Məlumat

Məhdudlaşdırıcı fermentlər: Molekulyar qayçı

Məhdudlaşdırıcı fermentlər: Molekulyar qayçı


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

1970-ci illərdən etibarən DNT molekulunu məhdudlaşdıran ferment izolyasiyası ilə təhlil etmək daha asan oldu.

Bu fermentlərdir endonükleazlaryəni içəridə (deməli prefiks) endo- içəridə) DNT molekullarını yaxşı müəyyən edilmiş yerlərə kəsərək.

Bunlar normal olaraq bakteriyalar tərəfindən istehsal olunan viruslardan qorunma xüsusiyyətinə sahib olan fermentlərdir. Bu maddələr həmişə DNT molekulunu müəyyən nöqtələrə "soxur" və tərkibində olan parçaların istehsalına səbəb olur yapışan ipuçları, eyni fermentlə kəsilmiş DNT molekullarının digər uclarına bağlaya bilər.

Genetik Mühəndislikdə DNT fraqmentlərinin yaranmasına xidmət edir, in vitro (test borusunda və ya laboratoriyada), yeni molekullar, müxtəlif məlumatlar kəsmək və yapışdırmaq.

İzolyasiya ediləcək ilk məhdudlaşdırıcı fermentlərdən biri idi EkoRI, bakteriyalar tərəfindən istehsal olunur Escherichia coli. Bu ferment yalnız ardıcıllığı tanıyır GAATTC və həmişə G və birinci A arasında hərəkət edir.

"Bir kəsilmiş" sayt, bir fermentin saytı, hədəf sayılan sayt olaraq bilinir. Soruşa bilərsiniz ki, bu ferment niyə bakteriyaların DNT-sində hərəkət etmir? Bu, bakteriyaların genetik materialına məhdudlaşdırıcı fermentlərin təsirini maneə törədən digər qoruyucu fermentlərin olması ilə əlaqəli deyil.

the məhdudlaşdırma fermentləri xüsusi DNT ardıcıllığını tanıyır və hərəkət edirmüəyyən bazalara bağlı iki ardıcıl əsaslar arasındakı bir fosfodiester bağının məhv edilməsini katalizləşdirərək. Fermentin kəsdiyi, yəni hidrolizi təşviq etdiyi nukleotidlər eyni xüsusi tanıma ardıcıllığı içərisindədir (şəkilə bax).

Hər bir DNT molekulu, bütün uzunluğu boyunca GAATTC ardıcıllığının çoxsaylı təkrarlarından ibarət ola bilər. Buna görə EcoRI fermenti ilə təmasda olduqda, DNT telini müxtəlif ölçülü bir neçə parça əmələ gətirərək bir neçə yerə "kəsmək" mümkündür.

Bu fərqli yarıqlı DNT parçaları necə ayrıldığını aşağıda görəcəyik.