make rational predications for how this system will behave in a cell, because we can see it and predict how it’s going to break or predict ways to make it better.”

“While base editors are now widely used to introduce precise changes in organisms ranging from bacteria to plants to primates, no one has previously observed the three-dimensional molecular structure of a base editor,” said Liu, who obtained his Ph.D. in 1999 from UC Berkeley and is a Howard Hughes Medical Institute investigator. “This collaborative project reveals the beautiful molecular structure of a state-of-the-art, highly active base editor — ABE8e — caught in the act of engaging a target DNA site.”

In addition to Lapinaite, Knott, Doudna and Liu, other paper co-authors are Cody Palumbo and Peter Beal of UC Davis, Enrique Lin-Shiao of UC Berkeley and Michelle Richter and Kevin Zhao of the Broad Institute, a collaboration between Harvard and the Massachusetts Institute of Technology.


Videoya baxın: CRISPR. 5 Incredible Applications Of CRISPR. Ft @The ScienceVerse (Iyul 2022).


Şərhlər:

  1. Shepard

    İT-də bir şey də əla bir fikirdir, mən dəstəkləyirəm.

  2. Tum

    Zarafat edirsən?

  3. Waluyo

    Bu heyranedici ifadə qəsdən olmalıdır

  4. Avery

    yox, sərin,

  5. Theodore

    Bağışlayın, amma başqa yolla getməyi təklif edirəm.

  6. Aldfrith

    In my opinion the theme is rather interesting. I suggest you it to discuss here or in PM.



Mesaj yazmaq